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Técnicas de amostragem e

semeadura em microbiologia

Profa. Lina Alegro


Profa. Valéria Amin
Recepção e preparo das
amostras

 Registrar dados sobre amostra


 produto
 solicitante
 data e local
 de coleta
 de análise
 tipo de análise
 meios utilizados
 resultados
Recepção e preparo das
amostras

 Observar as condições de embalagem e


transporte

 Homogeneizar produto

 Desinfetar embalagem com álcool iodado


Recepção e preparo das
amostras

 Abrir assepticamente a embalagem

 fluxo laminar ou bico de Bunsen


 instrumentos, utensílios estéreis

 autoclave
 estufa
 álcool 70% + flambagem
Recepção e preparo das
amostras

 Retirar unidade analítica


 10, 25 ou 50g ou ml

 peças
 formas de queijo, de presunto, etc.
 coletar de diversos pontos
 peixes inteiros, carcaças de grandes animais
 esfregaço de superfície
Técnica do esfregaço de
superfície
 molde estéril
 100 cm2 ou 25 cm2
 zaragatoa esterilizada (“Swab”) e
umedecida
 coletar amostra
 coletar swabs em diluente
 anotar volume de diluente usado
 importante para calcular população / cm2
Recepção e preparo das
amostras

 Retirar unidade analítica

 peças
 carcaças de aves, coelhos, etc
 lavagem da carcaça
Recepção e preparo das
amostras
 Retirar unidade analítica
 amostras heterogêneas
 bolo recheado; marmitex
 coletar porções de todos os componentes
 amostras congeladas
 descongelamento sob refrigeração/ 18h
 amostras gordurosas
 manteiga, margarina
 fundir em banho-maria 40oC/ 15’
Recepção e preparo das
amostras
 Preparo da diluição
 diluir 1:9
 diluentes
 solução peptona 0,1%
 solução salina 0,85%
 tampão fosfato pH 7,2
 solução salina peptonada
 Homogeneização
 homegeneizador de pistões “stomacher”
 30 - 60”
Técnicas de cultivo em
microbiologia

Profa. Lina Alegro


Profa. Valéria Amin
Meio líquido
Meio semi-sólido
Meio sólido
Meio sólido
Preparo das diluições
seriadas
25g
+ Dil. 10-1 (0,1g)
225ml diluente 1 ml

Dil. 10-2 9ml diluente


(0,01g)
1 ml

9ml diluente Dil. 10-3


(0,001g)
1 ml
... 9ml diluente
Meio sólido
Incubação

 Temperatura.
Incubação

 Atmosfera.

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