Faculdade de Biotecnologia Curso: Engenharia de Bioprocessos

Disciplina: Engenharia Genética e Transgênica Professor: Diego Assis

Discente: João Almir Furtado e Silva Matrícula: 201974440022
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Questão 01 – Quais as características gerais de transcrição?

R: Precursores de trifosfatos de ribonucleotídeos, apenas um filamento de DNA é utilizado
como molde, não há a necessidade de um iniciador ou primer e seguem o sentido de síntese
de 5’ a 3’.
Questão 02 – Qual a cadeia da RNA polimerase reconhece a região promotora dos genes?
R: cadeia sigma, a qual há um conjunto de fatores sigmas para cada gene.
Questão 03 – Como ocorre a terminação da transcrição?
R: O processo de terminação da transcrição se dar pela dependência de uma proteína chamada
rho ( rho-dependente), a qual se estabelece pela quebra de sequências de bases nitrogenadas
de nucleotídeos, em que a enzima RNA polimerase, por algum momento, inativa sua atividade
por decorrência da formação de grampos com ligações de hidrogênio, e a proteína rho se liga a
sequência rut e no momento de pausa da enzima RNA polimerase ocorre o encontro da
proteína com a enzima, ocorrendo o término da transcrição. Além disso, para a terminação
designada de rho-independente ocorre um processo semelhante com diferenciação de obter
sequências nucleotídicas ricas em guanina e citosina, as quais apresentam repetições
invertidas e na etapa de transcrição destas ocorre a formação de grampos e assim a
terminação, por “stem-loops”.
Questão 04 – Quais os componentes genéticos básicos que precisam existir numa região do
DNA pra um sistema de expressão gênica ser funcional? Explique a função de cada um.
R: Promotor, região de regulação, RBS, a qual é estabelecida pelo sítio de ligação ao ribossomo,
gene codificante e regiões de terminações.
Questão 05 – Descreva como ocorre o controle da transcrição do operon da arginina.
R: O controle se dar pela ativação da atividade de um operador quando este se liga, ou não, a
uma proteína repressora, responsável por conter correpressores, que trabalhando juntos vão
impedir a atividade da enzima RNA polimerase no promotor.
Questão 06 – Descreva como ocorre o controle da transcrição do operon da lactose.
R: Através do controle da glicose, devido as disponibilidades de cAMP no processo de
transcrição, a qual o sítio de proteínas ativas catabolizadas se ligam a cAMP e lactose para
funcionalidade da enzima RNA polimerase no processo. Isso se dar quando há uma boa
disponibilidade de lactose em que há o desligamento do operador pelo isômero alolactose que
irá se ligar ao repressor lac, ativando a ativadade enzimática do processo.
Questão 07 – Descreva o funcionamento das enzimas de transcrição.
R: São sequências de DNA que podem ser lidas nas duas fitas e no mesmo sentido químico,
com a função de cortar genes de interesse, em sítios de restrição, para aplicação de DNA
recombinante.
Questão 08 – Quais os componentes dos vetores de clonagem?
R: Vetor e plasmídeo.
Questão 09 – Diferencie um vetor de clonagem molecular de um vetor de expressão gênica
quanto a composição de elementos genéticos.
R: Vetor de expressão gênica é necessário a interligação de alguns fatores: promotor, sítio de
ligação ao ribossomo, gene codificante e uma região de terminação.
Questão 10 - Qual a diferença entre transgênicos e organismos geneticamente modificados?
R: OGM’S são seres que tiveram sequências de genes alteradas por técnicas de engenharia
genética e transgênicos é a fusão de um material genético de duas espécies diferentes.
Questão 11 - Descreva as 3 fases do mecanismo de ação do sistema CRISPR
R: Incorporação de novos espaçadores, expressão e processamento do CRISPR RNA e
interferência CRISPR.
Questão 12 – Por que o sistema CRISPR não é capaz de interferir e degradar o DNA da própria
bactéria?
R: Devido a transcrição do CRISPR RNA ocorrer somente na região do spacer, a qual há o
pareamento e a clivagem é somente do DNA alvo.