Tecnologias de Manipulação do DNA

Ocasionalmente, as manobras de sequenciamento e manipulação de

DNA são chamadas de tecnologia do DNA.

A tecnologia do DNA é importante para a biologia geral e aplicada

(prática). Por exemplo, uma técnica usada para fazer muitas cópias
de uma sequência de DNA chamada reação em cadeia da
polimerase (PCR) é usada em muitos testes de diagnóstico médico e
aplicações forenses, bem como em pesquisas de laboratório geral.
Vejamos alguns exemplos de técnicas de análise e manipulação de
DNA comumente usadas na biologia molecular moderna:

Clonagem do DNA:

 Na clonagem do DNA, os pesquisadores "clonam" – fazem

muitas cópias do fragmento de DNA de interesse, tal como um
gene.
 Em muitos casos, a clonagem do DNA envolve a inserção do
gene de interesse em uma molécula de DNA circular chamada
plasmídeo. O plasmídeo pode ser replicado nas bactérias,
fazendo muitas cópias do gene de interesse.
 Em alguns casos, o gene é expresso também nas bactérias pela
formação de uma proteína (por exemplo, a insulina usada pelos
diabéticos).


Reação em cadeia da polimerase (PCR):

 A reação em cadeia da polimerase é a técnica de manipulação

do DNA mais amplamente utilizada

 aplicações em quase todas as áreas da biologia moderna.

 As reações da PCR produzem várias cópias da sequência de

DNA de interesse, a partir da sequência de um DNA modelo.

 Essa técnica pode ser usada para fazer muitas cópias de um

DNA que está presente em pequenas quantidades (por
exemplo, uma gotícula de sangue na cena do crime).

Eletroforese em gel:

 A eletroforese em gel é uma técnica usada para visualizar os

fragmentos de DNA (exame direto).
 Por exemplo, os pesquisadores podem analisar os resultados da
PCR examinando os fragmentos de DNA que ela produz na
reação em um gel.
 A eletroforese em gel separa os fragmentos de DNA com base
em seu tamanho, em seguida os fragmentos são pigmentados
com um corante que possibilita a visualização pelo
pesquisador.
Sequenciamento de DNA:
 O sequenciamento de DNA consiste em determinar a sequência
das bases dos nucleotídeos (As, Ts, Cs e Gs) na molécula de
DNA.
 Em alguns casos, apenas um fragmento de DNA é sequenciado
por vez, enquanto em outros casos muitos fragmentos de DNA
(como um genoma inteiro) podem ser sequenciados
conjuntamente.