EDF0086 - BASES DE BIOFÍSICA E BIOQUÍMICA APLICADA A EDUCAÇÃO FÍSICA

Enzimologia
Básica
Andre.santoscosta@ufpe.br

@prof.andre.costa
● TODAS AS REAÇÕES DO CORPO SÃO MEDIADAS POR ENZIMAS (PROTEÍNAS CATALISADORAS QUE
AUMENTAM A VELOCIDADE DAS REAÇÕES SEM SEREM ALTERADAS NESTE PROCESSO).

● AS ENZIMAS CANALIZAM SELETIVAMENTE OS SUBSTRATOS PARA ROTAS ÚTEIS EM MUITAS REAÇÕES

BIOLÓGICAS QUE SÃO ENERGETICAMENTE POSSÍVEIS.

● ENZIMAS - PROTEÍNAS QUE REGULAM AS VIAS METABÓLICAS DAS CÉLULAS. ELAS NÃO FAZEM COM
QUE A REAÇÃO OCORRA, MAS REGULAM A VELOCIDADE DESTA REAÇÃO.

● CATÁLISE - MUDANÇA DE VELOCIDADE DE UMA REAÇÃO QUÍMICA DEVIDO À ADIÇÃO DE UMA

SUBSTÂNCIA (CATALISADOR) QUE PRATICAMENTE NÃO SE TRANSFORMA AO FINAL DA REAÇÃO.

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 CADA ENZIMA RECEBE DOIS NOMES:
NOME CURTO/RECOMENDADO – PARA USO NO DIA-A-DIA;

● SUFIXO “ASE” UNIDO AO SUBSTRATO DA REAÇÃO (EX. GLICOSIDASE, UREASE, ARGINASE) OU UMA
DESCRIÇÃO DA AÇÃO REALIZADA (EX. LACTATO DESIDROGENASE, ADENILATO CICLASE).

NOME SISTEMÁTICO – COMPLETO, PARA IDENTIFICAÇÃO SEM AMBIGUIDADE;

● DIVIDIDAS EM CLASSES, SEGUNDO A UIBBM, COM NUMEROSOS SUBGRUPOS, COM O SUFIXO “ASE”
UNIDO A UMA DESCRIÇÃO RAZOAVELMENTE COMPLETA DA REAÇÃO QUÍMICA CATALISADA (EX. D-
GLICERALDEÍDO 3-FOSFATO:NAD OXIRREDUTASE)

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 enzimas Reação Catalisada
hidrolases tERMO GERAL PARA ENZIMAS QUE CATALISAM REAÇÕES HIDROLÍTICAS DE CLIVAGEM
NUCLEASES QUEBRAM ÁCIDOS NUCLÉICOS HIDROLISANDO AS LIGAÇÕES ENTRE OS NUCLEOTÍDEOS
Proteases QUEBRAM PROTEÍNAS NUCLÉICOS HIDROLISANDO AS LIGAÇÕES ENTRE OS AMINOÁCIDOS

SINTETASES NOME GENÉRICO PARA ENZIMAS QUE SINTETIZAM MOLÉCULAS EM REAÇÃO ANABÓLICAS CONDENSANDO JUNTAS 2 MOLÉCULAS MENORES

iSOMERASES CATALISAM O REARRANJO DE LIGAÇÕES DENTRO DE UMA ÚNICA MOLÉCULA

POLIMERASES CATALISAM REAÇÕES DE POLIMERIZAÇÃO COMO A SÍNTESE DE dna E rna
qUINASES CATALISAM A ADIÇÃO DE GRUPOS FOSFATOS A MOLÉCULAS. *
fOSFATASES CATALISAM A REMOÇÃO HIDROLÍTICA DE UM GRUPO FOSFATO DE UMA MOLÉCULA
NOME GERAL DE ENZIMAS QUE CATALISAM REAÇÕES NA QUAL UMA MOLÉCULA É OXIDADA ENQUANTO OUTRA É REDUZIDA. eNZIMAS DESSE TIPO SÃO TAMBÉM CHAMADAS
ÓXIDO - REDUTASES DE: OXIDASES, REDUTASES E DESIDROGENASES

ATPASES Próximo slide

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 atpases !
Hidrolisam ATP - Muitas proteínas, com uma gama variada de papéis
demandam energia e têm atividade de ATPase como parte de suas funções,
como, por exemplo. Proteínas-motriz como a miosina, e proteínas
transportadoras em membranas, como a bomba de sódio potássio.

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ENZIMAS SÃO CATALISADORES PROTÉICOS QUE AUMENTAM A VELOCIDADE DE UMA REAÇÃO QUÍMICA E
NÃO SÃO CONSUMIDOS DURANTE A REAÇÃO QUE CATALISAM.

A. SÍTIOS ATIVOS:
BOLSÃO OU FENDA ESPECIAL QUE CONTÉM AMINOÁCIDOS COM
CADEIAS LATERAIS QUE CRIAM SUPERFÍCIE TRIDIMENSIONAL COMPLEMEN-
TAR AO SUBSTRATO.

SÍTIO ATIVO LIGA-SE AO SUBSTRATO FORMANDO O COMPLEXO

ENZIMA-SUBSTRATO (ES). O COMPLEXO ES É CONVERTIDO EM ENZIMA-PRODU-
TO (EP) QUE, SUBSEQUENTEMENTE, DISSOCIA-SE EM ENZIMA E PRODUTO.

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7
 Produto

ENZIMA Complexo ENZIMA

enzima-substrato

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 Molécula de Substrato

SUBSTRATO Molécula da Enzima

Complexo Enzima-
Substrato

Molécula dos Produtos

ENZIMA

Molécula inalterada da Enzima

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 B. Eficiência Catalítica

REAÇÕES CATALISADAS POR ENZIMAS SÃO ALTAMENTE EFICIENTES, OCORRENDO 103 A 108 VEZES
MAIS RÁPIDO QUE AS NÃO CATALISADAS.

CADA MOLÉCULA DE ENZIMA É CAPAZ DE TRANSFORMAR 100 A 1000 MOLÉCULAS DE SUBSTRATO EM

PRODUTO.

* O NÚMERO DE MOLÉCULAS DE SUBSTRATO CONVERTIDO EM PRODUTO POR SEGUNDO POR

MOLÉCULA DE ENZIMA É DENOMINADO NÚMERO DE TURNOVER.

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 Turnover (1mol de produto em 1s) sem enzima

Turnover (1mol de produto em 1s) com enzima

Atividade enzimática (mol. s -¹ = kat) *

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 C. Especificidade:
AS ENZIMAS SÃO ALTAMENTE ESPECÍFICAS, INTERAGEM COM UM OU ALGUNS SUBSTRATOS
ESPECÍFICOS E CATALISAM SOMENTE UM TIPO DE REAÇÃO QUÍMICA.

Glicose Glicose
Maltose Complexo Enzima-
Substrato

Maltase Maltase

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 D. Cofatores

ALGUMAS ENZIMAS SE ASSOCIAM A UM COFATOR NÃO PROTÉICO, NECESSÁRIO PARA A ATIVAÇÃO

ENZIMÁTICA.
× ÍONS METÁLICOS: Zn+2 e Fe+2

× COENZIMAS (MOLÉCULAS ORGÂNICAS): NAD+, FAD, COENZIMA A

× GRUPO PROSTÉTICO – COENZIMA FORTEMENTE LIGADA QUE NÃO SE DISSOCIA DA ENZIMA (EX.
BIOTINA DAS CARBOXILASES)

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 Cofator

Enzima Enzima
Inativa Ativa

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 E. Regulação Propriedades da
A ATIVIDADE ENZIMÁTICA PODE
SER REGULADA:
AS ENZIMAS PODEM SER
enzima
ATIVADAS OU INIBíDAS DE
MODO QUE A VELOCIDADE DE
E. Regulação
FORMAÇÃO DOS PRODUTOS
RESPONDA ÀS NECESSIDADES
DA CÉLULA.

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 F. Localização Celular

MUITAS ENZIMAS ESTÃO LOCALIZADAS EM ORGANELAS ESPECÍFICAS DENTRO DA CÉLULA (NÚCLEO,

LISOSSOMO, MITOCÔNDRIA, CITOSOL), SERVINDO PARA ISOLAR O SUBSTRATO DA REAÇÃO OU PRODUTO DE
OUTRAS REAÇÕES COMPETITIVAS, FORNECER AMBIENTE FAVORÁVEL PARA A REAÇÃO E PARA ORGANIZAR
AS MILHARES DE ENZIMAS PRESENTES NA CÉLULA EM ROTAS ÚTEIS.

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MECANISMO DE AÇÃO ENZIMÁTICA, DUAS PERSPECTIVAS:

A) CATÁLISE EM TERMOS DE ALTERAÇÕES DE ENERGIA QUE OCORREM DURANTE UMA REAÇÃO

TODAS AS REAÇÕES QUÍMICAS TÊM UMA BARREIRA DE ENERGIA (ENERGIA

LIVRE DE ATIVAÇÃO) SEPARANDO OS SUBSTRATOS E PRODUTOS.

1. ENERGIA LIVRE DE ATIVAÇÃO (ELA) – DIFERENÇA ENTRE A ENERGIA

DOS SUBSTRATOS E UM INTERMEDIÁRIO DE ALTA ENERGIA QUE OCORRE
DURANTE A FORMAÇÃO DO PRODUTO.

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ela
ESTADO DE TRANSIÇÃO
ENERGIA Ea sem catalisador

REAGENTES Ea com catalisador

PRODUTOS

CAMINHO DA REAÇÃO 18
MECANISMO DE AÇÃO ENZIMÁTICA, DUAS PERSPECTIVAS:

2. VELOCIDADE DA REAÇÃO – DETERMINADA PELO NÚMERO DE MOLÉCULAS ENERGIZADAS.

QUANTO MENOR A ELA MAIS MOLÉCULAS TÊM ENERGIA SUFICIENTE PARA SUPERAR O ESTADO DE
TRANSIÇÃO SENDO MAIS RÁPIDA A VELOCIDADE DA REAÇÃO.

3. ROTA ALTERNATIVA DE REAÇÃO –A ENZIMA OFERECE ROTA DE REAÇÃO ALTERNATIVA COM MENOR ELA,
NÃO ALTERANDO A ENERGIA LIVRE DOS REATANTES OU PRODUTOS.

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MECANISMO DE AÇÃO ENZIMÁTICA, DUAS PERSPECTIVAS:

B) QUÍMICA DO SÍTIO ATIVO

UMA SÉRIE DE FATORES SÃO RESPONSÁVEIS PELA EFICIÊNCIA CATALÍTICA DAS ENZIMAS.

1. ESTABILIZAÇÃO E VISUALIZAÇÃO DO ESTADO DE TRANSIÇÃO (ESTABILIZAR O SUBSTRATO)

2. OUTROS MECANISMOS (CATÁLISE ÁCIDO-BÁSICA GERAL – DOAR/RECEBER PRÓTONS)

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 A. CONCENTRAÇÃO DO SUBSTRATO

1. VELOCIDADE MÁXIMA - VELOCIDADE DA REAÇÃO (v)=NÚMERO DE MOLÉCULAS DE SUBSTRATO

CONVERTIDO EM PRODUTO POR UNIDADE DE TEMPO (μM/min), PODENDO ATINGIR A Vmax.

O PLATÔ OBSERVADO NA VELOCIDADE DE REAÇÃO EM ALTAS CONCENTRAÇÕES DE SUBSTRATO

REFLETE A SATURAÇÃO DE TODOS OS SÍTIOS DE LIGAÇÕES DA ENZIMA.

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 Vmax
Km (Michaelis e Menten)
- [S] que faz com que a reação
ocorra a uma velocidade igual
a metade da velocidade
PLATÔ
máxima.
1/2 Vmax
Km Alto - baixa afinidade da E
pelo S, necessidade de alta [S]
para obter Velocidade de
reação igual a 1⁄2 Vmáx.

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B. TEMPERATURA

1. AUMENTO DA VELOCIDADE – DEVIDO AO NÚMERO AUMENTADO DE MOLÉCULAS COM ENERGIA

SUFICIENTE PARA ATRAVESSAR A BARREIRA DE ENERGIA E FORMAR OS PRODUTOS DA REAÇÃO;

2. DIMINUIÇÃO DA VELOCIDADE – UMA ELEVAÇÃO ADICIONAL DA TEMPERATURA PODE ACARRETAR

REDUÇÃO DA SUA VELOCIDADE DE REAÇÃO POIS PODE OCORRER DESNATURAÇÃO DA ENZIMA;

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C. PH

1. EFEITO DO pH SOBRE A IONIZAÇÃO DO SÍTIO - [H+];

2. EFEITO DO pH NA DESNATURAÇÃO DA ENZIMA - EXTREMOS DE pH;

3. pH ÓTIMO VARIA PARA DIFERENTES ENZIMAS – ex.: pepsina pH 2,0

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* QUALQUER SUBSTÂNCIA QUE POSSA DIMINUIR A VELOCIDADE DE UMA REAÇÃO CATALISADA
POR ENZIMA É DENOMINADO INIBIDOR. ESTES INIBIDORES PODEM SER REVERSÍVEIS E IRREVERSÍVEIS.

TIPOS DE INIBIÇÃO:
A) COMPETITIVA – INIBIDOR LIGA-SE REVERSIVELMENTE AO MESMO
SÍTIO QUE O SUBSTRATO;

Enzima Ativa Inibidor Competitivo

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TIPOS DE INIBIÇÃO:
B) NÃO COMPETITIVA - INIBIDOR E SUBSTRATO LIGAM-SE EM DIFERENTES SÍTIOS NA ENZIMA.

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