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CONFERENCIA 12.
TÍTULO: BIOCATALIZADORES.
 SUMARIO
• Introducción al estudio de los
biocatalizadores.
• Teoría del centro activo.

• Cinética enzimática.

Bibliografía: Cardellá Tomo I Cap: 14-16

Morfofisiología Cap: 2
 Objetivos:
Interpretar o mecanismo molecular de ação geral
dos biocatalisadores, com base nas
características estruturais e funcionais do
centro ativo.
Explicar o comportamento da velocidade das
reações catalisadas pelas enzimas a nível
molecular, tendo em conta os efeitos dos
agentes modificadores e a sua importância
clínica, relacionando-os com os problemas de
saúde da comunidade.
 CONDIÇÕES NECESSÁRIAS PARA
OCORRER UMA REAÇÃO QUÍMICA

• Deixe os reagentes entrarem em

contato.
• Devido à sua natureza química,
eles são capazes de reagir.
• Deixe suas moléculas colidirem
com força suficiente e na direção
certa.
• Las reacciones químicas pueden
ocurrir de forma más rápida o más
lenta.

• Velocidad de la reacción: Cantidad de

sustrato que desaparece o cantidad de
producto que aparece, en la unidad de
tiempo.
 DIAGRAMA DE ENERGIA DA REAÇÃO
VALORES Complexo ativado (C.A) ou estado de transição
ENERGÍA

ECA

Ea: Energia de
Ea
ativação

E AyB
A+B

E3
C

Curso de reação
Ea: Energia de ativação: Quantidade de energia

necessária para que as substâncias reagentes

experimentem uma colisão suficientemente

energética que lhes permita formar o complexo

ativado e a reação química ocorrer. É calculado

tomando a diferença entre os níveis de energia

DIAGRAMA DE ENERGIA DA REAÇÃO
NORMAL E CATALISADA
V
A
L
O
E1 Reação não catalisada
R
E Reação catalisada
S
E2
E
N
E A+B
R
GÍ
A
E3 C

Curso de Reação
 CATALISADORES

São substâncias que têm em comum

a propriedade de aumentar a
velocidade das reações químicas,
sem que sua estrutura ou
concentração sejam modificadas em
decorrência da reação.
COMO FUNCIONAM OS CATALISADORES

• Eles fixam e concentram as substâncias

reagentes em sua superfície e as
orientam no espaço.
• Eles interagem com as substâncias
reativas, criando tensões dentro deles,
que enfraquecem seus laços, tornando
mais fácil quebrá-los.
• Os catalisadores aumentam a velocidade
das reações químicas diminuindo a
energia de ativação.
 COMO FUNCIONAM AS ENZIMAS

As enzimas diminuem a energia de ativação

(Ea) e, portanto, aumentam a velocidade
das reações devido a:
efeito de aproximação
efeito de imobilidade
efeito de orientação
Revisar Cardellá Tomo I Página 271
 TIPOS DE CATALISADORES
(según donde realicen su actividad)

1. Abióticos. Sua atividade geralmente não está

relacionada aos seres vivos, entre os quais
encontramos: platina (Pt 2+), níquel (Ni2+),
ácido sulfúrico (H2SO4) e hidróxido de sódio
(NaOH) entre outros.
2. Bióticos o biocatalisadores.
ENZIMAS
• Natureza proteica.
• Específico.
• Versátil.
• Alta eficiência catalítica.
• Actividade susceptível de
• regulamentação.
Eficiência catalítica = Velocidade da reação catalisada
Taxa da reação não catalisada
Versatilidade: Tipos de reações em que podem intervir.
As enzimas catalisam um amplo espectro de tipos de
reações: hidrolítica, redox, isomerização, transferência de
grupo, etc.

Rendimento: (Quantidade de produto obtida a partir do

substrato). Você deve pesquisar o conceito

As enzimas cumprem o princípio da máxima eficiência. Em

suas reações não há subprodutos.
 COMPARAÇÃO ENTRE
CATALISADORES
BIÓTICOS ABIÓTICOS
Maior Menor
complexidade complexidade
estrutural estrutural
(metales, sales,
Maior ácidos o bases)
especificidade Menor
especificidade
Maior Menor
eficiencia eficiencia
catalítica (106-1012) catalítica (101-103)
 COMPARAÇÃO ENTRE CATALISADORES

Criterio Bióticos Abióticos

Natureza química Proteica Iones
Complexidade Maior Menor
estrutural
Especificidade Sí No
Eficiencia catalítica Maior Menor
Versatilidade Sí No

Suscetibilidade de Sí No
regulamentação
Desempenho Maior Menor
MECANISMO BÁSICO DE AÇÃO DAS ENZIMAS

S
E
ES
E
P
Estágio 1
(da União Estágio 2
ou (transformação ou
reconhecimento) catalítico)
MECANISMO BÁSICO DE AÇÃO DAS ENZIMAS

Etapa Etapa
1 2
 a enzima e seu substrato

ligação ao centro ativo

obtenção de produtos
Etapa 1

Etapa 2
 CENTRO ATIVO
É uma concavidade ou entalhe na
superfície de proteínas enzimáticas onde
o substrato é ligado por forças não
covalentes de uma maneira específica.

É a parte da enzima que entra em contato

com o substrato.
 CENTRO ATIVO
O centro ativo é uma entidade tridimensional, geralmente se
apresenta como uma cavidade constituída de acordo com as
dobras que a cadeia polipeptídica forma ao estabelecer sua
estrutura terciária.

É um orifício ou fenda que representa uma pequena porção do

volume total da enzima e está localizado na superfície.

Entre o centro ativo de uma enzima e o substrato existe

complementaridade estérica (espacial) e elétrica (química).

Os substratos estão ligados ao sítio ativo da enzima por

interações fracas.
A estrutura do centro ativo da enzima é dinâmica e está em
constante processo de transformação.
(ver página 272 Cardellá Tomo I).
ESTRUTURA DO CENTRO ACTIVO

-CH3 -
-OH
+
 COMPONENTES DO CENTRO ATIVO
1. eixo covalente
Revisar Cardellá
2. grupos de fixação
Tomo I Páginas
3. grupos de configuração 267-269
4. grupos catalíticos
 Componentes relacionados à etapa de
encadernação:

1. Eixo Peptídico: Responsável pela

complementaridade espacial.
2. Grupos de Ambiente: Impedem a entrada de água
no centro ativo e reforçam as interações fracas
entre a enzima e o substrato.
3. Grupos de Fixação ou União: Responsáveis ​pela
complementaridade elétrica.

Componentes relacionados ao estágio de

transformação:

Grupos catalíticos
PROPRIEDADES DO CENTRO ATIVO
(DA ENZIMA)

1. ESPECIFICIDADE 2. ESPECIFICIDADE
DO SUBSTRATO DE AÇÃO

ABSOLUTA RELATIVA
Ej. Glucoquinasa Ej. Hexoquinasas I, II y III

 Como as enzimas possuem especificidade de substrato e ação,

nas reações catalisadas por enzimas o número máximo de
produtos é obtido a partir do substrato, sem o aparecimento de
subprodutos.
 CLASSIFICAÇÃO DE ENZIMAS DE
ACORDO COM SUA COMPOSIÇÃO
QUÍMICA
• Simples: quando são formados apenas
pela proteína enzimática.
• Compostos ou conjugados: quando
estão ligados a outra substância
chamada cofator
• Sistema biocatalítico = Holoenzima =
(Apoenzima + Cofator)
 COFATORES
Moléculas ou íons necessários para a
ação catalítica de muitas enzimas.
de natureza não protéica
baixo peso molecular
estão localizados no centro ativo
 Sem o cofator, a enzima não tem um
centro ativo útil.
 TIPOS DE COFATORES
Inorgánicos Orgánicos

Grupos
Mg2+ Zn2+ Ca2+ Coenzimas Prostéticos
Fe2+ Mn2+ K+

estão frouxamente vinculados Se unen

para a enzima, apenas covalentemente
durante a catálise. a la enzima.
Ej: Biotina (B8),
Ej: NAD+, NADP+,
Ácido fólico, COASH, FMN (B2), FAD (B2)
Fosfato de piridoxal (B6)
 RELAÇÃO ENTRE COFATORES E
VITAMINAS
Alguns cofatores são ou contêm vitaminas do
complexo B, razão pela qual são chamados de
formas coenzimáticas das vitaminas.
Vitaminas: Substâncias de vital importância para o
organismo e que não podem ser sintetizadas nele,
por isso devem ser obtidas através da alimentação.
Quando as vitaminas não estão presentes na dieta
ou sua absorção é deficiente, ocorrem doenças.
Avitaminosis: ausencia total de vitaminas

Hipovitaminosis: carencias vitamínicas,

generalmente por malnutrición , y da lugar a
determinadas enfermedades carenciales

Hipervitaminosis: exceso de vitaminas en la

dieta, y puede originar igualmente trastornos
mucho más graves en las vitaminas
liposolubles que tienden a acumularse, no así
en las hidrosolubles que se eliminan con
facilidad.
 CLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMAS
Oxidorreductasas. (Malato deshidrogenasa)
Transferasas. (Fosfofructoquinasa)
Hidrolasas. (Arginasa)
Liasas. (Fumarasa)
Isomerasas. (Fosfohexosaisomerasa)
Ligasas. (Acetil CoA sintetasa)
Profundizar en el estudio de la clasificación y
nomenclatura de las enzimas en el Cardellá tomo I,
páginas (276-281).
 FATORES QUE MODIFICAM A
ESTRUTURA DO ACTIVE CENTRO

• Modificadores da distribuição elétrica

do centro ativo (alteram as cargas
elétricas de seus grupos ionizáveis),
como o pH do meio.
• Análogos estruturais de substratos não
passíveis de transformação, como os
inibidores.
 FATORES QUE INFLUENCIAM A
CINÉTICA DAS ENZIMAS
• Concentração de enzimas.
• Concentração de substrato.
• Concentração de cofatores.
• Temperatura.
• pH do meio.
• Presença de ativadores.
• Presença de inibidores.
 Velocidade de reação:
Quantidade de substrato que se
transforma em produto em uma
unidade de tempo.
 Taxa inicial de reação (Vo):
É a velocidade da reação quando 10%
do substrato inicial ainda não foi
consumido.
MECANISMO BÁSICO DE ACCIÓN DE LAS ENZIMAS

S
E
ES
E
P
Etapa 1
(de unión Etapa 2
o (de transformación
reconocimiento) o catalítica)
EFEITO DA CONCENTRAÇÃO DE ENZIMAS[E]

Vo

V= k [E]

[E]
CONCENTRAÇÃO DE SUBSTRATO[S]
V máxima
Vo

Vmáx/2

Km [S]
 PARÂMETROS CINÉTICOS
• VELOCIDADE MÁXIMA:
Reflete a capacidade catalítica total da
enzima.
Está relacionado com a etapa de
transformação do mecanismo básico de
ação das enzimas.
• MICHAELIS CONSTANT(Km):
 Representa uma medida da afinidade da
enzima pelo substrato (numa relação
inversamente proporcional).
 Está relacionado com a etapa de ligação do
mecanismo básico de ação das enzimas.
 EFEITO DO pH

Vo

Vmáx

pH ótimo pH
 TEMPERATURA: T
Vo

Vmáx

T ótima T
 EFEITO DOS ATIVADORES E
INIBIDORES
• ATIVADORES:
 Eles estimulam a atividade catalítica
(geralmente são íons).
• INHIBIDORES:São substâncias que
retardam reações catalisadas por enzimas.
 Pode ser:
 Competitivo.
 Não competitivo.
 INIBIÇÃO COMPETITIVA

Sustrato

Enzima
Producto
Inhibidor
•Vm constante.
•Km aumenta (afinidad
disminuye).
INHIBICIÓN COMPETITIVA
Con inhibidor
competitivo
1/Vo

Sin inhibidor

-1/Km -1/Km Ic 1/ [S]

 INHIBICIÓN NO COMPETITIVA
Complejo
Enzima
Sustrato
Inhibidor

Sustrato

Producto

Inhibidor •Vm disminuye.

•Km constante.
INHIBICIÓN NO COMPETITIVA
Con inhibidor no
competitivo

1/Vo

Sin inhibidor

1/Vm Inc
1/Vm

-1/Km 1/ [S]
 Uso de inibidores enzimáticos
Alguns medicamentos usados ​diariamente na prática médica
são inibidores de enzimas, como as sulfas, que são usadas
para tratar infecções bacterianas.
Em geral, as armas químicas costumam ser também
inibidores de enzimas que, ao bloquear certas reações,
podem danificar um órgão ou tecido específico, se a enzima
inibida estiver presente apenas nele, ou o organismo como
um todo, se a enzima inibida estiver amplamente distribuída
por todo o corpo. corpo.
A luta contra a produção, armazenamento e uso de armas
químicas deve constituir uma posição de princípio de todo
cientista, pois faz parte do comportamento ético impedir a
utilização dos avanços científicos em detrimento da
humanidade.
 Comparação entre inibição competitiva e
não competitiva.
Criterio Inhibidor Inhibidor No
Competitivo competitivo
Características estruturais

Sitio de unión

Efecto sobre Velocidad de

reacción
Efecto sobre Vmáx

Efecto sobre Km
Reversibilidad al aumentar
concentración de sustrato
Representación Gráfica
 Conclusões
1. Os catalisadores bióticos são principalmente de
natureza proteica e são chamados de enzimas.
2. As enzimas são caracterizadas e diferenciadas
estruturalmente do resto das proteínas por
apresentarem um centro ativo.
3. As enzimas aumentam a velocidade das
reações químicas, sem alterar sua estrutura ou
concentração como resultado da reação.
4. As enzimas têm especificidade de substrato e
ação, de modo que cumprem o princípio da
máxima eficiência.
5. A velocidade das reações catalisadas por
enzimas pode ser afetada por vários
fatores, como concentração da enzima,
concentração do substrato, pH,
temperatura, presença de ativadores ou
inibidores.
6. As enzimas podem ser Simples (quando
são formadas apenas pela proteína
enzimática) ou Compostas ou conjugadas
(quando estão ligadas a outra substância
denominada cofator).