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PERGUNTAS TEÓRICO-PRÁTICAS
BIOLOGIA CELULAR I / BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR

Nota:
Nas perguntas de escolha múltipla apenas uma alínea está certa. Assinale-a, rodeando com um círculo a letra que lhe
corresponde. O assinalar mais do que uma alínea anula a resposta. Nestas perguntas, respostas erradas implicam
desconto na classificação.
Nas perguntas de verdadeiro e falso cada alínea é cotada de forma independente e respostas erradas implicam
desconto na classificação
As respostas a lápis não serão consideradas.
A duração prevista para a resolução deste ponto é de 1 h

1 a) – Calcule o volume de HCl 37% (p/p) necessário para preparar 250 mL de HCl 0,2 M.
M = 36,4 g/mol
1L = 1,19 kg

b) Do material de laboratório disponível, indique com X o que utilizaria para preparar esta solução?

__ Pipeta 2 mL __ Proveta 200 mL __ Gobelé de 250 mL __ Própipeta

__ Pipeta 5 mL __ Proveta 500 mL __ Matraz 250 mL __ Borracha de sucção
__ Pipeta 10 mL __ Balão de 200 mL __ Micropipeta de 1-20 µL __ Balança

c) Como procederia para preparar esta solução?

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2 – a) Calcule a massa de NaOH que é necessária para preparar 300 mL de uma solução 0,1 M ?
M= 40,0 g/ mol

b) Que volume da solução anterior necessitaria para preparar 50 mL de NaOH 20 mM?

3– Determine o comprimento da célula da epiderme de cebola da Figura 1 sabendo que uma divisão
do micrómetro objectivo corresponde a 0,01 mm e que oito divisões do micrómetro ocular
correspondem a 10 divisões do micrómetro objectivo (para a objectiva de 10x).

Fig. 1. Esquema de uma célula da epiderme

da cebola observada com uma ocular
micrométrica (objectiva de 10x).

4- Nas aulas práticas utilizou o microscópio de fluorescência para observar material biológico não
tratado e material corado com DAPI. Quais as estruturas celulares que aparecem coradas de azul?

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5- No gráfico seguinte representa-se a curva de titulação para o ácido fosfórico (H3PO4) com
hidróxido de sódio (NaOH).
a) Identifique na margem direita do gráfico as fórmulas dos ácidos fracos e respectivas bases
conjugadas que vão surgindo ao longo da titulação

base ________
ácido ________

base ________
ácido ________

base ________
ácido ________

b) Indique os intervalos de pH correspondentes às zonas tamponantes a1, a2 e a3.

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6- O tubo branco numa análise espectrofotométrica :

a) difere dos tubos amostra apenas pela falta do reagente de cor

b) é sempre água destilada num volume igual aos tubos amostra
c) difere dos tubos amostra apenas pela falta da substância a testar
d) difere dos tubos amostra por possuir uma quantidade exacta da solução padrão
e) contem uma amostra de concentração desconhecida
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7- A actividade da enzima desidrogenase alcoólica foi determinada através da formação de NADH,

pela variação da Absorvância a 340 nm. Nas condições experimentais representadas na Tabela 1.

Tabela 1 - Composição do meio de reacção utilizado na determinação da actividade da enzima

desidrogenase alcoólica.

Água destilada Tampão pirofosfato NAD+ 15 mM Desidrogenase alcoólica Etanol 10 M

(mL) 0,2 M pH 8,5 (mL) 0,2mg/mL (mL)
(mL) (mL)

2,2 0,5 0,1 0,1 0,1

Determine a actividade da desidrogenase alcoólica expressa em µmoles de NADH produzidas por

minuto por miligrama de enzima (ε340 = 6200 M-1 cm-1), sabendo que ao fim de 30s a Absorvância
variou de 0,309.

8– Defina a constante de Michaelis-Menten (Km) de uma enzima

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9 - Calcule os valores das constantes de cinética enzimática Km e Vmáx da enzima desidrogenase

alcoólica relativamente ao cofactor NAD+ utilizando os resultados fornecidos (tem ainda que
calcular V0 para a concentração de NAD+ 0,125 mM).
ε340 NADH = 6200 M-1cm-1

0,20
Tabela 2. Influência da
concentração de NAD+ na
actividade da desidrogenase
0,16

Absorvância (λ=340 nm)

alcoólica.

NAD+ V0
(mM) (µmol min-1 mg-1) 0,12

0,125
0,08

0,250 9,1
0,04

0,500 12,7
0,00
0 10 20 30 40 50 60
Tempo
Fig. x . Variação da absorvância ao longo do tempo de uma mistura de reacção
contendo NAD+ 0,125 mM, etanol 330 mM, e 0,02 mg de enzima no volume
final de 3 mL.

Legenda: _____________________________
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9- Na reacção em cadeia da polimerase (PCR) são executados vários ciclos e em cada ciclo a
mistura de reacção passa por temperaturas diferentes , à temperatura de 72º C corresponde a fase de
(assinale com um X a alternativa correcta):
____ Desnaturação _____ Hibridização _____Extensão

10-.As enzimas bacterianas que cortam o DNA em locais específicos da molécula de DNA
designam-se por :
a) endonucleases de restrição
b) exonucleases de restrição
c) Taq polimerases
d) helicases
e) polimerases

11- Na figura estão representados os mapas de restrição de um fragmento de DNA de 18 000 bp

obtidos com as enzimas A e B respectivamente.
2000 10000 6000
Enzima A | | | |

3500 1000 13500

Enzima B | | | |

Faça os dois mapas de restrição possíveis do DNA esquematizado, com as duas enzimas A e B.
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12 - Um fragmento de DNA genómico foi digerido com a enzima de restrição BamHI. Os

fragmentos resultantes foram separados por electroforese em gel de agarose, cujo resultado se
encontra esquematizado na Fig. 4 (pista 2). Sabendo que os fragmentos resultantes da digestão do
DNA do bacteriófago Lambda com HindIII têm os tamanhos em kilobases (kb) 23,1 / 9,4 / 6,7 / 4,4
/ 2,3 e 2,0, calcule o tamanho dos dois fragmentos maiores obtidos na digestão do DNA genómico
em estudo.

_ 1 2
Poço

Fig. Y. Imagem do gel de

electroforese em agarose
obtido para os produtos de
digestão do DNA do
bacteriófago Lambda com
HindIII (pista 1) e para os
produtos de digestão de um
fragmento de DNA
genómico com a enzima de
restrição BamHI.

Legenda: ____________________________________________
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