CICLO CELULAR

CARACTERIZAÇÃO E
CONTROLE MOLECULAR

PROFA. DRA. LÍVIA FERREIRA SILVA VERZOLA

TEORIA CELULAR - 1665

As células realizam divisão celular

CÉLULA EM FASE DE PROLIFERAÇÃO

Divisão

CICLO CELULAR
 COORDENADO

Padrão Cíclico – Crescimento Celular, determinado por um aumento quantitativo

coordenado dos milhares de tipos diferentes de moléculas que a célula tem.
DESENVOLVIMENTO, MANUTENÇÃO DE TECIDOS E
ÓRGÃOS NO ADULTO

Crescimento e Proliferação Morte Celular Programada -

Celular APOPTOSE

EQUILÍBRIO
CICLO CELULAR
 CICLO CELULAR: DUAS ETAPAS COORDENADAS
CRESCIMENTO DIVISÃO

Replicação do DNA

Quiescência

Citocinese – Divisão
Divisão do Núcleo
do Citoplasma
CARACTERIZAÇÃO DA
INTÉRFASE
INTÉRFASE
• A célula aumenta de tamanho –
Intensa atividade metabólica
• Síntese de RNA e Proteínas
ocorrem continuamente.

CROMATINA
FASE G0

Estado modificado de G1.

Célula fica em Intérfase indefinidamente –

Estímulos para retornar ao ciclo celular. Reversível
ou Irreversível (dias, semanas ou anos).
 FASE G1 - INTÉRFASE
• Caracteriza-se pelo reinício da síntese de RNA e
Proteínas, que estavam “bloqueadas” durante a mitose
(período M).
• 80% do RNA sintetizado é rRNA.
• A célula está se preparando para a Replicação do DNA.
(Enzimas: Catalisadoras da síntese de trifosfatos de
desoxirribonucleosídios, Enzimas: DNA-Polimerase, Enzimas
que codificam as proteínas Histonas).
FASE S Início da Síntese (Replicação do
DNA) marca o início da Fase S.

Ponto de NÃO RETORNO do ciclo.

2 mol. de DNA (cromátides-irmãs)

2n = 46 (4n = 92 moléculas de DNA)

Coesinas: mantém as cromátides

irmãs unidas - ligadas
Replicação do DNA
Replicação do DNA
Replicação do DNA
Forquilha de Replicação
Replicação do DNA - Início
 HELICASE: Responsável por
quebrar as pontes de
hidrogênio. Sempre inicia a
quebra em um ponto de
origem. Origem de Replicação
(região rica em A e T)

TOPOISOMERASE:
Responsável por “relaxar” a
fita de DNA para facilitar o
trabalho da Helicase.

Sempre a duplicação é feita no

sentido 5´ 3´
 RNA POLIMERASE:
RESPONSÁVEL POR
ADICIONAR FRAGMENTOS
DE RNA: PRIMER

RNA POLIMERASE

PRIMER
Sequencia de RNA
Duplicação em uma fita molde é
CONTÍNUA

Na outra fita molde é

DESCONTÍNUA
 Gaps: Espaços, os
fragmentos precisam ser
ligados

DNA POLIMERASE: Responsável

por substituir os fragmentos de
Okazaki: Primers por uma
sequencia de DNA

DNA LIGASE DNA POLIMERASE

Molde Branco: Fita original
Processo SEMICONSERVATIVO
Molde Azul: Fita nova
 • Intervalo entre o término da intérfase e o início
FASE G2 da Mitose.

• Célula continua aumentando de tamanho e

duplicando suas organelas celulares, RNA,
proteínas que serão interrompidos somente na
fase M.

• Replicação completa e danos no DNA tenham

sido Reparados.
CARACTERIZAÇÃO DAS FASES
DA MITOSE – FASE M
FASE M Centrossomos

Cinetocoros

• Na PRÓFASE , os cromossomos replicados, cada um consistindo de

duas cromátides-irmãs intimamente associadas se condensam;

• Do lado de fora do núcleo, o fuso mitótico forma-se entre dois

centrossomo, que foram replicados e se separam.

• Cinetocoros: Moléc. Proteicas que se ligam nos centrômeros.

• A PROMETÁFASE começa abruptamente com o rompimento do
envelope nuclear;

• Os cromossomos podem agora ligar-se aos microtúbulos do fuso

por meio de seus cinetocoros e promovem movimentos ativos.
• Na METÁFASE, os cromossomos (centrômeros) estão alinhados na região
equatorial do fuso, a meio caminho entre os fusos-polo;

• Os microtúbulos do cinetocoro pareados em cada cromossomo ligam-se aos

polos opostos do fuso
3 classes de microtúbulos (MT)
do fuso mitótico

• MT Astrais – Membrana Plasmática

• MT Cinetocóricos - Centrômero
• MT Sobrepostos ou Interpolares –
Sobrepostos da região equatorial
• Na ANÁFASE, as cromátides pareadas se separam sincronizadamente para
formar dois cromossomos filhos e cada um é lentamente puxado em direção
ao fuso polar que está em sua frente;

• Os microtúbulos do cinetocoro encurtam e os fusos polares também se

distanciam, ambos contribuindo para a separação dos cromossomos
 SIMULTANEAMENTE

Movimento das Cromátides Afastamento dos Polos

MT cinetocóricos MT Interpolares e Astrais
 ANÁFASE
Despolimerização dos microtúbulos
no Cinetocoro

PROTEÓLISE
ENZIMA
COESINAS
SEPARASE
• Durante a TELÓFASE, os dois conjuntos de cromossomos-filhos chegam aos
polos do fuso;
• Um novo envelope nuclear é reconstituído ao redor de cada grupo de
cromossomos-filhos completando a formação de dois núcleos e marcando o
término da mitose;
Durante a CITOCINESE de uma célula animal, o citoplasma é dividido em
dois por um anel contrátil de actina e miosina, que obriga a célula a formar
duas filhas, cada uma com um núcleo.

Anéis Contráteis: filamentos de actina.

No final da Fase M: temos 2 células-filhas iguais a célula que deu inicio ao Ciclo Celular.

Mitose é um processo contínuo, que dura cerca de 1 hora.

https://www.youtube.com/watch?v=GhD-haQU4Og&feature=youtu.be
CONTROLE DO CICLO CELULAR
 MECANISMOS DE CHECAGEM DO CICLO CELULAR

3- Complexo APC (Complexo Promotor de Anáfase): “START” para fase Anáfase.

1- Complexo S-Cdk: Promove a entrada da célula na Fase S.
2- Complexo M-Cdk: Aciona a “Maquinaria da Mitose”.
CICLINAS E QUINASES/CINASES
Ciclinas: Proteínas que apresentam concentrações cíclicas durante a
progressão do ciclo celular.
Função na regulação dos processos de transcrição e proteólise.
CICLINAS E QUINASES/CINASES

CDKs:
• Dependentes de ciclinas
• Serina e Treonina quinases
• Interagem especificamente com as ciclinas
• Interação resulta na ativação das CDKs
• Concentração não altera ao longo do ciclo celular
• Cada complexo fosforila proteína-alvo específicas
COMPLEXO PROMOTOR DE ANÁFASE - APC
Sepurin
3º Checkpoint: Célula prossegue para a
Próxima Fase - Anáfase

O Ambiente está Favorável ???

Ubiquitina-ligase

Todos os Cromossomos estão

ligados ao fuso ???
COMPLEXO M-CDK E S-CDK
Cinases ou Quinases Dependentes de Ciclina. São
enzimas que vão fosforilar substratos.

Uma Cinase sozinha é Inativa e será ativada se tiver

junto com uma Ciclina.
 COMBINAÇÃO DE CICLINAS E PROTEÍNAS
QUINASES (CDK)
Ciclina D – Cdk 4/6: Estágio na fase G1, atua nas proteínas reguladoras da proliferação celular.
Ciclina E – Cdk 2: Estágio na fase S (Entrada), atua nas proteínas envolvidas na replicação celular
Ciclina A – Cdk 2: Estágio na fase S (Progressão)
Ciclina A – Cdk 1: Estágio na fase G2 (Progressão), atua nas proteínas Ciclina B, Cdk Fosfatase
Ciclina B – Cdk 1: Estágio na fase M, atua nas proteínas do envelope nuclear
 COMPLEXO S-CDK
FINAL DA FASE G1

1º Checkpoint: Célula prossegue para a

Próxima Fase ou entra em quiescencia
Fase G0

Ciclina S + CDK 2 → formam o complexo ativo

conhecido como Fator Promotor da Fase S (FPS).

O Ambiente está Favorável ???

 COMPLEXO: S-CDK
S-CDK ATIVA FOSFORILA VÁRIOS SUBSTRATOS
ATIVA A REPLICAÇÃO DO DNA: TODA “MAQUINARIA” INICIANDO A FASE S

FASE G1 FASE S
 COMPLEXO M-CDK
FINAL DA FASE G2
Freios moleculares:
p53 (supressor tumoral)
p21, p16 (proteína
inibidora de quinase)

2º Checkpoint: Célula M-Cdk

prossegue para a Próxima Ciclina M

Fase – Fase M
O Ambiente está Favorável ???

DNA está completamente Replicado?

CONTROLE DAS PROTEÍNAS (GENES) REGULADORAS
A atividade das
proteínas reguladoras do
ciclo celular depende do
comando determinado
por sinais extracelulares,
incluindo as comunicações
parácrina e sináptica.
TÉCNICAS PARA DETECÇÃO DE GENES, PROTEÍNAS
CONTROLADORAS DO CICLO CELULAR
TÉCNICA SSCP
IMUNOHISTOQUÍMICA
WESTERN-BLOT
CITOGENÉTICA CONVENCIONAL
TRANSLOCAÇÃO 9/22 - LMC
TÉCNICA DE FISH – HIBRIDIZAÇÃO IN SITU
FLUORESCENTE
PCR EM TEMPO REAL – REAL TIME PCR
SEQUENCIAMENTO
LFSVERZOLA@GMAIL.COM