1. Comunidades celulares: tecidos e células 3.

Ciclo Celular
estaminais 3.1- Introdução ao Ciclo Celular
1.1- Introdução ao tecido epitelial 3.2- Fase G1
1.2- Matriz extracelular e tecido 3.3- Fase S: Regulação da Replicação
conjuntivo 3.4-Fase G2 e controlo da entrada em
1.3- Moléculas de adesão celular Mitose
1.4- Renovação dos tecidos 3.5- Mitose e Citocinese

2. Mecanismos de Sinalização 4. Morte Celular

2.1- Visão geral 4.1 Necrose vs. Apoptose
2.2- Moléculas Sinalizadoras 4.2 Mecanismos moleculares
2.3- Receptores Membranares associados à apoptose
2.4- Receptores Intracelulares
2.5- Maquinaria de Sinalização 5. Célula tumoral
 Pontos de verificação (checkpoints)
- Controlam as transições entre as diversas fases do ciclo celular:

 Ponto de restrição em G1
 Verificação da integridade do DNA em G1, S e G2
 Verificação da metafase
 Fase G1

- Tipicamente é a fase mais longa e variável do ciclo celular

- Ocorre um crescimento até atingirem um tamanho adequado

- Se o estado nutricional é baixo, ou se as células receberem sinais

antiproliferativos, ou para diferenciarem-se, ocorre um retardamento na
progressão do ciclo celular, ou podem mesmo suspender o ciclo para
entrarem em G0.

- Quando as células recebem estímulos proliferativos apropriados, as

células transpõem o ponto de restrição e desencadeiam um programa de
expressão génica que conduz as células a uma nova replicação do DNA e
divisão celular.
 G0 e controlo do crescimento

- Muitas das células de organismos multicelulares diferenciam-se de

forma a adquirirem funções especializadas, e podem suspender o ciclo
celular de forma definitiva.

- Elas encontram-se activas em termos de síntese de proteínas, secreção,

e podem ser altamente móveis.

- Em alguns casos, células em G0 podem reentrar no ciclo celular em

resposta a uma variedade de estímulos. Este processo é altamente
regulado, de forma a controlar proliferações excessivas que possam
conduzir ao desenvolvimento do cancro.
 Fase S

- Cromossomas de eucariótas superiores (mamíferos) são de tal forma

grandes que a replicação inicia-se em diversos locais, designados por
origens de replicação.

Fase G2
- Corresponde a um período relativamente curto durante o qual enzimas
específicas irão permitir à célula entrarem em mitose.

- Cromatina e citosqueleto preparam-se para as alterações estruturais que

irão ocorrer durante a mitose.
 Fase M

- Os cromossomas e o citoplasma são distribuídos pelas duas células-

filhas.

- A mitose é normalmente dividida em cinco fases: profase, prometafase,

metafase, anafase and telofase

- A separação das duas células-filhas ocorre por um processo chamado

citocinese.
 Bases bioquímicas nas transições do ciclo celular
- As transições são desencadeadas por uma rede de proteínas cinase e
fosfatase

Cinases Dependentes de Ciclinas (CDKs)

- Os humanos têm mais de 10 CDKs, mas apenas algumas estão
envolvidas no controlo do ciclo celular.

- Para estarem activas, estas enzimas deverão estar associadas a

subunidades reguladoras, chamadas ciclinas.

- Os níveis das CDKs são constantes ao longo do ciclo celular

 Ciclinas
- São um diverso grupo de proteínas com um peso molecular que pode
variar entre 35 kDa e 130 kDa.
- Acumulam-se gradualmente durante a interfase, e são abruptamente
destruídas durante a mitose.
- Pelo menos 16 diferentes ciclinas já foram identificadas em humanos,
embora apenas algumas estejam envolvidas no controlo do ciclo celular.

- Os níveis de uma determinada ciclina, determina a actividade de uma

cdk específica.
 Actividade dos complexos Cdk’s/ciclinas

- Os níveis de ciclinas não são os únicos factores responsáveis pela

regulação da actividade das Cdk’s
Como é regulada a actividade das CDKs?

1) Ligação da ciclina à Cdk (actividade catalítica

parcial)

2) Fosforilação da Cdk pela CAK (Cinase

Activadora da Cdk), induzindo actividade
catalítica máxima

3) Fosforilação da Cdk pela Wee1 e Myt1 (inibição

da actividade catalítica)

4) Desfosforilação da Cdk pela Cdc25 fosfatase

(actividade catalítica máxima)

5) CKIs (p21, p27) e INK4 (ligam-se a Cdks

inibindo a sua activação)
 Como é regulada a actividade das CDKs?

6) Proteólise das CKIs e ciclinas

Activação da
Cdk

O SCF actua como ubiquitina ligase em CKIs, promovendo

a sua degradação nos proteossomas
 Como é regulada a actividade das CDKs?
6) Proteólise das CKIs e ciclinas

Inactivação da Cdk

APC actua como ubiquitina ligase em ciclinas, promovendo

a sua degradação em proteossomas
Actividade das CDKs e APC nas diversas fases do ciclo celular
 Ponto de restrição: um ponto crítico de decisão
- As células proliferam apenas quando o ambiente é favorável e os
cromossomas não se encontram danificados
- Este controlo envolve a monitorização do ambiente externo para a
disponibilidade de nutrientes e por sinais mitogénicos vindos de outras
células para proliferarem.
- O ponto de restrição é definido como o ponto após o qual o ciclo
celular irá prosseguir mesmo que os factores mitogénicos tenham sido
removidos
Regulação da proliferação celular pelo ponto de restrição
Regulação da proliferação celular pelo ponto de restrição

Ras- proteína G monomérica; activa quando

ligada a GTP

MAP cinase- Mitogen-activated protein kinase

Myc- factor de transcrição

Monitorização da integridade do DNA em G1 e G2
Mecanismo da polimerização do DNA
Componentes e eventos da forquilha de replicação
Componentes e eventos da forquilha de replicação
Componentes do complexo pré-replicação

DNA
helicase
- Aumento dos níveis de Cdc6 no inicio de G1

- A Cdc6 liga-se ao ORC (Após a anafase e

durante a fase G1)

- Ligação das proteínas Mcm (actuam como

DNA helicase)

- A Cdk2/ciclina E fosforila o complexo pré-

replicativo permitindo a replicação do DNA

- A Cdk2/ciclina E, Cdk2/ciclina A e
Cdk1/ciclina B impedem a montagem de
novos complexos de pré-replicação até à
anafase (quando diminui a actividade das
Cdks)
Correção de erros de malpareamento
M-Cdk e iniciação da profase
Ponto de verificação em G2

Cdk1 activa
Cdk1 Cdk1
inactiva inactiva
 Profase
- Inicia-se com a condensação dos cromossomas e desmontagem do
nucléolo

- Fosforilação de filamentos intermediários (laminas) pela M-Cdk

- Fragmentação do Golgi e retículo endoplasmático

Profase

M-Cdk
Prometafase
Organização do fuso mitótico
Metafase
 Anafase

- Separação das cromátides irmãs

- As cromátides irmãs movem-se para pólos opostos do fuso (anafase A)
- Os pólos movem-se em direcção à periferia da célula (anafase B)
- O fuso mitótico activa o córtex celular de forma a preparar a célula para a
citocinese
Mecanismo bioquímico envolvido na separação das
cromátides irmãs

APC também marca ciclinas

com ubiquitina

Inactivação das Cdk’s

Telofase
 Citocinese

Em animais, um anel contráctil de filamentos de actina e miosina

separa a células filhas no final da mitose
- Crescimento vs. Divisão celular - Wee1
- Fase G0 - Myt1
- Fase G1 - Cdc25
- Ponto de restrição - CKIs
- Fase S - Proteólise
- Fase G2 - Ubiquitina
- Fase M - Proteossomas
- Pontos de verificação - APC
- CDKs - G1-Cdk (Cdk4,6/ciclina D)
- Ciclinas - G1/S-Cdk (Cdk2/ciclina E)
- CAK - S-Cdk (Cdk2/ciclina A)
- M-Cdk (Cdk1/ciclina B)
- Proteína Rb - ORC
- Factor E2F - Cdc6
- Mitogénios -Fita líder
- Proteína Ras - Fita retardada
- MAP cinases - Fragmentos de Okazaki
- Myc - DNA helicase
- Mdm2 - Proteína de ligação a cadeia simples de DNA
- p53 - Primase
- p21 - DNA polimerase
- Proteína grampo deslizante
- RNase H
- DNA ligase
- Profase - Microtúbulos astrais
- Laminas (filamentos intermediários) - Metafase
- Condensinas - Anafase A
- Prometafase - Anafase B
- Fuso mitótico - Separase
- Microtúbulos polares - Securina
- Microtúbulos do cinetocóro - Coesinas
- Telofase
- Citocinese
- Anel contráctil (actina e miosina)
- Alberts et al.; Fundamentos da Biologia Celular; 3ª Edição, Artmed, 2011.
(Capítulos 6 e 18)