1.

Comunidades celulares:
celulares: tecidos e células 3. Ciclo Celular
estaminais 3.1- Introdução ao Ciclo Celular
1.1- Introdução ao tecido epitelial 3.2- Fase G1
1.2- Matriz extracelular e tecido 3.3- Fase S: Regulação da Replicação
conjuntivo 3.4-Fase G2 e controlo da entrada em
1.3- Moléculas de adesão celular Mitose
1.4- Renovação dos tecidos 3.5- Mitose e Citocinese
3.6- Morte Celular Programada
2. Mecanismos de Sinalização
2.1- Visão geral
2.2- Moléculas Sinalizadoras
2.3- Receptores Membranares
2.4- Receptores Intracelulares
2.5- Maquinaria de Sinalização
 Fosforilação de proteínas

- A fosforilação é uma das modificações mais comum em proteínas

envolvidas em diversas vias de sinalização celular.
- A fosforilação controla a actividade de enzimas metabólicas,
motilidade celular, canais membranares, montagem do núcleo, e
progressão do ciclo celular.

- Por vezes a fosforilação pode activar um determinado processo, mas

também pode inibir noutros processos (tudo depende da proteína-
alvo). Em ambos os casos, é necessário a existência de uma proteína
cinase (para adição de um grupo fosfato) e de uma proteína fosfatase
(remoção de um grupo fosfato) para regular a actividade de uma
determinada proteína.
 Fosforilação de proteínas
- Em Eucariótas, mais de 90% das fosforilações ocorrem em resíduos de
serina e treonina, mas a fosforilação de resíduos de tirosina regula
inúmeras vias de sinalização.
 Fosforilação de proteínas

Quais são os efeitos da fosforilação ne estrutura e função da

proteína?

1. Interferência directa

2. Alterações conformacionais

3. Criação de locais de ligação

Proteínas cinase
- Catalisam a transferência de um fosfato-γ do ATP para a cadeia lateral de
um determinado aminoácido.
- Muitas das proteínas cinase em eucariótas são serina/treonina cinase ou
tirosina cinase.
- Algumas proteínas são cinases de lípidos, em que fosforilam fosfoglicéridos
de inositol (PI).
 Proteínas fosfatase
- Existem diversas famílias de fosfatases que removem um grupo
fosfato da cadeia lateral de um aminoácido
 Proteínas ligantes de guanosina trifosfato
- As células usam proteínas ligantes de GTP (chamadas GTPases ou
proteínas G) para regularem inúmeras funções, incluindo síntese proteica,
transdução de sinal a partir de receptores da membrana plasmática,
regulação do citosqueleto, tráfico membranar, e transporte nuclear.

- Todas as GTPases usam o mesmo ciclo enzimático. A conformação

depende se está ligada a GTP ou GDP.

Proteínas G triméricas
- Possuem 3 subunidades (α, β e γ).

- A subunidade Gα possui um domínio de ligação ao GTP.

- As subunidades Gβ e Gγ ligam-se fortemente uma à outra, mas

reversivelmente à subunidade Gα.
 Proteínas G triméricas

- Os receptores de 7 hélices activam uma proteína G trimérica, induzindo a

dissociação do GDP e ligação do GTP, conduzindo à dissociação de Gα da
Gβγ. Isto vai gerar dois sinais que actuam em proteínas efectoras a jusante.
 Proteínas G triméricas

- Os mamíferos têm cerca de 20 genes para a subunidade Gα, 5 para

Gβ and 12 para Gγ.
- Actuam numa variedade limitada de efectores a jusante, incluindo
canais iónicos e enzimas que produzem segundos mensageiros.
 Segundos mensageiros
- São quimicamente diversos, variam desde lipidos hidrofóbicos
residentes na bicamada lipídica, a iões inorgânicos (Ca2+) e nucleótidos
cíclicos.

- Grande parte dos segundos mensageiros são produzidos por enzimas

que variam rapidamente entre o estado activo e inactivo.

- Grande parte das enzimas responsáveis pela síntese dos segundos

mensageiros são activadas devido à activação de receptores
membranares
 Segundos mensageiros: nucleótidos cíclicos

- Adenil ciclase é uma proteína

transmembranar, que é activada pela
subunidade α da proteína Gs.

- Ca2+/calmodulina ou proteína cinase

C (PKC) activam algumas adenil
ciclases

- A subunidade α da proteínaGi inibe

a adenil ciclase

- Os nucleótidos cíclicos difundem-se pelo citoplasma, activando proteínas

cinase e canais iónicos.
- Os nucleótidos cíclicos são inactivados pelas fosfodiesterases.
 Proteína cinase A (PKA)

- Formada por duas subunidade reguladoras e duas catalíticas.

- As subunidades catalíticas fosforilam substratos citoplasmáticos e

membranares, e também pode mover-se para o núcleo para activar o factor
de transcrição CREB (proteína de ligação a elementos de resposta aos
nucleótidos cíclicos).
 Segundos mensageiros: nucleótidos cíclicos
- O cGMP é sintetizado a partir de GTP pela enzima citosólica guanil
ciclase, que funciona como o receptor do gás óxido nitrico (NO).
- O aumento dos níveis de cGMP num vaso sanguíneo induz um
relaxamento músculo liso, promovendo um aumento do fluxo sanguíneo

Sildenafil (Viagra)
Viagra): Inibe a
fosfodiesterase 5 no corpus
cavernosum
 Segundos mensageiros: derivados de lípidos

- Os principais
segundos mensageiros
são o DAG, IP3 e PIP3.

- A fosfolipase C (PLC)
cliva o PIP2 para formar
o DAG e IP3

- A fosfolipase C pode ser activada tanto pela proteína Gq como por receptores
tirosina-cinase.
- O DAG permanece na bicamada lipídica, activando a proteína cinase C (PKC).
Esta enzima regula a actividade de diversas proteínas envolvidas na regulação
da expressão génica, motilidade, metabolismo, etc.
- O IP3 difunde-se pelo o citoplasma activando um canal de Ca2+ localizado
no retículo endoplasmático.
 Vias de sinalização dos fosfoinositídios

- O PIP3 (2º mensageiro) conduz à activação da enzima PKB/Akt na

membrana celular.
- A PKB/Akt promove o crescimento celular (estimula a síntese proteica) e
sobrevivência (inibe a apoptose).
 Vias de sinalização dos eicosanóides
- São importantes segundos mensageiros, que “escapam” das células
(mensageiros intercelulares) e medeiam os seus efeitos através da ligação a
receptores de 7-hélices localizados na superfície celular das células
vizinhas.

- São uma diversa família de metabolitos derivados do ácido araquidónico,

incluindo prostaglandinas, tromboxanos, leucotrienos, e prostaciclinas
Alvos dos mensageiros lipídicos (resumo)

PIP2

PIP3
 Via de sinalização desencadeada pela proteína Ras

- Receptores associados a enzimas podem activar a proteína Ras

- Proteína Ras - Proteína G monomérica localizada no folheto interno na
membrana plasmática
 Via de sinalização desencadeada pela proteína Ras

Via das MAP cinases

- Esta via de sinalização está envolvida na proliferação celular, diferenciação
e sobrevivência
 Segundos mensageiros: Cálcio

- Regula muitos processos celulares, incluindo transmissão sináptica,

fertilização, secreção, contracção muscular e citocinese.
- Os níveis de cálcio no citoplasma são muitos baixos (~0.1 •M)
- Os níveis de cálcio são controlados pela sua libertação e remoção do
citoplasma
 Segundos mensageiros: Cálcio
Que estímulos aumentam os níveis de Ca2+ no citoplasma?

- A sua difusão pelo citoplasma é muito baixa, podendo ser sequestrado por
diversas proteínas ligantes de Ca2+, particularmente a calmodulina.
- O complexo Ca2+/calmodulina regula a actividade de diversas proteínas,
incluindo PKC, sintase do NO (NOS), adenil ciclase, canais iónicos (K+), factores
de transcrição (CREB).
- Proteínas cinase - cGMP
- Proteínas fosfatase - Fosfodiesterases
- Resíduos de serina, treonina e - PKA
tirosina - Fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PIP2)
- Proteínas G monoméricas - PI-3-cinase
- Proteínas G triméricas - PIP3
- Subunidades α, β e γ - DAG (Diacil-glicerol)
- Proteína Gs - IP3 (Inositol trifosfato)
- Proteína Gi -Fosfolipase C
- Proteína Gq - Receptores associados a enzimas
- Adenil ciclase - Proteínas STAT
-Nucleótidos cíclicos -PKC
- cAMP - Receptor da família do TNF
- TNF
-PKB/Akt
- Ácido araquidónico
-Eicosanóides
- Receptores de 7 hélices
- Mensageiros intercelulares
- Cálcio
- Calmodulina
- Óxido nitrico (NO)
- Sintase do NO (NOS)
- Guanil ciclase
- Proteína Ras
- Via das MAP cinases
- Alberts et al.; Fundamentos da Biologia Celular; 3ª Edição, Artmed, 2011.
(Capítulo 16)