1. Comunidades celulares: tecidos e células 3.

Ciclo Celular
estaminais 3.1- Introdução ao Ciclo Celular
1.1- Introdução ao tecido epitelial 3.2- Fase G1
1.2- Matriz extracelular e tecido 3.3- Fase S: Regulação da Replicação
conjuntivo 3.4-Fase G2 e controlo da entrada em
1.3- Moléculas de adesão celular Mitose
1.4- Renovação dos tecidos 3.5- Mitose e Citocinese

2. Mecanismos de Sinalização 4. Morte Celular

2.1- Visão geral
2.2- Moléculas Sinalizadoras 5. Cancro e Célula tumoral
2.3- Receptores Membranares
2.4- Receptores Intracelulares
2.5- Maquinaria de Sinalização
Apoptose Necrose
 Classes de células que sofrem morte celular programada

- Células infectadas com vírus

- Morte celular quimioterapêutica

- Células desnecessárias a partir de um determinado

momento

- Excesso de células
Classes de células que sofrem morte celular programada
 Sinais e vias da apoptose

Via intrínseca: inclui danos no DNA, activação excessiva de factores

que promovem a progressão do ciclo celular, ausência de nutrientes.
Todos estes sinais convergem na mitocôndria, a qual liberta factores
chave que conduzem à apoptose.

Via extrínseca: sinais enviados por outras células. Contacto directo

com células-alvo conduz à activação de receptores específicos que
conduzem a célula à apoptose.
Proteínas reguladoras e efectoras da apoptose

- Caspases

- Inibidores de caspases (IAPs)

- Proteínas da família BCl-2

- Citocromo C

- Receptores de morte

- p53
 Caspases
- São proteases especializadas com resíduos de cisteína no centro
activo que clivam em resíduos de ácido aspártico.
- São expressas como precursores inactivos (procaspases).
- A sua activação requer clivagem proteolitica em resíduos de ácido
aspártico.
-Actuam em diversos alvos, que promovem directamente a apoptose:
I. Outras caspases
II. Citosqueleto e membrana nuclear (actina, laminas, etc)
III. Activação de nucleases que degradam o DNA cromossomal
IV. Clivagem e inactivação de proteínas que normalmente
funcionam na detecção e reparação de danos no DNA
 Caspases
-Podem ser divididas em duas classes:
I. Caspases iniciadoras (auto-activadas)
II. Caspases efectoras (activadas por caspases iniciadoras)
 Proteínas inibidoras da apoptose (IAPs)

As IAPs inibem as caspases de duas formas:

I. Ligação à caspase, bloqueando o seu acesso ao substrato.
II. Diversas IAPs são ligases de ubiquitina, marcando as caspases para
serem destruídas nos proteossomas

Se as IAPs inactivam proteínas, então como ocorre o inicio da apoptose?

As células também expressam bloqueadores de IAPs (Smac e DIABLO).
Estas proteínas encontram-se normalmente na mitocôndria, e são
libertadas quando se inicia a via intrínseca da apoptose.
 Proteínas da família Bcl-2
- A mitocôndria é o organelo chave para a morte celular, que é
desencadeada por uma variedade de insultos tóxicos.

- Estes eventos mitocondriais são regulados pelas proteínas da família Bcl-2.

- A família Bcl-2 pode ser dividida em dois grupos:

I. Proteínas pró-apoptóticas (Bax, Bak, Bid,…).
II. Proteínas anti-apoptóticas (Bcl-2, Bcl-XL)

Os níveis de proteínas pró- e anti-apoptóticas determinam se o

citocromo c é ou não libertado para o citosol
 Citocromo C
- É uma pequena proteína associada à membrana interna da
mitocôndria. Transfere electrões entre os complexos III e IV.

- É libertada pela mitocôndria em resposta a estímulos pró-apoptóticos.

- Liga-se ao APAF-1 (factor activador de proteases apoptóticas). Este

complexo interage com a pró-caspase 9 (iniciadora), permitindo a sua
auto-activação.

- Este complexo (citocromo c + Apaf-1 + ATP + pró-caspase 9) é

chamado de apoptossoma.
 Receptores de morte

- As células expressam pelo menos seis diferentes moléculas à superfície

celular, colectivamente chamados de receptores de morte.

- Um dos mais bem caracterizados é o receptor Fas, um receptor da família

do TNF.

- O domínio citoplasmático do receptor Fas contém um domínio de morte, o

qual é partilhado por todos os receptores de morte.
 Receptores de morte

- O ligando Fas é uma proteína membranar trimérica, que é encontrada à

superfície das células.

- O receptor Fas activo liga-se a uma proteína adaptadora chamada FADD

(proteína com domínio de morte associada ao Fas).

- O complexo Fas-FADD liga-se à pró-caspase 8 (iniciadora) formando o

complexo DISC (complexo de sinalização indutor de morte), conduzindo à
auto-activação da caspase 8.
 Via extrínseca e intrínseca da apoptose

Death Receptor Pathway Mitochondrial Pathway

FasL
Fas/Apo1 oxidants ceramide others
/CD95 DNA
damage

D
D
D
D
D Bcl-2
FADD

DISC
Procaspase 8 dATP
Apaf -1
BID Procaspase 9
Cytochrome
Caspase 8 c
Procaspase 3
dATP
Apaf -1
Caspase 9
Cellular targets Caspase 3 Apoptossoma
Papel do p53 na apoptose

BCL-2
p53-
transcriptional
BCL-xL targets

BAX
Direct
binding of
p53 NOXA BCL-2
p53
PUMA
Transcriptional
repression
APAF-1

IAP
Survivin
Global Cancer Statistics 2020
 Verywell, 2017

Corresponde a um vasto conjunto de doenças caracterizadas por um

crescimento anormal e descontrolado das células e que, na maioria das
vezes, formam uma massa chamada tumor.
- Células bem diferenciadas
- Crescimento “lento” - Perda da
- Geralmente encapsulado diferenciação
- Crescem para a
periferia e secretam
fatores que prmovem a
infiltração

Não invadem
tecido adjacente

Invadem o tecido
adjacente e espalham-se
pelo corpo.
Mutações cromossomais
Mutações pontuais: troca de uma base numa sequência de DNA

Silenciosa Nonsense Missense

Mutações frameshift: inserção/deleção de uma base numa
sequência de DNA
Genes supressores de tumor: tornam-se inativos (perda de função)
quando ambos os alelos estão mutados (herança recessiva)

Oncogenes: tornam-se mais ativos (ganho de função) quando

determinadas mutações ocorrem num dos alelos (herança dominante).
 Ponto de restrição e o cancro
- Quase todos os tipos de cancro são causados pela desregulação da
proliferação celular durante a fase G1.

- In vitro, as células “normais” proliferam até cobrirem completamente a

superfície, formando uma monocamada. Esta inibição do crescimento é
chamada de inibição por contacto (mediado por caderinas).

- As células cancerosas perdem este controlo, podendo continuar a proliferar

indefinidamente, desde que haja nutrientes e mitogénios no meio de cultura.
Quando as células perdem o controlo da proliferação são designadas por
transformadas.
Ponto de restrição e o cancro

- As células cancerosas têm

anormalidades na actividade de duas
classes de genes:
• Proto-oncogenes (exemplo: Ras,
Myc, PI3K, Mdm2, recetores tirosina-
cinase, etc)
• Supressores de tumores (exemplo:
Rb, p53, p21, etc).
A apoptose e o cancro

Bax, Bad, Bid

As células resistentes à morte celular

Manutenção e propagação de células

com mutações
- Apoptose - Bcl-2
- Necrose - Bcl-XL
- Caspases iniciadoras - Citocromo C

- Caspases efectoras - APAF-1

- IAPs - Apoptossoma
- Smac e DIABLO (bloqueadores de IAPs) - Receptores da família do TNF
- Família Bcl-2 - Receptor Fas
- Bax - Ligando Fas
- Bad - FADD

- Bak - p53
- Bid - Células transformadas
- Proto-oncogenes / Oncogenes
- Genes supressores de tumor
- Alberts et al.; Fundamentos da Biologia Celular; 3ª Edição, Artmed, 2011.
(Capítulo 18)