ÚU

RELATÓRIO DE PRÁTICA
Nome, matrícula
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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: Bioquímica Humana

DADOS DO(A) ALUNO(A):

NOME: MATRÍCULA:
CURSO: POLO:
PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A):

ORIENTAÇÕES GERAIS:
● O relatório deve ser elaborado individualmente e deve ser escrito de forma clara e
concisa;
● O relatório deve conter apenas 01 (uma) lauda por tema;

● Fonte: Arial ou Times New Roman (Normal e Justificado);

● Tamanho: 12;
Margens: Superior 3 cm; Inferior: 2 cm; Esquerda: 3 cm; Direita: 2 cm;
● Espaçamento entre linhas: simples;

● Título: Arial ou Times New Roman (Negrito e Centralizado).

Atenção: desenvolva as respostas de maneira resumida, mas garanta que todo o

conteúdo necessário foi abordado. Para essa atividade é obrigatório a indicação de
referência bibliográfica.

RELATÓRIO:

ATIVIDADE CATALITICA DA AMILASE SALIVAR

1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

Na aula foi realizado a técnica de hidrolise química e enzimática para degradação doamido,
utilizando amilase salivar. Amilase é uma enzima produzida nas glândulas
salivaresparótidas, que servem para degradação do amido. Amilase salivar, em
condiçõesespecíficas de pH 6.8 e temperatura 37°C, catalisa a hidrólise das ligações da
cadeiaglicosídica do polissacarídeo amido. Ahidrólise do amido é considerada parcial,
enquantoos produtos resultantes formam uma mistura de moléculas de glicose, maltose e
dextrinalimite. A enzima alfa- amilase salivar que atua catalisando a hidrólise de algumas
ligaçõesdo amido na boca, resultando em moléculas menores, comumente conhecidas por
oligossacarídeos. A hidrólise do amido na presença de ácido origina a glicose. E os
materiais utilizados foram , 3 tubos para cada técnica, proveta, pipetavolumétrica, becker,
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pera de borracha, estufa e banho de gelo. Hidrolise química - Solução de ácido clorídrico,
Amido a 1%, Solução de Lugol

2. Responda as Perguntas:

a) Qual a composição bioquímica do amido?O amido é considerado um polímero natural,

pois ele é um polissacarídeo, ou seja, é um carboidrato formado pela união sucessiva
de várias moléculas de α-glicose. Ele é formado por dois polissacarídeos, amilose e
amilopectina, que são constituídos de moléculas de α-glicose, mas são ligeiramente
diferentes. Amilose, numa porção de 20-15% e amilopectinanuma proporção de 75-
80%.

b) Qual o objetivo do uso de HCl, aquecimento e resfriamento no procedimento da

hidrólise química do amido? A hidrólise ácida ocorre na presença de um ácido mineral
em solução aquosa, podendoser diluída ou concentrada. Os principais ácidos utilizados
são o ácido sulfúrico(H2SO4) e o ácido clorídrico (HCl), porém podem ser utilizados
também em algunscasos o ácido nítrico (HNO3) e fosfórico (H3PO4).Tubo 1, teve uma
reação esverdeada após o lugol, altera esta coloração por contada atuação da enzima
PTIALINA, e com o tempo foi clareando, indicando que estava ocorrendo a degradação
do amido, a temperatura no banho frio não influenciou nadegradação.Tudo 2 e 3 não
houve hidrolise, os compostos de ambos tubos ficaram com cor azulpredominante, que
indica a presença do amido, e que não houve a degradação do amido. A temperatura
influenciou na degradação

c) Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da

amilose.A principal função do ácido clorídrico (HCI), seja qual for a ocasião,
naturalmenteserá a de reduzir o pH da solução, isto é, torná-la ácida. A reação com o
uso deácido clorídrico favorece a hidrólise do amido.Durante o aquecimento em meio
aquoso, os grânulos de amido sofrem mudançasem sua estrutura, envolvendo a ruptura
das pontes de hidrogênio estabilizadorasda estrutura cristalina interna do grânulo,
quando uma temperatura característicapara cada tipo de amido é atingida.
d) Ao ingerirmos um alimento, ele precisa ser reduzido em partículas menores. A digestão
começa na boca, utilizando-se o AMIDO como veículo para essa quebra.Do processo
de catálise das ligações glicosídicas da amilose, resultarão amaltose, a amilopectina e a
glicose;Do processo de catálise das ligações da amilopectina, resultarão a dextrina.
e) Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico.
Após adicionar as 5 gotas de lugol observa-se que teve modificação,coloração
esverdeado. Não houve hidrólise nesse tubo. Após o banho de geloainda há
presença de amido. Não houve hidrólise em ambos os tubosenzimático e
químico. O processo químico vai clareando com o tempo. Após adicionar as 5 gotas
de lugol observa-se que ficou uma coloraçãoazul escura. Percebemos o lugol
interagindo com o amido.AE3: Após adicionar as 5 gotas de lugol observa-se que
ficou uma coloração azul escura. Percebemos o lugol interagindo com o amido.
REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E
CETOSES)
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1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.
Aldoses e cetoses são grupos que são identificados dentro dos carboidratos.Aldoses são
grupos de carboidratos simples. Cetoses são monossacarídeosque contem grupo cetona.
Essa reação é chamada de Seliwanoff, que utiliza oreativo Seliwanoff. Essa reação
acontece, pois as cetoses reagem com ácidosfortes. E ao reagir com esses ácidos fortes
produz um composto chamadofurfural, que reage com o resorcinol, que é um composto
derivado da ureia queestá presente no reativo de Seliwanoff, a coloração do reativo ficará
vermelho,indicando que é uma cetose. Materiais utilizados. Reagentes: Solução de HCL,
0,1 glicose 1%; frutose 1%, reativo de Seliwanoff.
Equipamentos: 1 tubo para frutose; 1 tubo para glicose; 1 tubo para água(serve de
controle negativo); Banho( 70 graus) ; Becker; Pera de borracha;PipetaTubo glicose:
Adicionar 1ml de glicose; 1,5 ml de ácido clorídrico HCL,homogeneizar.
Adicionar 0,5 ml do reativo de Seliwanoff, homogeneizar e levarao banho maria até
visualizar o resultado. Observar a coloração, após 2minutos em banho maria
o tubo da glicose permaneceu inalterado.Confirmando que ela não é uma cetose.
Não tem produção do furfural e nemreação com o resorcinol.Tubo frutose: Adicionar 1
ml de frutose; 1,5 ml de ácido clorídrico HCL;homogeneizar. Adicionar 0,5 ml do
reativo de Seliwanoff, homogeneizar e levarpara o banho maria até visualizar o resultado.
Observar a coloração, após 2minutos em banho maria o tubo da frutose ficou vermelho.
Houve alteração nacor. Indica reação do resorcinol com o furfural. Indica que ela é uma
cetose.Tubo água: Adicionar 1 ml de água; Adicionar 1,5 ml de ácido clorídrico
HCL;homogeneizar. Adicionar 0,5 ml do reativo de Seliwanoff, homogeneizar e levarpara o
banho maria até visualizar o resultado. Observar a coloração, após 2minutos em banho
maria o tubo da água permaneceu inalterado. Confirmando que não é uma cetose. Não
tem produção do furfural e nem reação com o resorcinol.
2. Responda as Perguntas:

a) Qual o princípio da técnica de Seliwanoff?O teste de Seliwanoff é um teste químico que

permite distinguir aldoses decetoses, no qual esse teste baseia-se no princípio de que,
quando aquecidas,as cetoses sofrem desidratação muito mais rapidamente que as
aldoses.
b) Qual o objetivo de utiliza um tubo apenas com água destilada. Serve para controle
negativo.
c) Porque é necessário aplicar fervura e ácido clorídrico (HCl) durante o teste de
Seliwanoff?Para que o processo de desidratação dos carboidratos ocorra é preciso
quehaja energia no meio, e essa energia vem da fervura. Ao desidratar
oscarboidratos, o HCL forma furfurais e assume a coloração vermelha. O HCL éum
ácido produzido no estômago dos animais, a sua função é a de clivarenzimas inativas
para a digestão das proteínas no estômago e também agir nadigestão das proteínas.

d) Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico quanto a presença de

aldose e cetoses. Tubo da glicose- não teve nenhuma alteração -tubo da frutose-
houve mudança para a cor vermelha.- tubo da água- não houve nenhuma alteração.

PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS

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1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.
Este procedimento é realizado para verificar a influência de sais de metais pesados e
deácidos fortes sobre a solubilidade da proteína, bem como a influência do pH sobre
acarga líquida da molécula polipeptídica. 2. Materiais utilizados:Ácido tricloroacético a 20%
Acetato de chumbo 10% Ovoalbumina 10%2 tubos de ensaio Pipeta Pera de borracha
2. Responda as Perguntas:

a) Por que a ovoalbunina precipita na presença de ácidos fortes e metais pesados?Tubo

de ácido forte: a precipitação foi imediata, foi teve formação de um líquido
leitoso,indicando a precipitação e a formação de alguns aglomerados de proteínas.
Tubo de metal pesado: houve precipitação menos intensa do que no ácido forte.
b) Explique por que a ovoalbumina torna-se insolúvel após a precipitação.Os cátions de
metais pesados como Hg2+, Pb2+, Cu 2+, dentre outros, formamprecipitados
insolúveis de proteínas. Essa precipitação é mais intensa quando o pH estáacima do
ponto isoelétrico (pI). Isso porque, acima do pI, a carga líquida da proteína énegativa,
favorecendo a interação com os cátions provenientes do sal.A precipitação abaixo do
ponto isoelétrico através da adição de ácidos fortes.Comparando com o
mecanismo anterior: quando a proteína está abaixo do seu pI, acarga líquida total da
molécula é positiva. Isso facilita a interação da molécula com osânions provenientes de
ácidos como o tunguístico, o fosfotunguístico e pírico.Nas duas situações o precipitado
pode ser ressolubilizado através de alterações do PH.
c) Explique os resultados encontrados no experimento.
conseguimos ter mais visibilidade e perceber que no tubo do ácido teve uma
precipitaçãomais intensa, pois o ácido forte tem a capacidade de quebrar as ligações
peptídicas daproteína mais do que o chumbo. Temos um material mais leitoso no
ácido do que no metalpesado. De toda forma também temos essa percepção em
relação a solução inicial e assoluções precipitadas. Com essa prática é possível
perceber que além modificação doponto elétrico, do meio de cargas iônicas, de tudo
isso que a gente tem nas proteínas umponto que é importante para a precipitação
são alguns tipos de elementos químicos queconseguem clivar, quebrar as
estruturas da proteína fazendo esse processo deprecipitação que a gente
também pode fazer com o ácido e com o metal pesado.
PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS CONCENTRADAS

1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados. Tubo A Solução de ovoalbumina e concentração salina 2 ml de
solução de ovoalbumina 2ml concentração de salina observar, pois, a reação é imediata.
Assim que adicionadapercebemos a formação de um composto leitoso, esbranquiçado
que indica precipitaçãodas proteínas. Tubo B Solução de ovoalbumina e concentração de
sulfato de amônio e água 2 ml desolução de ovoalbumina adicionar água (não fala
quantidade) adicionar sulfato de amônio(não fala quantidade) observar, pois, a reação é
imediata Não conseguimos perceber aformação desse precipitado. A água diminui,
interfere na questão iônica das cargas. Essaprática demonstra a importância do ponto
isoelétrico das proteínas bem como o ambientese é um meio dependendo da carga iônica
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a qual a proteína é submetida ela pode sim serseparada através de uma concentração
salina que irá proporcionar essa separação dasproteínas que pode ser através de uma
coluna de resina, dependendo da coluna de ondefor utilizada. É de importante utilização
clínica e biológica para demais funções de ondequeira isolar determinada proteína em um
pul de determinadas proteínas.Materiais utilizados. Reagentes: Ovoalbumina 10% Sulfato
de amônio concentrado (solução concentrada de sais, salina, que vai proporcionara
precipitação das proteínas) Água (para padrão negativo)
Equipamentos:
Pera de borracha
Pipeta becker.

2. Responda as Perguntas:

a) Explique os conceitos de “Salting out”, “Salting in” e camada de solvatação? Quando

adicionamos sais neutros a uma solução, ocorre um aumento da força iônica (aumento
da concentração de íons) do sistema. Assim, quando adicionamos pequenas
quantidades de sal a uma solução contendo proteínas, as cargas provenientes da
dissociação do sal passam a interagir com as moléculas proteicas, diminuindo a
interação entre elas. Consequentemente, temos um aumento da solubilidade da
proteína no meio aquoso. A esse fenômeno dá -se o nome de “Salting-in”. ‘Em
condições de elevada força iônica, decorrente da adição de grandes quantidades de
sal, temos o efeito contrário. A água, que apresenta um grande poder de solvatação,
passa a interagir com as duas espécies: as proteínas e os íons provenientes da
dissociação do sal. Porém, a água apresenta maior tendência de solvatação de
partículas menores (nesse caso, os íons). As moléculas de água, ocupadas em sua
interação com os íons, deixam a estrutura proteica. Como consequência, temos maior
interação proteínaproteína, diminuição da solubilidade em meio aquoso e,
consequentemente, precipitação da proteína. A esse fenômeno de insolubilização da
proteína em decorrência de um considerável aumento da força iônica do meio dá -se o
nome de “Salting-o ut”. Este é um processo importante para separação de proteínas
uma vez que a concentração de sal necessária para precipitação é diferente para cada
proteína.
b) Qual o princípio bioquímico do experimento?A proteína é uma biomolécula muito
importante. As proteínas são classificadas deacordo com o seu ponto isoelétrico e
dependendo do ambiente onde ela está colocadaela interage de forma iônica com
alguns compostos e podemos mudar essaconcentração iônica de acordo com o
adicionamento de sais. Esse adicionamento desais a gente consegue fazer com que
mude a concentração desse ambiente onde estáa proteína e consiga dissociar as
proteínas de forma a precipitá-las. Esse é o intuito daprática. Que consigamos em uma
concentração onde temos vários tipos de proteínas fazer uma separação. Ela é muito
utilizada em colunas de sílica, de resinas para separação de proteínas.
c) Explique os resultados encontrados durante o experimento.Essa prática demonstra a
importância do ponto isoelétrico das proteínas bem como oambiente se é um meio
dependendo da carga iônica a qual a proteína é submetida elapode sim ser separada
através de uma concentração salina que irá proporcionar essaseparação das proteínas
que pode ser através de uma coluna de resina, dependendo dacoluna de onde for
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utilizada. É de importante utilização clínica e biológica para demaisfunções de onde

queira isolar determinada proteína em um pul de determinadas proteínas.A precipitação
de proteínas pela alta concentração de sais é um processo muito importantepara a
separação de misturas complexas de proteínas, uma vez que a concentração de
salnecessária para precipitação é diferente para cada proteína.

REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES)

1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.
Tubo A 1 ml de água destilada Adicionar solução de Biureto (não fala quantidade) Observar
a reação não houve mudança de cor. Tubo B Adicionar solução de Biureto (não fala
quantidade) Adicionar solução de ovoalbumina (não fala quantidade) Observar a reação. A
mudança colorimétrica vai acontecendo. Aos poucos conseguimos perceber a mudança de
cor. Fica uma cor violácea, violeta. Em torno de 1 ou 2 minutos a cor começa a se
intensificar. Indica a presença da proteína. Indicativo desses grupamentos de carbanimicos
que interagem com o Biureto.Materiais utilizados. Reagentes Reativo de Biureto;
Solução de ovoalbumina; Águadestilada (controle negativo); equipamentos pipeta de
1ml; Pera de borracha; Becker.
2. Responda as Perguntas:

a) Explique o princípio da técnica bioquímica do experimento.A reação do Biureto é o

resultado da formação de um complexo entre Cu2+ e asproteínas ou peptídeos com
mais de dois aminoácidos. As ligações peptídicas sãoligações amida, e o par de
elétrons dos átomos de nitrogênio das amidas encontram-sedisponíveis, podendo servir
de ligante para o átomo de cobre ll
b) Qual o conceito de “açúcares redutores”?Um açúcar redutor é qualquer açúcar que, em
solução básica, apresenta umgrupo carbonílico livre aldeído (derivado de uma aldose).
Sua capacidade deredução se dá pela presença de um grupo aldeído ou
cetona livre. Todomonossacarídeo, alguns dissacarídeos e oligossacarídeos.
As cetonasprecisam entrar em equilíbrio dinâmico e se tornarem aldeídos
antes depoderem atuar como açúcares redutores
c) Explique os resultados encontrados no experimento.Tubo de glicose: Com a solução em
banho maria a 70 graus, após 5 minutoshouve uma modificação, porém não é uma
reação de coloração vermelho tijolo,mas a modificação de cor esverdeada indica que
houve uma redução dos íons,uma reação do cobre. E nesse caso não ha formação do
ácido cuproso, já foireduzido ao máximo o cobre. É perceptível a diferença entre a
sacarose e a glicose, isso significa que a aldose é um agente redutor (monossacarídeo)
e aa sacarose não é redutora.Tubo da sacarose: Com a solução em banho maria a 70
graus, após 5 minutosnão houve uma reação entre os íons. Significa que a sacarose
não é umcarboidrato redutor, ou seja, ele não tem a hidroxila, a carbonila que faz
areação com os íons cúpricos.Tubo da água: Com a solução em banho maria a 70
graus, após 5 minutos nãohouve uma reação. A cor que está no tubo é do reativo de
Benedict (azul). Não houve mudança de cor.
d) Explique como o experimento pode ser aplicado nas atividades na área clínica.A
presença de glicose na urina pode ser um sinal de diabetes. Testar umaamostra de
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urina com o reagente de Benedict é uma maneira simples deverificar a presença de

glicose em pessoas suspeitas de terem esta doença.
e) No entanto, não é um teste definitivo, pois outros açúcares
redutoresproduzirão a mesma reação. Se a urina for positiva, outros testes terão que
serrealizados para confirmar a condição. As mulheres grávidas podem
sertestadas desta forma a intervalos regulares para detectar diabetes gestacional,que
pode aparecer durante a gravidez em mulheres sem histórico prévio da doença.

REAÇÃO DE BIURETO

1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.As proteínas são biomoléculas importantíssimas na configuração
do nossocorpo, fazendo parte da atividade de diversas funções.As proteínas
participam da nossa formação da membrana plasmática, de funções enzimáticas.
Para a identificação dessas proteínas temos uma reação chamada de reação do
Biureto. Ele é um composto derivado da ureia, que reage com grupos carbonilas
apresentando uma coloração violácea ou violeta.Em torno de 1 ou 2 minutos a cor começa
a se intensificar. Indica a presença da proteína. Indicativo desses grupamentos de
carbanimicos que interagem com o Biureto.

2. Responda as Perguntas:

a) Explique o princípio bioquímico da Reação de Biureto. A reação de decomposição é

considerada inorgânica, que o composto se separa e forma-se duas substâncias
diferentes.
b) Qual o tipo de ligação que ocorre entre o Biureto e as moléculas identificadas?A reação
de biureto serve para identificar a presença de ligações peptídicas dandopositivo para
proteínas e peptídeos, com três ou mais resíduos de aminoácidos. As moléculas
encontradas nessa reação são de NaoH, e CuSo4;C).
c) Explique os resultados encontrados no experimento. A reação de Biureto foi positiva,
com três ou mais aminoácidos, a reação é tambémpositivas para soluções que
contenham duas carbonilas. CoN(h2) ligadas diretamente ouatravés de um único átomo
de carbono ou Hidrogênio

REAÇÃO DO LUGOL (IDENTIFICAÇÃO DE POLISSACARÍDEOS)

1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados. Os polissacarídeos são sacarídeos que são compostas
macromoléculas,temos na classificação dos carboidratos que são chamados de
açúcares, osmanômetros, os monossacarídeos, dissacarídeos e o
polissacarídeos, dentre ospolissacarídeos mais comuns que encontramos na natureza e
principalmente de âmbitovegetal, temos o amido. O amido faz parte da nossa alimentação
onde encontramos eleem diversos alimentos. Materiais utilizados 2 Pipeta de vidro de 1ml,
2 tubos de ensaio solução lugol 2% solução de amido 1%,pera de borracha Pipeta Pasteur
água destilada.
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2. Responda as Perguntas:

a) Explique o princípio bioquímico da utilização do lugol na identificação de

polissacarídeos.O amido, é um polissacarídeo produzido em grande quantidade nos
vegetais, eé constituído por dois outros polissacarídeos estruturalmente
diferentes:amilose e amilopectina. A molécula da amilose não apresenta ramificações
e,no espaço, assume conformação helicoidal (forma de hélice). A
amilopectinaapresenta estrutura ramificada, sendo que os "ramos" aparecem a cada 24-
30moléculas de glicose. A ligação entre os átomos de carbono das unidades deglicose
nas duas estruturas são do tipo alfa 1-4. Moléculas de alto peso molecular
(como a amilose e a amilopectina)podem sofrer reações de complexação, com
formação de compostos coloridos.Um exemplo importante é a complexação da amilose
e da amilopectina com oiodo, resultando em complexo azul e vermelho-violáceo,
respectivamente. Ocomplexo de coloração azul intensa é resultado da oclusão
(aprisionamento) doiodo nas cadeias lineares da amilose, enquanto que a amilopectina
por nãoapresentar estrutura helicoidal, devido à presença das ramificações,
ainteração com o iodo será menor, e a coloração menos intensa. O resultado final da
complexão do amido com o iodo é a formação de um complexo de cor azul intensa.
b) Explique para quais situações essa técnica pode ser utilizada. O teste de Schiller tem a
finalidade de demarcar áreas de epitélio escamosocervicovaginal, que é rico em
glicogênio e, portanto, adquire uma coloraçãomarrom-escuro. Áreas pobres em
glicogênio adquirem uma tonalidade deamarelo suave, caracterizando um teste
de Schiller positivo. Estaalteração não significa, necessariamente, a
presença de lesãosuspeita de neoplasia, devendo ser correlacionada com
outros examespelo ginecologista, assim como, se necessário, a colposcopia. Assim,o
examede Papanicolau deve ser complementado pelo teste de Schiller, por
serprocedimento auxiliar e eficaz na constatação das lesões do colo
uterino.Umsegundo estudo relata que o Teste de Shiller ou Teste do Lugol é
consideradocomplementar a citologia convencional, sendo que sua positividade (iodo
-)serve de indicação para a realização da colposcopia, enquanto
suanegatividade tranquiliza o responsável pela leitura do exame. (2 ) (grau)
c) Explique os resultados encontrados no experimento. Na primeira amostra de
imediato identifica a coloração azul esverdeada,indicando a presença do amido.
Na segunda amostra não houve alteração de cor, o que indica a ausência de amido,
apresentando a coloração do lugol, amarelada.

REAÇÃO DE SAPONIFICAÇÃO

1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

2. Responda as Perguntas:

a) Explique bioquimicamente o que são ácidos graxos e triglicerídeos.

b) Explique a fundamentação teórica da técnica de saponificação.
c) Explique os resultados encontrados no experimento.
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SOLUBILIDADE DOS LIPÍDIOS

1. Descreva os procedimentos realizado durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

2. Responda as Perguntas:

a) Explique a estrutura bioquímica dos lipídios correlacionado com sua característica de

insolubilidade em soluções aquosas.
b) Explique a fundamentação teórica da técnica de solubilidade dos lipídios.
c) Explique os resultados encontrados no experimento.