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MAIO 1996 NBR 13641

Riboflavina 5’-fosfato de sódio -
Determinação do teor de pureza
ABNT-Associação
Brasileira de
Normas Técnicas

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NORMATÉCNICA

Método de ensaio
Origem: Projeto 13:005.01-061/1994
CB-13 - Comitê Brasileiro de Alimentos e Bebidas
CE-13:005.01 - Comissão de Estudo de Conservadores
NBR 13641 - Riboflavin 5’-sodium phosphate - Purity test - Method of test
Copyright © 1996, Descriptors: Dye. Food
ABNT–Associação Brasileira
de Normas Técnicas Válida a partir de 01.07.1996
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Impresso no Brasil Palavras-chave: Corante. Alimento 2 páginas
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1 Objetivo 3.1.1 Piridina p.a.

3.1.2 Ácido sulfúrico 0,1 N.

Esta Norma prescreve o método para a determinação do
teor de pureza em riboflavina 5’-fosfato de sódio. 3.1.3 Padrão de referência de riboflavina 5’-fosfato de sódio
USP.
2 Aparelhagem
3.2 Ensaio
A aparelhagem necessária à execução do ensaio é a se-
3.2.1 Na solução para ensaio, pesar, com exatidão em
guinte:
miligramas, cerca de 50 mg da amostra e colocar em um
frasco de Erlenmeyer de 250 mL.
a) balança analítica;
3.2.2 Adicionar 20 mL de piridina e 75 mL de água, agi-
b) fluorômetro; tando com freqüência para dissolver.

3.2.3 Transferir a solução para um frasco volumétrico de

c) quatro frascos volumétricos de 1000 mL; 1000 mL, levar a volume com água e misturar.

3.2.4 Transferir 10,0 mL desta solução para um outro frasco

d) dois frascos de Erlenmeyer de 250 mL.
Nota: Toda a vidraria deve ser de vidro opaco aos raios ultra-
violetas e todos os ensaios devem ser realizados fora do
alcance da luz solar direta.
3 Execução do ensaio
3.1 Reagentes
volumétrico de 1000 mL, adicionando quantidade su-
ficiente de ácido sulfúrico 0,1 N (cerca de 4 mL) para que
o pH final da solução seja 5,9-6,1. Levar a volume com
água e misturar.
3.2.5 Na solução-padrão de referência, pesar, com exa-
tidão em miligramas, cerca de 35 mg do padrão de refe-
rência de riboflavina 5’-fosfato de sódio USP e proceder
como descrito em 3.2.1 a 3.2.4.

3.2.6 Medir a intensidade da fluorescência de ambas as

Os reagentes necessários ao ensaio estão prescritos em soluções em um fluorômetro na faixa de 530 nm, usando
3.1.1 a 3.1.3. uma excitação de 440 nm.
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2 NBR 13641/1996

4 Resultado Onde:

Determinar a quantidade, em miligramas, de riboflavina Iu = valor da fluorescência da solução para ensaio

5’-fosfato de sódio (C17H2ON4O6) na amostra, através da
seguinte equação: Is = valor da fluorescência da solução-padrão

C = concentração exata de riboflavina, em µg/L, na

Iu
Quantidade de riboflavina 5’-fosfato de sódio (mg) = 100 . C . solução-padrão corrigida pela perda por dis-
Is secação