PROVA 2: Química de Biomoléculas II

1. Na fotossíntese as plastoquinonas auxiliam na transferência de elétrons.

Mostre escrevendo o mecanismo qual a parte de sua molécula que sofre
oxidação-redução. A cadeia lateral isoprenoide não participa da reação,
qual a função dela?
A cadeia de transferência de elétrons fotossintética e a redução de TRXs cloroplásticos.
Na membrana tilacóide, quando o fotossistema II (PSII) é excitado pela absorção de
uma energia luminosa de fóton, a molécula de clorofila do centro de reação perde
transitoriamente um elétron. Este elétron é transmitido para o polo de plastoquinona
(PQ) que recebe um próton do estroma. Após a oxidação, o centro de reação clorofila é
um agente oxidante muito forte que é capaz de aceitar elétrons da água, resultando na
produção de oxigênio e prótons no lúmen. A clorofila pode então ser excitada
novamente. A plastoquinona reduzida pode se mover através da membrana do PSII para
o citocromo b6/f (Cyt b6/f). Lá, a plastoquinona é oxidada e seu próton é liberado no
lúmen, levando a um transporte de prótons do estroma para o lúmen. Seu elétron é
posteriormente transferido para o fotossistema I (PSI) via citocromo b6/f e plastocianina
(PC). Esta transferência de elétrons permite a redução da clorofila do centro de reação
PSI excitado. Após a excitação, essa clorofila dá seu elétron para a ferredoxina estromal
(Fd) que pode reduzir as tioredoxinas cloroplásticas (TRX) através da ferredoxina-
tioredoxina redutase (FTR) e NADP+ através da ferredoxina NADP redutase (FNR). A
fotólise da água e o transporte de prótons via plastoquinonas contribuem para o
estabelecimento de um gradiente de prótons entre o estroma e o lúmen. Este gradiente é
usado como fonte de energia pela ATP sintase para a síntese de ATP. esta clorofila dá
seu elétron para a ferredoxina estromal (Fd) que pode reduzir as tiorredoxinas
cloroplásticas (TRX) através da ferredoxina-tioredoxina redutase (FTR) e NADP+
através da ferredoxina NADP redutase (FNR). A fotólise da água e o transporte de
prótons via plastoquinonas contribuem para o estabelecimento de um gradiente de
prótons entre o estroma e o lúmen. Este gradiente é usado como fonte de energia pela
ATP sintase para a síntese de ATP. esta clorofila dá seu elétron para a ferredoxina
estromal (Fd) que pode reduzir as tiorredoxinas cloroplásticas (TRX) através da
ferredoxina-tioredoxina redutase (FTR) e NADP+ através da ferredoxina NADP
redutase (FNR). A fotólise da água e o transporte de prótons via plastoquinonas
contribuem para o estabelecimento de um gradiente de prótons entre o estroma e o
lúmen. Este gradiente é usado como fonte de energia pela ATP sintase para a síntese de
ATP.
 2. Na fotossíntese se colocarmos um inibidor da passagem de elétrons
impedindo que esses cheguem à feofitina, afetaria o fluxo de elétrons no
fotossistema I e no II? Explique sua resposta analisando a fotossíntese como
um todo.
Sim, pois durante as reações dependentes de luz, um elétron que é excitado em PSII é
passado por uma cadeia de transporte de elétrons para PSI (perdendo energia ao longo
do caminho). No PSI, o elétron é excitado novamente e passa pela segunda perna da
cadeia de transporte de elétrons para um aceptor final de elétrons. Então pode-se afirmar
que se for colocado um inibidor impedindo a passagem de elétrons até à feofitina não
ocorrerá a transferência de elétron livro no fotossistema II para o primeiro de uma série
de proteínas dentro da membrana tilacóide chamada cadeia de transporte de elétrons.
Então, não há passagem de elétron ao longo dessas proteínas, a energia do elétron não
alimenta as bombas de membrana que moveriam ativamente os íons de hidrogênio
contra seu gradiente de concentração do estroma para o espaço tilacóide. Isso é bastante
análogo ao processo que ocorre na mitocôndria em que uma cadeia de transporte de
elétrons bombeia íons de hidrogênio do estroma mitocondrial através da membrana
interna e no espaço intermembranar, criando um gradiente eletroquímico. Depois que a
energia é usada, o elétron seria aceito por uma molécula de pigmento no próximo
fotossistema, que é chamado de fotossistema I.
 3. Durante a fotossíntese, oito fótons precisam ser absorvidos (quatro em cada
fotossistema) para cada molécula de O2 produzida, como mostra a equação
abaixo:
2H2O + 2NADP+ + 8 fótons → 2NADPH + 2H+ + O2
Explique esse fato acima, ou seja, como oito fótons são absorvidos usando as
reações de redução com as plastoquinonas e a formação de duas moléculas
de NADPH.
Essa fosforilação ocorre quando os elétrons fluem da molécula de água até o NADP+
em um sistema acíclico. O PSII produz um oxidante forte, enquanto o PSI produz um
redutor forte, sendo que nesse tipo de fosforilação ocorre a fotólise da água, síntese de
ATP e produção de NADPH.
De acordo com a equação dada no enunciado da questão, podemos afirmar que: para
cada par de elétrons que flui de uma molécula de água até o NADP+, duas quantas de
luz são absorvidos em cada fotossistema. Para formar uma molécula de O2 são
necessárias duas moléculas de água que oxidam, gastando para tanto, oito fótons (quatro
em cada fotossistema) para a redução de duas moléculas de NADP+ a NADPH.

4. Quando os cloroplastos são iluminados com luz de 700 nm, citocromo f,

plastocianina e hidroquinonas são oxidados. No entanto, quando os
cloroplastos são iluminados com luz de 680 nm, esses carregadores de
elétrons plastoquinonas e plastocianina são reduzidos. Explique esse fato,
usando as reações de redução-oxidação com o citocromo f, a plastocianina e
as hidroquinonas.
Pela Figura acima temos que, iniciando com o FSII, a absorção da luz por um complexo
antenapigmento excita P680 (P680 é uma forma especial de clorofila que absorve a luz
num comprimento de onda de 680nm) e leva à reação fotoquímica (ejeção do elétron de
alta energia). O P680, agora oxidado, é um potente agente oxidante, apresentando
grande habilidade em extrair elétrons da água. Os elétrons são transferidos da água para
oxidar P680 através de um complexo protéico-manganês localizado próximo ao espaço
tilacóide (também conhecido como espaço intra-tilacóide ou lúmen). Para cada
molécula de água quebrada, dois íons H+ são liberados neste espaço (contribuindo para
ao gradiente de prótons) e dois elétrons são liberados. Os elétrons do ativado P680 são
transferidos através de outros carregadores para a plastoquinona (PQ). PQ é um
carregador de H e, tendo recebido dois elétrons, pega dois prótons do estroma (2 H + )
transformando-se em PQH2. Logo após, PQH2 doa dois elétrons ao complexo
citocromo e lança os 2 H+ no lúmen Os elétrons do citocromo, citocromo f, são então
transferidos para plastocianina (PC), uma proteína que contém cobre, a qual pode
mover-se a curta distância ao longo da superfície da membrana do FSI. O doador
primário de elétron no PSI, o P700, aceita os elétrons da PC quando ele estiver
energizado pela luz absorvida pela antena associada. P700 transfere elétrons para
Ferrodoxina (Fd, um proteína que contém ferro) localizada no lado estroma. A fd, por
sua vez, reduz NADP+ via uma enzima redutase (NADP redutase), produzindo o
NADPH. Esse caminho não cíclico dos elétrons produz NADPH e promove uma
transferência de prótons para dentro do lúmen, o qual torna-se acidificado (pH 5) em
relação ao estroma (pH 8).
 5. No fluxo cíclico de elétrons entre o PSI e o complexo de citocromos b6f O2 é
liberado? NADPH é produzido? Não diga somente sim ou não, explique a
sua resposta. Qual a principal função desse fluxo cíclico de elétrons?
Sim, pois depois de deixar PSI, os elétrons que fluem ciclicamente viajam de volta para
o complexo citocromo (Cyt) ou plastoquinona (Pq) na primeira perna da cadeia de
transporte de elétrons. Os elétrons então fluem pela cadeia para PSI como de costume,
impulsionando o bombeamento de prótons e a produção de ATP. A via cíclica não
produz NADPH, uma vez que os elétrons são encaminhados para longe do NADP+
redutase.

Fonte: Imagem modificada de " The Light-Dependent Reactions of Photosynthesis: Figure

8 ", do OpenStax College, Biology ( CC BY 4.0.
Pelo menos em alguns casos, os cloroplastos parecem mudar de fluxo de elétrons
linear para cíclico quando a razão de NADPH para NADP+ é muito alto (quando muito
pouco NADP+ está disponível para aceitar elétrons). Além disso, o fluxo cíclico de
elétrons pode ser comum em tipos de células fotossintéticas com necessidades
especialmente altas de ATP (como as células da bainha de plantas que sintetizam
açúcares. Finalmente, o fluxo cíclico de elétrons pode desempenhar um papel
fotoprotetor, evitando que o excesso de luz danifique as proteínas do fotossistema e
promovendo o reparo de danos induzidos pela luz.
6. Em um experimento de laboratório, cloroplastos de espinafre são
iluminados na ausência de ADP e Pi; a luz é então desligada e ADP e Pi são
adicionados. ATP é sintetizado por um curto período de tempo no escuro.
Explique porque a síntese de ATP para. Mostre quais as reações que
pararam e acarretaram a parada da síntese de ATP.
Nas reações dependentes de luz, a energia absorvida pela luz solar é armazenada por
dois tipos de moléculas transportadoras de energia: ATP e NADPH. A energia que essas
moléculas carregam é armazenada em uma ligação que mantém um único átomo na
molécula. Para ATP, é um átomo de fosfato, e para NADPH, é um átomo de hidrogênio.
Lembre-se de que o NADH era uma molécula semelhante que transportava energia na
mitocôndria do ciclo do ácido cítrico para a cadeia de transporte de elétrons. Quando
essas moléculas liberam energia no ciclo de Calvin, cada uma delas perde átomos para
se tornar as moléculas de menor energia ADP e NADP + .

O acúmulo de íons de hidrogênio no espaço tilacóide forma um gradiente eletroquímico

devido à diferença na concentração de prótons (H + ) e à diferença na carga através da
membrana que eles criam. Essa energia potencial é coletada e armazenada como energia
química no ATP através da quimiosmose, o movimento dos íons de hidrogênio a favor
de seu gradiente eletroquímico através da enzima transmembrana ATP sintase, assim
como na mitocôndria.

Os íons de hidrogênio podem passar através da membrana tilacóide através de um

complexo de proteína incorporado chamado ATP sintase. Essa mesma proteína gerou
ATP a partir de ADP na mitocôndria. A energia gerada pelo fluxo de íons de hidrogênio
permite que a ATP sintase ligue um terceiro fosfato ao ADP, que forma uma molécula
de ATP em um processo chamado fotofosforilação. O fluxo de íons de hidrogênio
através da ATP sintase é chamado de quimiosmose, porque os íons se movem de uma
área de alta para baixa concentração através de uma estrutura semipermeável.

7. Em um experimento de laboratório, cloroplastos de espinafre são

iluminados na ausência de CO2 e então incubado com 13CO2 no escuro, [13C]
ribulose-1,5-bifosfato é formada em pequena quantidade, ou seja, sua
síntese cessa depois de um curto período, Porque? Lembrar, dependência
da assimilação de CO2 e a fotossíntese na fase claro.
Alguns autores apontam que a fotorrespiração ocorre porque a Rubisco do Ciclo de
CalvinBenson atua também como oxigenase, além da função carboxilase (Rubisco =
ribulose 1,5 bisfosfato carboxilase-oxigenase). O CO2 e o O2 competem pelo sítio
ativo, mas quando o O2 se combina com RUBP, um ácido de 2 carbonos (fosfoglicolato
ou ácido fosfoglicólico) é formado, e ele não é usado no Ciclo de Calvin-Benson. O
fosfoglicolato é rapidamente convertido em glicolato, que é o substrato para a
fotorrespiração. A fotorrespiração envolve três organelas: peroxissoma, mitocôndria e
cloroplasto. Um fornecimento de energia é requerido (ATP e ferrodoxina reduzida). O
O2 é consumido e uma parte do glicolato é perdido como CO2 e outra parte retorna ao
ciclo de Calvin-Benson como 3- PGA. A função carboxilase da Rubisco é favorecida
por teores elevado de CO2 e temperaturas e intensidades luminosas moderadas,
resultando em 2 moléculas de 3-PGA. A função oxigenase é favorecida por
temperaturas e intensidades luminosas elevadas, dando como resultado 1 moléculas de
3-PGA e 1 molécula de ácido fosfoglicólico. Assim, altas taxas de fotorrespiração
ocorrem em altas temperaturas e irradiâncias devido: a) o substrato específico da
Rubisco prefere o O2 com o aumento da temperatura e b) a concentração de CO2 na
folha torna-se limitante e baixo sob altas irradiâncias porque a fotossíntese é acelerada.
Plantas C4 minimizam a função oxigenase da Rubisco e a fotorrespiração, pois
concentram o CO2 no sítio do ciclo de Calvin-Benson. Plantas C3 apresentam maior
fotorrespiração que plantas C4, considerando que plantas C3 apresentam menor
afinidade com a Rubisco do que as plantas C4 com a PEP-case. Assim, a carboxilação
nas plantas C3 é feita apenas pela Rubisco, enquanto que nas plantas C4, além da
Rubisco, existe a PEP-case como enzimas responsáveis pela carboxilação. Evidências
experimentais recentes tem demonstrado que a fotorrespiração também poderia servir
como um caminho de defesa do aparelho fotossintético, principalmente em plantas
expostas às altas intensidades luminosas e baixas concentrações internas de CO2 (p.ex.
quando os estômatos se fecham em condições de estresse hídrico). Na etapa bioquímica
da fotossíntese (ciclo de CalvinBenson) são consumidos 2 NADPH e 3 ATP, ao passo
que, na fotorrespiração, são consumidos 4 NADPH e 7 ATP, para cada molécula de
CO2 fixada ou liberada, respectivamente. Dessa forma, a fotorrespiração teria como
função dissipar o excesso de ATP e NADPH+H+ produzidos na etapa luminosa da
fotossíntese, protegendo a planta da 'foto-inibição' e permitindo uma rápida recuperação
após o período de estresse.
8. Escreva a sequência de etapas e a reação resultante necessária para a
conversão de gliceraldeído-3-fosfato e diidroxicetona-fosfato para a
produção de amido no estroma do cloroplasto.
A denominação C3 advém do fato da maioria das plantas verdes formarem como
primeiro produto estável da cadeia bioquímica da fotossíntese o ácido 3-fosfoglicérico
(3-PGA), uma molécula com 3 carbonos. De forma bastante simplificada, a fotossíntese
C3 envolve a adição de uma molécula de CO2 – reação de carboxilação – em uma
molécula aceptora constituída de 5 carbonos e dois átomos de fósforo, a ribulose 1,5
bisfosfato (RUBP). A Rubisco (ou seja, a ribulose 1,5 bisfosfato carboxilase-oxigenase)
é a enzima responsável pela carboxilação no ciclo C3¸ também conhecido como ciclo de
Calvin-Benson (Figura 21). A RUBP sofre uma série de mudanças envolvendo gasto de
NADPH e ATP – reações de redução – originando no final do processo a triose fosfato.
Ao mesmo, através de reações de regeneração, novas moléculas de RUBP são formadas,
garantindo a continuidade da fixação do carbono. Um resumo da fotossíntese C3 pode
ser observado na Figura abaixo.

9. Se uma planta de milho é iluminada na presença de 13CO2, depois de cerca

de 1 segundo, mais de 90% de todo o C incorporado nas folhas são
13

encontrados no C-4 do malato, e do oxaloacetato. Apenas após 60 segundos

é que o 13
C aparece no C-1 do 3-fosfoglicerato. Explique e mostre as
equações químicas de como isso acontece.
As plantas C4 são assim chamadas por formarem como primeiro produto da fotossíntese
o ácido oxalacético (4C), o qual é rapidamente reduzido à ácido málico e ácido
aspártico, ambos com 4C, porém mais estáveis. Estruturalmente, outra diferença entre
as plantas C3 e C4 é a presença nestas últimas de uma camada proeminente de células
clorofiladas envolvendo os feixes condutores da folha (“anatomia Kranz” ou “síndrome
de Kranz”). Nestas plantas, além da presença da Rubisco, confinada às células da bainha
Kranz, é encontrada nas células do mesófilo foliar a fosfoenolpirúvico carboxilase
(PEPcase), uma enzima com uma afinidade muito maior pelo CO2 do que a primeira. A
compartimentação espacial das duas enzimas faz com que o CO2 fixado pela PEPcase
se transloque, via malato e aspartato, até a bainha dos feixes vasculares, onde ocorre a
descarboxilação com a entrada do carbono no ciclo de CalvinBenson (Figura abaixo).

10. Quais as vantagens do fluxo cíclico de elétrons entre o PSI e o complexo de

citocromos b6f para as plantas que contêm o ciclo C3 e C4?
Conforme visto até agora, a fotossíntese pode ser descrita como um processo da qual a
energia luminosa absorvida pela clorofila origina o transporte de elétrons (conversão da
energia luminosa em energia elétrica), o qual por sua vez gera energia química, esta
acumulada nas moléculas de ATP e NADPH – poder assimilatório ou poder redutor.
Este é por sua vez utilizado nas etapas seguintes da fotossíntese, representada pela
assimilação do carbono (“reações do escuro” ou “fase escura”), ligando o CO2 em um
aceptor, reduzindo-o assim a CH2O (carboidrato). Na figura 20 é mostrada a “conexão”
entre a fase luminosa e a fase escura da fotossíntese. No transporte acíclico, os elétrons
da água “empurrados morro acima” até o NADP+ , por meio do esforço combinado dos
fótons absorvidos por cada um dos fotossistemas (PSI e PSII), constituem-se na maior
parte do esquema Z. Ao contrário do sistema acíclico, no transporte cíclico os elétrons
energizados do PSI simplesmente retornam a este, não havendo portanto consumo de
água nem formação de NADPH. De qualquer forma, tanto o transporte cíclico quanto o
acíclico de elétrons geram entre ambas as superfícies da membrana tilacóide em
gradiente de prótons que é descarregado por meio da atividade de uma ATP sintase,
levando a formação de ATP a partir de ADP e fósforo inorgânico (Pi).

Referências Bibliográficas:
1. Lodish, H., Berk, A., Zipursky, S. L., Matsudaira, P., Baltimore, D., and Darnell, J.
(2000). Molecular analysis of photosystems. In Molecular cell biology (4th ed., section
16.4). New York, NY: W. H. Freeman. Retrieved from
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK21484/.
2. Gutierrez, R. Bio41 Week 7 Biochemistry Lectures 11 and 12. Bio41. 2009.
3. Berg, J. M., Tymoczko, J. L., and Stryer, L. (2002). Two photosystems generate a
proton gradient and NADPH in oxygenic photosynthesis. In Biochemistry (5th ed.,
section 19.3). New York, NY: W. H. Freeman. Retrieved from
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK22538/#_A2681_.
4. Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., and Walter, P. (2002).
Chloroplasts and photosynthesis. In Molecular biology of the cell (4th ed.). New York,
NY: Garland Science. Retrieved from http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26819/.
5. Karp, G. (2009). Photosynthesis and the chloroplast. In Cell and molecular biology:
concepts and experiments. (6th ed., pp. 206-228). Hoboken, NJ: Wiley.