Fotossíntese – Parte 2

Prof. Carlos A. Martinez (carlosamh@ffclrp.usp.br - Departamento de Biologia, FFCLRP, USP, 14040-901, Ribeirão Preto, SP)
Colaboração na elaboração e processamento de imagens: Prof. Marcelo Loureiro (UFV), R. Salermo, N. Rust e W. Antunes

FOTOSSÍNTESE – PARTE 2 ......................................................................................................................................... 1

5.1) ESTRUTURA DOS COMPLEXOS PROTÉICOS ENVOLVIDOS NAS REAÇÕES FOTOQUÍMICAS ......................................... 3
5.1.1) Fotossistema II (PSII)...................................................................................................................................... 3
5.1.2) COMPLEXO CITOCROMO B6 /F....................................................................................................................... 4
5.1.3) FOTOSSISTEMA I (FSI).................................................................................................................................. 5
5.1.4) COMPLEXO ATP-SINTASE E SÍNTESE DE ATP................................................................................................. 5
5.2) TRANSPORTE CÍCLICO DE ELÉTRONS NAS MEMBRANAS DOS TILACÓIDES ..................................................... 6
6) HERBICIDAS QUE AFETAM AS REAÇÕES FOTOQUÍMICAS: ...................................................................... 8

7) CICLO DE CALVIN (REDUÇÃO DO CO2)........................................................................................................... 10

8) REGULAÇÃO DO CICLO DE CALVIN................................................................................................................ 12

5) Fase Fotoquímica da Fotossíntese

A fotossíntese pode ser representada pela seguinte equação:

CO2 + 2nH2O + Energia luminosa (CH2O)n + nO2 + nH2O

A síntese de carboidratos ((CH2O)n) a partir de dióxido de carbono e água requer um grande

consumo de energia. A energia livre para a redução de um mol de CO2 até o nível de glicose é de
478 kJ mol-1, sendo utilizada a energia luminosa para promover essa reação.

A fotossíntese pode ser dividida em duas fases que ocorrem simultaneamente 1) Fase
fotoquímica, onde a energia luminosa é transformada em energia química presente nas moléculas
de ATP e NADPH, e, 2) Fase bioquímica, na qual essa energia produzida nas reações fotoquímicas é
utilizada para a fixação do CO2. Anteriormente, essas fases eram denominadas erroneamente de
fase clara e fase escura da fotossíntese. O erro do uso desses termos para definir as diferentes fases
da fotossíntese, consiste que ambas as fases só ocorrem na presença de luz, visto que muitas das
enzimas participantes nas reações bioquímicas de fixação de CO2 só estão ativas na presença da luz.
 Na fase fotoquímica da fotossíntese participam 4 grandes complexos protéicos: 1)
fotossistema II, onde ocorre a hidrólise da molécula de água; 2) complexo citocromo b6-f, o qual
participa no transporte de elétrons entre o fotossistema I e II; 3) fotossistema I , onde os elétrons
provenientes da água são utilizados para a redução do NADP+; 4) complexo sintase do ATP, onde é
transformada a energia química potencial presente no gradiente protônico entre o lúmem do
tilacóide e o estroma, em ATP (Fig 13).

Fig. 13. Esquema geral das reações fotoquímicas, apresentando os quatro grandes complexos protéicos envolvidos nas
reações fotoquímicas.
.

No fotossistema II (FSII), ocorre perda de um elétron da clorofila do centro de reação. A

perda desse elétron está associada também a atuação do complexo de evolução do oxigênio (CEO),
o qual retira 4 elétrons de duas moléculas de água em uma só vez. Cada elétron oriundo
da molécula de água será usado para restituir aqueles perdidos pelas moléculas de clorofila do
centro de reação, re-estabelecendo a capacidade de doação de elétrons daquelas moléculas. As
plastoquinonas (PQ) receberão esses elétrons, e ao recebê-los, captarão dois prótons do estroma,
liberando-os no lúmem, quando da liberação dos mesmos elétrons ao complexo citocromo b6f
(Cit.b6f). Esses elétrons serão então doados a plastocianina a qual os transportará ao fotossistema I
(FSI) , repondo os elétrons perdidos pelas clorofilas do centro de reação desse fotossistema, quando
excitadas pela luz. Esses elétrons são doados pelo FSI a ferredoxina (Fdx), a qual então, através da
enzima oxidoredutase da Ferredoxina-NADP+ (FNR) , reduzirá o NADP+ a NADPH. A hidrólise da
água liberará 4 prótons no lúmem, que somados a mais quatro prótons transportados pelas
plastoquinonas (quando do transporte de 4 elétrons advindos da hidrólise daquelas moléculas), gera
então uma energia química potencial presente neste gradiente eletroquímico de prótons, o qual
então será utilizado pela sintase do ATP para gerar ATP (potencialmente podem ser gerados 3 ATP
a partir desses 8 prótons liberados no lúmem). Assim, a hidrólise de duas moléculas de água, e o
transporte de seus quatro prótons, poderão gerar 2 moléculas de NADPH e 3 moléculas de ATP.
 5.1) Estrutura dos Complexos Protéicos Envolvidos nas Reações Fotoquímicas

Em resumo, a etapa fotoquímica começa com a absorção de energia luminosa pelos dos
sistemas coletores antena LHCII e LHCI, associados respectivamente aos fotossistemas II (PSII) e I
(PSI). A captura da energia luminosa possibilita a transferência de elétrons da molécula de água até
o NADP+ , com a formação de NADPH. A fotólise da molécula de água e o transporte de elétrons
permitem a criação de um gradiente de prótons entre o lúmen do tilacóide e o estroma do
cloroplasto. Esse gradiente eletroquímico de prótons permite a síntese de ATP, via complexo ATP-
sintase. A etapa fotoquímica resulta então, em produção de poder redutor (NADPH), liberação de
oxigênio (subproduto da dissociação da molécula da água), e formação de ATP por meio do
complexo ATP-sintase. O ATP e NADPH são utilizados no Ciclo de Calvin, aonde o CO2 será
fixado e reduzido.

Como pode ser observado na fig. 13, são quatro os complexos protéicos envolvidos nas reações
fotoquímicas da fotossíntese. Esses complexos diferem quanto as proteínas que os compõem, bem
como sua função:

5.1.1) Fotossistema II (PSII)

Fotossistema II é um complexo composto de mais de 15 polipeptídeo. Entre eles se

destacam as proteínas D1 e D2. Associadas à proteína D1 estão:

a) O centro de reação P680 , o qual contém uma molécula especial de clorofila a que atua como

doador primário de elétrons;

b) A feofitina, que é uma molécula de clorofila a modificada (2 átomos de H ao invés do átomo

central de Mg), e que atua como aceptor primário de elétrons;

c) A plastoquinona QB , quinona especial de plastídeo, que transporta elétrons da QA até o complexo

citocromo b6 /f ;
d) O doador secundário de elétrons Z (resíduo de tirosina), que transfere elétrons da molécula da

água até o P680.

e) A proteína D2 mantém ligada à sua estrutura a plastoquinona QA, que transfere elétrons da

feofitina até a QB. Recentes evidências mostram que o heterodimero D1 / D2 também mantém ligado
o complexo de oxidação da molécula de água (complexo que evolui oxigênio, CEO). (Figura 14)
Fig. 14: Estrutura do fotossistema II, apresentando as suas proteínas constituintes, centro de reação e o complexo de
evolução de oxigênio (CEO).

Ligada às proteínas do CEO, existem quatro átomos de manganês, os quais servem como
“reservatórios” temporários de elétrons. A reação de hidrólise da água por esse complexo, utiliza
como substrato, duas moléculas de água simultaneamente, retirando então quatro elétrons de uma
só vez, os quais são então armazenados nos átomos do manganês. Esses elétrons irão então, um de
cada vez, recompor os elétrons perdidos pela clorofila do centro de reação do fotossistema II.
Somente após a retirada dos quatro elétrons do CEO, é que uma nova hidrólise da água pode
ocorrer. Assim, a hidrólise da água é um processo dependente da perda de elétrons pela clorofila,
ocorrendo somente durante o dia.

Em resumo, no Fotossistema II, a molécula de água é oxidada até oxigênio e os elétrons

gerados permitem a redução da plastoquinona. Na oxidação de duas moléculas de água, são
removidos 4 elétrons, gerando-se uma molécula de oxigênio molecular e 4 íons hidrogênio.

5.1.2) Complexo Citocromo b6 /f

O complexo citocromo b6 /f é formado por quatro diferentes polipeptídeos, o citocromo b6 ,

o citocromo f, uma proteína que contem ferro-enxofre (2Fe-2S) e um quarto polipeptídeo chamado
de polipeptídeo IV, de função ainda desconhecida. Em resumo, o complexo citocromo b6 / f
transfere elétrons da quinona reduzida (PQH2) até a plastocianina, que é uma proteína periférica
móvel que contem cobre e que tem como principal função transferir elétrons do citocromo b6/f até o
P700 ,centro de reação do Fotossistema I. O citocromo b6/f também participa no transporte cíclico de
elétrons, um fenômeno denominado de Ciclo Q (Q de quinona), doando e recebendo os elétrons da
plastoquinona. Esse processo também ocorre na cadeia de transporte de elétrons mitocondrial,
aonde um outro complexo protéico está envolvido.
 5.1.3) Fotossistema I (FSI)

O Fotossistema I é formado por um complexo multiproteínico que mantém ligados vários

transportadores de elétrons. O centro de reação é energizado por um complexo "antena" de
aproximadamente 200 moléculas de clorofila a. A energia é transferida ao P700 , dímero de clorofila
a . Associados ao PSI se encontram o A0 , monômero de clorofila a , centros Ferro-Enxofre (Fx , FA,
FB ), que transportam elétrons até a ferredoxina (Fig. 15). O complexo Fotossistema I catalisa a
oxidação da plastocianina e a redução da ferredoxina.

Fig. 15. Estrutura do fotossistema I, mostrando o transporte de elétrons da plastocianina (doador de elétrons do FSI) e a
ferredoxina.

5.1.4) Complexo ATP-sintase e síntese de ATP

O complexo ATPsintase é formado de duas partes, o FO e o F1 . O FO é composto de 3 tipos de

subunidades em diferente número, as proteínas a(1), b(2) e c(9-12). Esses polipeptídeos se
encontram inseridos na membrana tilacoidal, formando no seu interior um canal protônico, através
do qual ocorre o fluxo de prótons do lúmen até o estroma (Figura 9). O F1 é composto de, pelo
menos, 5 polipeptídeos extrínsecos (α , β , δ , γ , ε ), formando uma estrutura esférica, que contém
sítios catalíticos para a síntese de ATP. A energia do gradiente eletroquímico de prótons, criado
durante o transporte de elétrons entre os fotossistemas, é utilizada para a síntese de ATP por meio
do mecanismo quimiosmótico proposto por Peter Mitchell em 1960.

ADP-3 + Pi-2 + H+ =========> ATP-4 + H2O

Segundo esse mecanismo, que lhe valeu o Prêmio Nobel de Química a Mitchel, em 1976, a
diferença de concentração de íons e a diferença de potencial elétrico através da membrana são as
fontes de energia livre utilizada para sintetizar ATP. Mitchell propôs que a energia total disponível
para a síntese de ATP, chamada de força próton motora (∆ p ), resulta da soma do potencial
químico de prótons (∆ pH) e do potencial elétrico transmembrana (∆ ψ ):

∆ p = ∆ pH + ∆ ψ
A elucidação do mecanismo enzimático da síntese do ATP foi realizado por Paul Boyer e John
Walker, da Universidade de California (EUA) e do Laboratorio de Biologia Molecular, Cambridge
(Reino Unido), respectivamente. Estes pesquisadores obtiveram o prêmio Nobel de Quimica em
1997 por esta descoberta. Boyer e colaboradores clarificaram a estrutura tridimensional da
ATPsintase.

Segundo o mecanismo proposto por Boyer e Walker, quando os ions hidrogênio fluem atraves da
membrana, pelo disco formado pelas subunidades c da parte Fo, o disco é obrigado a girar. Esse
giro obriga a rotar à subunidade gamma da parte F1 que se encontra ligada a esse disco. As três
subunidades beta e alfa da parte F1 não podem girar por encontrar-se ancoradas pela subunidade b.
A subunidade gamma rota dentro do cilindro formado pelas 6 subunidades alfa e beta. Dado que a
subunidade gamma é assimétrica, sua rotação provoca mudanças estruturais na subunidade beta. A
subunidade beta muda de três formas βO , βL e βT. As mudanças estruturais na subunidade beta
permite que o ADP e o ATP fiquem ligados com diferente força

Em resumo, a etapa fotoquímica começa com a absorção de energia luminosa pelos dos
sistemas coletores antena LHCII e LHCI, associados respectivamente aos fotossistemas II (PSII) e I
(PSI). A captura da energia luminosa possibilita a transferência de elétrons da molécula de água até
o NADP+ , com a formação de NADPH. A fotólise da molécula de água e o transporte de elétrons
permitem a criação de um gradiente de prótons entre o lúmen do tilacóide e o estroma do
cloroplasto. Esse gradiente eletroquímico de prótons permite a síntese de ATP, via complexo ATP-
sintase. A etapa fotoquímica resulta em:

• Produção de forte agente redutor, NADPH

• Liberação de oxigênio como subproduto da dissociação da molécula da água
• Formação de ATP por meio do complexo ATP-sintase

O ATP e NADPH são utilizados no Ciclo de Calvin.

5.2) Transporte Cíclico de Elétrons nas Membranas dos Tilacóides

Até agora apresentamos o transporte acíclico, através do qual os elétrons são retirados da
+
água (fonte dos elétrons), no CEO do FSII, e transportados ao receptor final de elétrons (NADP ),
 +
resultando na síntese de NADPH. Os elétrons, quando chegam no NADP , não voltam mais a
membrana do tilacóide, inexistindo então a possibilidade de um transporte cíclico a partir dessa
molécula.
Também pode haver um transporte cíclico de elétrons nas reações fotoquímicas. Reações de
estresse, as quais podem prejudicar o funcionamento do FSII, ou das reações do Ciclo de Calvin,
podem servir como gatilhos para ativar um certo níivel de transporte cíclico de elétrons.
Este transporte cíclico, pode ocorrer de duas formas. A primeira é chamada de Ciclo Q (Q de
quinona), em analogia a um clico semelhante que ocorre nas reações de transporte de elétrons na
cadeia de transporte de elétrons. A segunda forma é denominada de fotofosforilação cíclica, aonde
ocorre um transporte cíclico dos elétrons do FSI a plastoquinona oxidada, junto ao FSII.
O ciclo Q envolve o transporte cíclico de elétrons entre a plastoquinona reduzida (ou
plastoquinol, ou PQH2) e o complexo citocromo b6f (Fig xá). No sítio de ligação do quinol (Qp),
uma molécula de mplastoquinol é oxidada e dois prótons são gerados ao lúmem. Durante o primeiro
desvio de elétrons pelo complexo (A), um elétron liberado do plastoquinol é passado para
carregadores de alto potencial para o transporte de elétrons (proteína RfeS de Rieske e o citocromo
f), chegando então a plastocianina (PC). O outro elétron é desviado dessa rota normal (transporte
acíclico), sendo passado o elétron para dois tipos de citocromos b (b1 e bh), chegando, finalmente ao
sítio de ligação da quinona PQ, denominado na figura como Qn, no qual este reduz uma molécula de
quinona para formar uma plastosemiquinona (PQ.). Durante a oxidação de uma segunda molécula
de plastoquinol (B), a rota de transferência de elétrons é idêntica exceto que o segundo elétron
reduz a plastosemiquinona no sítio Q n a uma molécula de plastoquinol totalmente reduzida (PQ. .),
a qual então captura dois prótons do estroma, estando então novamente apta para doar elétrons para
o mesmo complexo, transportando também prótons para o lúmem.

Fig. 16. Esquema de um ciclo Q, o qual pode ser dividio em duas fases: (A) desvio de um elétron de uma
primeira plastoquinona doadora, e (B) desvio de outro elétron de uma segunda molécula doadora de plastoquinona.

Potencialmente o ciclo Q poderia aumentar o rendimento quântico das reações

fotossintéticas, ou seja, mais prótons seriam transportados para um mesmo número de elétrons
gerados da hidrólise da água, às custas de uma redução na taxa de síntese de NADPH. Seu nível de
ocorrência é bem menor que o transporte acíclico, estando ainda indefinida a sua regulação e
significância.

No segundo tipo de transporte cíclico, denominado de fotofosforilação cíclica, a ferredoxina

não cede os seus elétrons para o NADP+ através da enzima FNR. Ao invés disso, a ferredoxina
desloca-se até o fotosistema II e cede então os seus elétrons para a enzima oxidoredutase da
ferredoxina-plastoquinona. Essa enzima só está presente no FSII, e pega os elétrons da feredoxina e os
transfere a plastoquinona. Essa então abandona o FSII, capturando dois prótons do estroma, e após
“aportar” no complexo citocromo b6f, descarrega os seus elétrons nesse complexo, fazendo com
que dois prótons sejam transportados para cada dois elétrons recebidos através da ferredoxina. Esse
transporte garante a formação de um grandiente protônico, o que permite a síntese de ATP no
tilacóide, apesar de não ser produzido NADPH.

Fig. 17: Fototransporte cíclico de elétrons. A enzima Fed-PQ oxidoredutase é localizada no fotossistema II,
próxima ao sítio de ligação da plastoquinona

A significância desse ciclo sob condições fisiológicas normais ainda é assunto controverso.
Contudo há evidências inequívocas de que a fotofosforilação cíclica deve operar a altas taxas nos
cloroplastos das células da bainha de certas plantas C4. A função desse transporte cíclico é
provavelmente ajustar as taxas de síntese de ATP e NADPH de acordo com a demanda.

6) Herbicidas que Afetam as Reações fotoquímicas:

Um grande número de herbicidas afetam as reações fotoquímicas e estão
disponíveis comercialmente. Muitos desses compostos apresentam semelhança estrutural com
moléculas transportadoras de elétrons dos fotossistemas, como mostra a Fig. 16.
Fig 18. Classes de herbicidas que afetam a fase fotoquímica da fotossíntese. A) Estrutura da Plastoquinona B. B) Classe
1: herbicidas que afetam o transporte entre a QA e PQ. C) Classe 2: afetam o transporte de elétrons entre a PB e
Citocromo b6/f. D) Classe 3: afetam o transporte de elétrons entre FS1 e FD

Esses herbicidas apresentam como mecanismo de ação, a sua ligação em um dos

componentes dos fotossistemas, impedindo então o normal transporte dos elétrons, como
esquematiza a figura 19.

Fig. 19: Esquema do modo de ação dos herbicidas que afetam as reações fotoquímicas

Esses herbicidas podem apresentar certa seletividade, como por exemplo, as atrazinas, as
quais não afetam plantas como o milho e o sorgo. A razão para esta seletividade baseia-se em
pequenas diferenças na seqüência de aminoácidos da proteína D1, na região peptídica a qual liga a
quinona B e a atrazina. Nessas plantas a quinona B liga-se normalmente, mas não o herbicida. O
uso contínuo por várias décadas desse herbicida no cultivo de milho no cinturão do milho nos EUA
(Corn Belt) tem levado a uma pressão evolutiva que resultou na mutação em alguns aminoácidos
das proteínas D1 em várias plantas daninhas, as quais tornaram-se resistentes a esse herbicida..
Com exceção do paraquat, a maioria dos herbicidas afeta o transporte entre o FSII e o
complexo citocromo b6/f. O paraquat retira os elétrons do fotossistema I, competindo com a
ferredoxina. O efeito herbicida do paraquat se deve a este levar a rápida produção de superóxidos. A
produção desse radical é tão rápida, que esse herbicida é utilizado inclusive como dessecante, de
forma, por exemplo, a antecipar a colheita de alguns produtos agrícolas.

Outras informações podem ser obtidas junto aos sítios eletrônicos das companhias
,
fabricantes desses agrotóxicos. DuPont, Dow Chemicals, Ciba Geigy, BASF, etc.

7) Ciclo de Calvin (redução do CO2)

A segunda fase da fotossíntese é a fase bioquímica, composta pelo Ciclo de Calvin, o qual
pode ser subdividido em quatro fases: 1) fixação do C02 pela Rubisco , gerando duas moléculas de
ácido 3-fosfoglicérico a partir de uma molécula de ribulose 1,5-fosfato (Fig. 16) ; 2) redução,
envolvendo duas reações químicas, na qual as duas moléculas de ácido 3-fosfoglicérico serão
transformados em duas trioses (gliceraldeído 3-fosfato) (Fig. 20) e, 3) regeneração, na qual serão
envolvidas 5 moléculas de trioses para regenerar três moléculas de ribulose 1,5-bifosfato (RuBp)
para a continuação desse ciclo bioquímico (Fig. 18) e 4) biossíntese de compostos.

Fig. 20. Primeira fase do Ciclo de Calvin. A enzima Rubisco (Carboxilase da ribulose 1,5 bifosfato), enzima mais
abundante na natureza, pode promover dois tipos de reação: a reação carboxilativa, normalmente predominante, e a
reação oxigenásica.

A enzima Rubisco é uma proteína abundante nas folhas (quase 50% da proteína solúvel total
das folhas) e é a enzima mais abundante do planeta, e é composta de 8 subunidades grandes e 8
subunidades pequenas. O gene que codifica as subunidades grandes está localizado no DNA do
cloroplasto, entanto que o gene que codifica as subunidades pequenas está localizado no DNA do
núcleo. A Rubisco, além de atuar como uma carboxilase, também apresenta atividade oxigenásica.
Quando atua como oxigenase, o aceptor ribulose 1,5-bifosfato se combina com o oxigênio para
produzir um PGA e uma molécula de fosfoglicolato. Esse processo é a primeira de uma reação de
uma rota metabólica denominada de fotorrespiração.

Fig. 21. Esquema das reações componentes da fase de redução do ciclo de Calvin. É nessa fase que a energia gerada na
fase fotoquímica é utilizada, produzindo moléculas ricas em energia (trioses: 3-fosfogliceraldeído).

Quando se considera a riqueza relativa de O2 na atmosfera terrestre (21% de O2 contra

somente 0,036% de C02), pode-se primeiramente pensar que a reação oxigenásica predomina.
Contudo a afinidade da Rubisco pelo C02 é cerca de 100 vezes maior do que pelo oxigênio, razão
pela qual a reação de carboxilação predomina sobre a de oxigenação
Para que ocorra uma fase de regeneração, serão necessárias cinco moléculas de trioses, as
quais serão sucessivamente condensadas em moléculas intermediárias, de número variável de
carbonos, até que 3 moléculas de (RuBp):
Fig. 22: Esquema mostrando as reações da fase de regeneração do Ciclo de Calvin. Somente uma entre seis trioses
formadas estará disponível para a célula utilizar em suas reações biossintéticas.

Considerando a ocorrência de 3 reações de carboxilação, 6 reduções serão necessárias,

gerando então 6 trioses (fig. 23). Dessas 6 trioses geradas, 5 serão utilizadas na fase da regeneração
do Ciclo de Calvin, enquanto que uma triose poderá então ser utilizada para a síntese de sacarose e
de amido (ver fig. 18 e 19). Essa “sexta” molécula de triose (a qual contém 3 carbonos), representa
então o produto líquido da fixação de três moléculas de CO2.

Fig. 23. Esquema simplificado do Ciclo de Calvin. Observe que maior nível de energia é gasta na fase de redução.

8) Regulação do Ciclo de Calvin

A regulação do ciclo de Calvin tem como função evitar a formação de ciclos fúteis, como
por exemplo, a síntese e degradação da frutose-1,6-bifosfato, que resultaria em um gasto adicional
de ATP. Uma outra função é a manutenção de concentrações adequadas de intermediários, como
eritrose e sedoheptulose, que devem ser suficientes para garantir a regeneração da Ribulose -1,5-
bifosfato. O esquema abaixo mostra detalhes da ativação da rubisco.

Fig. 24: Esquema da regulaçao da Rubisco pela enzima Ativase da Rubisco e pela carboimilação associada aos sinais
fotoquímicos.
 Durante a noite a RuBP se encontra em alta concentração dentro do cloroplasto, e liga-se a
um sítio ativo da Rubisco (sítio esse diferente do sítio catalítico da enzima). A ligação da RuBP
nesse sítio evita a ativação da Rubisco pelo processo de carboimilação. O papel da enzima Ativase
da Rubisco, é retirar essa molécula RuBP desse sítio alósterico, permitindo então que a
carboimilação prossiga. As reações de carboimilação só ocorrem durante o dia, e são uma forma
pelo qual sinais da ocorrência de níveis significantes das reações fotoquímicas regulam a ativação
do Ciclo de Calvin. Assim, com alto nível das rações fotoquímicas, um alto nível de transporte
ocorrerá de prótons do estroma para o lúmem do tilacóide. Isso levara a redução da concentração de
prótons no estroma, e a conseqüente primeira reação da carboimilação, aonde o grupo amino do
resíduo aminoácido da serina da Rubisco é desprotonado. Paralela ao intenso transporte de prótons
para dentro do lúmem, um contra transporte de Mg++ ocorre do lúmem para o estroma, duplicando a
concentração de magnésio no estroma. Esse aumento da concentração de íons magnésio permite
então a carboxilação do grupo amino daquele resído de serina desprotonado, ligando-se o magnésio
a esse novo carbono introduzido. Note que a carboimilação ocorre em um aminoácido diferente
daqueles do sítio ativo da Rubisco.
Com a ocorrência das reações fotoquímicas um alto nível de ferredoxina reduzida é
encontrado no estroma, permitindo a transferência de seus elétrons para a tioredoxina, e finalmente,
para as enzimas alvo, as quais após sua redução, podem ser ativadas ou inativadas. Entre as enzimas
ativadas por esse sistema, encontra-se a ativase da rubisco, a fosfatase da frutose 1,6-bifosfato, a
fosfatase da sedoheptulose-1,7-bifosfato, a fosforibulocinase, e a desidrogenase do 3-GAP. Assim,
essas enzimas também só estarão ativadas durante o dia. A função dessa ativação das enzimas
somente durante o dia, tem como objetivo evitar a ocorrência de ciclos fúteis de síntese e
degradação de alguns intermediários do Ciclo de Calvin (p.ex., síntese e degradação da F1,6BP, o
que levaria ao desperdício de ATP).

Fig. 25: Sistema ferredoxina-tioredoxina de regulação da atividade das enzimas do Ciclo de Calvin.
 A ação em conjunto desses diferentes mecanismos de regulação do Ciclo de Calvin pela luz
resultam na atividade de várias enzimas, somente durante o período diurno. Assim não ocorre
carboxilação, mas também não ocorre redução nem regeneração, preservando-se a noite razoável
quantidade de intermediários desse ciclo, de forma que ele, quando do início de um novo período
diurno, possa rapidamente ocorrer em altos níveis.