As técnicas analíticas são usadas para identificar os
componentes que podem estar presentes em um
material e determinar as quantidades exatas dos
componentes identificados.
A sequência analítica:
 Definição do problema;
 Planejamento;
o Número de amostras;
o Faixa de concentração do analito;
o Natureza da matriz da amostra;
o Escolha do método analítico.
 Amostragem;
 Pré-tratamento das amostras;
 Determinação da concentração;
o Calibração;
o QA/QC;
o CRMs.
 Avaliação dos resultados.
Processo analítico: constituído por uma série de
operações analíticas, desde a coleta da amostra até
a obtenção do resultado final.
Técnica analítica: baseada em um princípio
científico; faz uso de um instrumento para se obter
a informação desejada.
Método analítico: aplicação de uma determinada
técnica analítica.
Procedimento analítico: série de instruções que
devem ser seguidas para a implementação de um
método analítico, visando a determinação de um
ou mais analito.
PRÉ-TRATAMENTO DE AMOSTRAS
Independentemente de sua natureza, cada
amostra deve ser submetida a um tratamento
especial para dissolver ou extrair o analito.
(para evitar erros, contaminação, perdas, etc)
Fontes de contaminação mais comuns:
 Atmosfera/ambiente em que se realizam o
preparo e a análise das amostras;
 Pureza (e quantidade) dos reagentes
empregados;
 Materiais utilizados que entram em
contato direto com a amostra: frascos de
digestão/extração, tubos de centrífuga,
espátulas, béqueres, etc.
 A técnica e a habilidade do analista em
conduzir o preparo e a análise das
amostras.
Controle de qualidade analítica
 Destilação à sub-ebulição: Evaporação
do ácido mediante aquecimento por
incidência de radiação infravermelha
(calor); não ocorre ebulição do
reagente; evita o transporte do
contaminante.
 Capela de fluxo laminar para
manipulação de amostras e soluções
padrão.
 Sistema de introdução de amostras
protegido.
A ETAPA DE PREPARO DE AMOSTRAS É A MAIS
TRABALHOSA E A MAIS SUSCETÍVEL A ERROS
EM UMA ANÁLISE QUÍMICA.
Etapas do preparo: secagem (em estufa ou
liofilizador), moagem, peneiramento,
centrifugação, filtração, digestão.
ESPECTROFOTOMETRIA NO ULTRAVIOLETA-
VISÍVEL (UV-Vis)
Consiste em um campo elétrico que se alterna
muitas vezes por unidade de tempo e se
propaga no espaço como um “trem” de ondas.
Associado ao campo elétrico existe um campo
magnético, também oscilante, colocado em
ângulo reto e de mesmo comprimento.
Comprimento de onda (ʎ): é a distância entre
duas cristas de ondas adjacentes; é dado em
unidade de comprimento.
Espectro eletromagnético: é o arranjo
ordenado das radiações conforme os seus
comprimentos de onda.
Espectroscopia: técnicas baseadas na emissão,
absorção e espalhamento de radiação
eletromagnética (luz).
A espectrofotometria fundamenta-se na
medida de absorção de radiação
eletromagnética por moléculas em solução.
Fonte
Requisitos gerais: emitir radiação com
intensidade suficiente na região desejada, de
modo reprodutível e de fácil controle. Para a
região do visível – fonte incandescente, para a
região do UV – lâmpada de descarga de gases.
A intensidade de emissão depende do ʎ
escolhido.
Monocromador
Função: selecionar uma raia, onde a absorção
será medida, das demais linhas emitidas pela
fonte. Ângulo de rotação da rede = seleção do
ʎ da radiação.
Componentes: fenda de entrada e de saída,
espelhos e prisma/grade de difração.
Detectores de radiação:
Função: converter a energia radiante em sinal
elétrico.
Amplificadores
Fototubo (emissão de elétrons provocada pelo
fluxo de fótons) ou fotomultiplicadora (sinal
multiplicado pela presença de dinodos).
Lei de Lambert: “Quando a luz monocromática
passa através de um meio transparente, a taxa
de decréscimo da intensidade com a espessura
do meio é proporcional à intensidade da luz”.
Lei de Beer: “A intensidade do feixe de luz
monocromática decresce exponencialmente à
medida que a concentração da substância
absorvente aumenta aritmeticamente”.
log Io/I = abc
Transmitância (T): é a fração da radiação
incidente que é transmitida pela solução (o
que o equipamento vê, “que a amostra não
quis”).
Absorvância (A): é o logaritmo decimal da
razão entre a potência radiante incidente e a
transmitida.
Absortividade molar (Ꜫ): é a absorvância
característica da substância absorvente,
quando sua concentração é 1 mol/L, utilizando
cubeta de 1cm. A magnitude depende do ʎ da
radiação incidente.
Absortividade específica (a): idem ao anterior,
porém em 1g/L (n/a: constante para cada
composto).
Espectrofotômetro: instrumento utilizado
para determinações realizadas na região do
UV-Vis, que acopla um fotômetro e um
espectrômetro.
Fotômetro: instrumento que fornece a
relação entre o poder radiante de dois feixes
eletromagnéticos.
Espectrômetro: instrumento
composto por uma fenda de entrada, um
dispositivo de dispersão e uma ou mais fendas
de saída, onde medidas de ʎ podem ser feitas.
ESPECTROMETRIA DE MASSA (COM FONTE
DE PLASMA INDUTIVAMENTE ACOPLADO)
(ICP-MS).
Fundamenta-se na determinação de
elementos (isótopos, razões isotópicas)
utilizando a espectrometria de massa (MS) de
íons produzidos através de um plasma
indutivamente acoplado (ICP).
Espectrômetro de massa: é um instrumento
que separa, rapidamente, íons em movimento
com base em suas razões massa/carga (m/z).
Fonte de Energia
Função: promover a dissociação dos
compostos presentes na amostra formando
íons livres (necessidade de energia cinética alta
– altas temperaturas).
Plasma: gás a temperatura elevada contendo
moléculas, átomos, íons e elétrons; é condutor
elétrico; é afetado pelo campo magnético.
Tocha: constituída de três tubos concêntricos;
sua montagem é sempre horizontal.
Interface: faz a ligação entre a fonte de íons em
pressão atmosférica com a região de alto vácuo
do separador de massa (quadrupolo).
Constituída por 2 cones metálicos (Ni ou Pt);
cone amostra > cone escuma. É resfriada e
mantida sob vácuo por uma bomba rotativa.
Sistema de vácuo: geralmente são mais
comuns sistemas com três câmaras.
1ª: interface – situada entre os cones.
2ª: óptica de íons.
3ª: analisador de massa e detector.
Lentes iônicas: feitas por um conjunto de
“lentes de extração” posicionadas
imediatamente após a interface formando um
feixe mássico. Otimizam e direcionam o feixe
até focalização na entrada do quadrupolo.
Filtro/analisador de massa
Quadrupolo
Composto por 4 barras metálicas cilíndricas
hiperbólicas equidistantes montadas em
suporte cerâmico.
Características: baixa resolução; sensibilidade
relativamente baixa; baixo custo, robusto e de
fácil operação; varredura rápida; facilmente
acoplados; tolerantes a pressões
relativamente altas.
Tempo de voo
Baseia-se na simples ideia de que as
velocidades de dois íons, criados no mesmo
instante, com a mesma energia cinética,
variarão conforme as massas dos íons (o mais
leve chegará primeiro ao detector).
Alta resolução
Sinal com 2 casas decimais (na maioria).
Triplo quadrupolo
“Meio termo” entre o quadrupolo simples e o
de alta resolução.
1º: funciona igual ao simples.
2º: não ocorre separação de massa, só adição
de gás para reagir com alguma das espécies
(analito ou interferente).
3º: dependendo de quem reagir na etapa
anterior, mudar ou manter a m/z.
Detector
Multiplicador de elétrons: o detector coleta os
íons, produzindo uma corrente elétrica
proporcional à quantidade destes.
Introdução do aerossol no plasma: o tempo de
permanência do analito no plasma é muito curto
(ordem de ms), por isso, o aerossol deve ser
introduzido de forma adequada.
Nebulização → transformação da solução em um
aerossol.
Introdução de amostras sólidas: ablação a laser.
Considerações sobre introdução de amostras: o
tratamento da amostra é muito importante para não
danificar os orifícios dos cones, prolongando a vida útil
e sensibilidade.
 Sólidos dissolvidos no máx. 0,2%m/v;
 Máximo de 5% (v/v) de HNO3;
 Máximo de 5% (v/v) de HCl (Cl –
interferências);
 Máximo de 1%(m/v) H3PO4, H2SO4 ou HF
(sistema para introdução de amostra
compatível).
Imprevistos: desvitrificação, entupimento, depósito de
fuligem (alto teor de matéria orgânica), depósito de
sais (alto teor de sólidos dissolvidos/alta salinidade),
precipitação da amostra.
CALIBRAÇÃO
Semi-quantitativa: baseada na calibração do
instrumento feita a partir de uma única solução de
calibração. O software usa a calibração da massa para
estimar as intensidades de cada isótopo a partir do
elemento presente na solução de calibração. Permite a
determinação simultânea de cerca de 80 elementos.
Quantitativa: construção de curvas de calibração a
partir de soluções padrão com diferentes
concentrações. Calibração externa multielementar:
recomendável para matrizes mais simples –
assemelhamento de matriz (matrix matching).
Padrão interno: corrige variações nas medidas
causadas por flutuações no sistema de introdução de
amostra (variações na nebulização) e instabilidade do
plasma.
Adição de analito (adição de padrão): utilizada para
matrizes mais complexas.
Metodologia analítica:
 Selecionar os isótopos a serem determinados;
 Fixar os parâmetros instrumentais;
o Devem ser otimizados de forma a se
obter melhor relação entre sinais dos
 analito, menores taxas de formação de  Calcular a intensidade da
óxidos e de íons divalentes, etc. interferência através da
 Preparar as soluções de calibração (soluções intensidade de outros
padrão e tratamento de amostras); isótopos.
o Utilizar padrões rastreáveis e de  Subtrair a interferência.
pureza elevada;  Interferências moleculares e/ou poliatômicas:
o Métodos de digestão, extração, ArO e Fe - 56; ArC e Cr - 52; ClO e V - 51; ArNa
solubilização. e Cu - 63; ArCl e As - 75.
 Parâmetros instrumentais: o ICP-MS de alta resolução (HR-ICP-MS).
o Potência da radiofrequência aplicada ao  Alto custo;
plasma;  Difícil operação;
o Vazão de argônio (plasma, auxiliar e do  Cuidados especiais com
nebulizador); limpeza do ambiente.
o Escolha adequada da distância o Célula de colisão/reação.
plasma/cone de amostra;  Eficiente na redução de
o Parâmetros de medição: interferências poliatômicas.
 Tempo de residência em cada  Converte íons interferentes
medida; em novas espécies
 Número de varreduras por poliatômicas – que não
medição; causam interferência.
 Número de replicatas;  Converte o analito em uma
 Número de pontos medidos por nova espécie poliatômica com
sinal; um novo valor para a razão
 Tempo de espera para início da massa/carga (m/z) que não
medição. sofre interferência.

O valor ideal para cada parâmetro é determinado

experimentalmente durante a otimização do método.
As interferências são dependentes da matriz da
amostra.
Interferências não espectrais: interferências que não
dependem da resolução de massa do instrumento.
 Supressão de sinal em função de componentes
da matriz da amostra;
 Problemas de transporte na introdução da
amostra:
o Viscosidade;
o Tensão superficial.
Como tratá-las? Sempre que possível utilizar amostras
diluídas (TDS<0,2%); utilizar a técnica de “adição de
analito”; considerar a possibilidade de remoção da
matriz por métodos de separação adequados (SPE,
troca iônica, extração em ponto nuvem, etc).
Interferências espectrais: interferências que
dependem da resolução da massa do instrumento.
Problemas de transporte na introdução da amostra
(viscosidade e tensão superficial) e instabilidade do
plasma → utilização de padrões internos.
Geralmente trabalha-se com seis padrões internos
cobrindo toda a faixa de massa: Sc, Ga, Ge, Rh, In, Tl,
Bi.
Causas da “supressão” de sinais em ICP-MS:
 Alteração da temperatura (energia) do plasma
pela presença da matriz;
 Competição na ionização dos analito (Ex: Na
5,14eV > Se 9,75eV).
 Efeitos de cargas espaciais perto das lentes
iônicas;
 Efeito da discriminação de massa.
Funcionamento de uma DRC (Fe 56): entrada de gás
reativo (NH3) que reage/colide separando o ArO,
liberando assim a passagem do Fe sem o interferente.
Proibida a reprodução e divulgação do mesmo.

 Interferências isobáricas: Ni e Fe - 58; Ca e Ti -

48.
o Correção através de equações
matemáticas.