Estudo P1 analise instrumental

As técnicas analíticas são usadas para identificar e/ou quantificar os componentes que
podem estar presentes em um material.
Especificidade: capacidade de resposta somente ao analito.
Seletividade: como os concomitantes interferem no sinal do analito.
Sempre haverá necessidade de preparação da amostra para torná-la disponível
analiticamente: Tratamento da amostra.
A etapa de tratamento da amostra é a mais crítica, em geral é nessa etapa que se
cometem mais erros e se gasta mais tempo. É também a etapa de maior custo. Buscar
a mínima manipulação experimental possível para evitar possíveis contaminações na
amostra.
Materiais em suspensão podem interferir em determinações espectrofotométricas e
turbidimétricas, por isso deve haver filtração e centrifugação
O armazenamento serve para garantir a integridade do material até o final da análise,
devendo ser conservado ao abrigo de luz, umidade e contaminação.

Espectrofotometria no UV-Vis
Se baseia em medidas de absorção da radiação eletromagnética, nas regiões UV-VIS do
espectro. Interação da matéria com a energia radiante
A luz possui dualidade onda-partícula, é tratada como onda quando se considera a
propagação e absorção de energia, mas como partícula (fótons) quando se analisam as
interações individuais com a amostra. A radiação eletromagnética é constituída por
partículas discretas (fótons) que funcionam como pacotes de energia.
E= constante de plank (h).(velocidade de propagação/comprimento de onda).
Átomos, ions e moléculas podem existir somente em certos estados, ou seja, em
quantidades definidas de energia.
Transições eletrônicas de elétrons mais externos → espectrofotometria no uv-vis
Cada espécie química possui um espectro de absorção característico, por isso, este
pode ser utilizado para auxiliar na identificação de substancias moleculares ou átomos.
Espectro atômico → linhas finas (rais)
Espectro molecular → sobreposição de raias formando bandas.
Vantagens: boa sensibilidade, baixo custo, fácil operação e equipamentos robustos.
Compostos orgânicos e inorgânicos
É necessária a analise de uma prova em branco e seu resultado deve ser debitado das
amostras. Qual o objetivo da prova em branco? Eliminar o valor acrescido ao resultado
de cada amostra devido a presença de interferentes ou contaminantes oriundos dos
reagentes utilizados.
Concentração é diretamente proporcional a absorbância e inversamente proporcional
ao logaritmo da transmitância.
A lei de Lambert beer possui limitações, quais?
Solução precisa ser diluída, radiação monocromática, meio homogêneo e estável. Em
soluções concentradas ocorre um desvio da linearidade entre absorbância e
concentração.
Para que uma molécula absorva no UV-VIS ela precisa ter grupos cromóforos (grupos
funcionais orgânicos insaturados), mas uma única molécula pode ter vários grupos
cromóforos, que podem resultar em diferentes bandas de absorção para uma mesma
molécula.
Moléculas com mesmo grupo cromóforo e sem heteroátomos terão a mesma feição
espectral e mostrarão quase o mesmo comprimento de onda.
Clorofórmio não pode ser um solvente pois absorve na região visível que pode
mascarar ou intervir nas medidas de absorção, etanol 95%, hexano e água são os
melhores solventes.

Sistema fechado para evitar interferência com a luz ambiente.

Fonte de radiação: emitir radiação com intensidade suficiente na região desejada
Seletor de comprimento de onda: selecionam o comprimento de onda de interesse
para análise. Podem ser filtros ou monocromadores
Os filtros selecionam uma banda estreita do comprimento de onda desejado e os
monocromadores permitem fazer uma varredura espectral da amostra.
2 tipos de filtro: absorção e interferência
Absorção é para bandas largas (mínimo 50nm largura), usadas no visível e baixo custo
Interferência é para bandas finas (no máximo 10nm largura), disponível no uv-vis
O monocromador seleciona apenas 1 comprimento de onda.
Quanto mais estreita a fenda, melhor a resolução do espectro
Detectores: convertem a energia radiante em sinais elétrico. Precisam ter resposta
constante e instantânea, alta sensibilidade, alta relação sinal/ruído.
Os mais comuns são fototubos e fotomultiplicadores (permite detectação mesmo
quando a incidência de luz é baixa).
Analise por injeção em fluxo (FIA): injeção rápida da amostra em um fluxo continuo de
uma solução carreadora. Vantagens: mínima manipulação da amostra, pequeno
consumo de amostras e reagentes, grande velocidade de análise, elevada sensibilidade,
exatidão e precisão.
A maior parte dos solventes é agua, mas quando a substancia é apolar e precisa ser
diluída em compostos orgânicas, nunca utilizar substancias que contenham ligações
duplas ou triplas.
Espectroscopia no IV
Infravermelho próximo, médio e longiquio.
Ligado a transições vibracionais e rotacionais
Fornece evidencias da presença de vários grupos funcionais na estrutura devido a
interação das moléculas ou átomos com a radiação eletromagnética em um processo
de vibração molecular.
Vantagens: facilidade de operação, não destrutivo, baixo custo, amostras solidas
liquidas e gasosas.
Para absorver no IV a molécula precisa sofrer variação no seu momento dipolo durante
o movimento rotacional ou vibracional. Por isso compostos homonucleares não
absorvem no IV.
As deformações podem ser do tipo axial ou angular
Como aumentar a frequencia vibracional? Aumentando a forca de ligação e diminuindo
a massa reduzida do sistema.

Ligações são mais fortes na ordem sp>sp2>sp3

Dificilmente da para determinar a estrutura de uma substancia apenas por IV. Por que?
Vibrações podem ser influenciadas por outras causando acoplamento de sinais,
deslocamento de sinal esperado.
Diagrama de blocos de um FTIR

Interferograma é um gráfico de intensidade oscilatória da radiação que é detectada ao

final da analise e que por transformada de Fourier se obtem o espectro de IV.
Detector: piroelétricos (gera temporariamente potencial elétrico quando aquecido,
apenas alguns materiais), fotocondutivos (é o mais utilizado, aproveitam a variação da
condutividade do material quando ocorre na incidência de radiação.) e transdutores
térmicos (efeito do aquecimento da radiação, tem a menor sensibilidade).
Vantagens: técnica não destrutiva, muito rápida, alta resolução espectral e alta
sensibilidade.
Amostras em solução: requer concentração alta devido a caminhos opticos curtos, a
maioria dos solventes absorve na região IV.
O espectro de um gás pode ser obtido ao permitir que a amostra se expanda em uma
célula, também chamada de cuvette.
Principais usos: analises qualitativas, monitoramento de reações, elucidação estrutural,
é necessário técnicas complementares.
Espectrometria de massas
Ferramenta importante na identificação de compostos desconhecidos. O principio
básico é gerar íons em fase gasosa de compostos orgânicos ou inorgânicos, separar
esses ions pela sua razão massa/carga e detectá-los qualitativa e quantitativamente.
Fornece informações sobre o peso molecular e características estruturais da amostra.
Fornece informações sobre a composição elementar da amostra, estrutura molecular,
composição qualitativa e quantitativa e proporções isotópicas.
Abundancia relativa x razão massa carga gera picos.
São espectros simples, normalmente únicos e de fácil interpretação.
Alta sensibilidade com quantidade mínimas de amostra (10^-12g), técnica qualitativa e
quantitativa, possibilidade de acoplamentos com a cromatográfica, porém tem alto
custo de instrumentação e é passível de algumas interferências.
É constituído de 3 partes principais: sistema de fonte de ions, analisador de massa e
detector no vácuo. O vácuo tem por objetivo manter a pressão baixa, de modo que a
frequencia das colisões seja baixa, preservando os íons e elétrons livres.
Fonte de ionização: impacto de elétrons (moléculas aquecidas a altas temperaturas
para produzirem um vapor molecular, possui energia para sofrer fragmentação) e
ionização química (branda)(aplicado para espécies voláteis e termicamente estáveis,
feixe acelerado bombardeia a molécula causando a ionização). Como escolher o
método de ionização? De acordo com a volatilidade da amostra, estabilidade térmica,
amostra pura ou mistura, sensibilidade e grau de fragmentação desejado.
O bom da fragmentação (impacto de elétrons) é que da um espectro com mais
informações e isso impede a identificação ambígua de picos, porém se perder o pico
não consegue mais informações sobre a massa molecular da amostra.
Analisadores de massa: contínuos (quadrupolos e setor magnético), pulsados (TOF).
Quadrupolos – baixa resolução
Tof (opera de modo pulsado), tem como desvantagem requerimento de técnica de
ionização pulsada – intermediaria resolução
Orbitrap – elevada resolução
Detector: fotomultiplicador, multiplicador de elétrons MCP
O detector depende do tipo de analisador: fotomultiplicador e multiplicador de
elétrons → quadrupolos e setor magnético
MCP → TOF
Possibilidades de acoplamento:
Espectrômetro de massas a outro espectrômetro de massas: é algo muito especifico,
fragmenta ainda mais a amostra numa célula de colisão com adição de gás. Esse íon
que entra na célula é chamado de ion percursor ou íon pai. Usa quando já se tem
informações da amostra. É utilizado principalmente para trabalhar com biomoléculas.
Vantagens: fragmentações controladas, mapeamento de caminhos de fragmentações,
detecção de molecular muito complexas.
Espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado (ICP-MS): utiliza um
plasma de argônio (gas altamente energizado) como fonte de excitação para ionizar,
depois ions são transferidos ao espectrômetro de massa. São transportados ao
detector sob a acao de campos elétricos e magnéticos. Altamente sensível (1ppt)
(qualquer coisa é fonte de contaminação, vidrarias especificas, ambiente controlado e
climatizado), consegue terminar de forma simultânea e sequencial a maioria dos
elementos da tabela periódica.
Não da pra identificar N,O,C,H pois estão presentes no ar, elementos muito radioativos
pois tem tempo de vida curto, argônio pois é o do plasma, cl, br e I pois tem alto
potencial de ionização.
Componentes: sistema de introdução de amostras, plasma de argônio (fonte de ions),
interface (compartimento que ameniza condições muito extremas entre os
equipamentos, plasma é mto quente e pressão ambiente, o analisador de massa é
baixa pressão e temperatura ambiente), analisador de massa, detector.
Interface é composto do cone skimmer, cone de amostragem e lentes iônicas
Precisa trabalhar com amostras diluídas pois podem cristalizar, não podem ter sólidos
suspensos pois podem entupir o capilares, cuidado se tem acido fluorídrico pois
podem corroer.
Plasma não é eficiente na ionização de particular maiores, so entram as menores, as
maiores são drenadas e descartadas.
Alta velocidade do gás dispersa a solução como um spray (ou nevoa de gotículas de
diferentes tamanhos).
Gotículas sofrem dessolvatacoa, vaporização, atomização e ionização
Não da pra analisar alguns compostos com energia de ionização próxima ou maiores ao
do argônio, como flúor e enxofre
ICP-MS baixa resolução: quadrupolos como analisador de massa
ICP-MS alta resolução: detector de dupla focalização (setor magnético e setor
eletroestático). Determinações analíticas que envolvem medidas de razoes isotópicas.
Analise direta de sólidos: menor consumo de tempo e reagentes, menor possibilidade
de contaminação porém tem uso de acoplamento de alto custo, partículas com
diferentes tamanhos.
Interferências: trabalhar com equipamentos de alta resolução
Quais interferências: isobáricas (ions que apresentam a mesma razão m/z), ions que
formam carga dupla no plasma devido as condições de ionização do plasma,
interferências espectrais
Pontos críticos do equipamento: plasma e interface.