Proteínas globulares

Faculdade de Ciências da Saúde – FCS

Disciplina de Bioquímica

Prof Nelson Farias

 Proteínas globulares

Proteínas globulares
 Enzimas;

 Proteínas transportadoras

 Proteínas motoras

 Proteínas reguladoras

 Imunoglobulinas
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Hemeproteínas
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Hemeproteínas
 Grupo especializado de proteínas, que contém o grupo HEME
como grupo prostético firmemente ligado.

 Funções:

– Citocromo: carreador de elétrons;

– Catalase: catalisa a quebra do H2O2;

– Hemoglobina e Mioglobina: ligar, de forma reversível, o O2

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Estrutura do HEME
 Complexo entre a protoporfirina IX e o íon ferroso (Fe2+);
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Estrutura do HEME
 Ligações de ligantes com o átomo ferroso na oxi-hemoglobina
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Vista lateral do HEME

 COHb
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Formação do HEME

 Síntese anormal de
Protoporfirina =
PORFIRIAS

 Metabolismo anormal
de ferro = alteração na
síntese de hemoglobina.

Síntese da molécula de porfirina e do

grupo heme após a incorporação do
ferro, e a relação das deficiências
enzimáticas com doenças que causam
as porfírias.
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Porfirias
 Primárias ou herdadas

– Formas neurológicas
e/ou psiquiátricas

– Formas cutâneas

 Secundárias ou adquiridas

(defeitos metabólicos)

- Álcool

- Dieta

- Deficiência de ferro
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Porfirias
Mioglobina
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Estrutura da Mioglobina
 O HEME está encaixado em uma
concavidade hidrofóbica;

 Duas cadeias laterais hidrofóbicas

auxiliam na manutenção da posição do
HEME;

 O sistema de anel hetrocíclico do HEME é

um derivado porfirínico, com quatro
grupos pirrólicos
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Estrutura da Mioglobina

 O átomo de ferrro (Fe2+) quando exposto ao

O2 é oxidado de maneira irreversível a (Fe3+), forma que não liga O2;

 A porção protéica da mioglobina impede essa oxidação e torna

possível a ligação do O2 ao HEME;

 A oxigenação leva a mudança de coloração da molécula de

mioglobina.
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Função da Mioglobina

 Reservatório e carreador de O2 nos mm;

 Principal função fisiológica – facilitar o

transporte de oxigênio nos músculos;

 Aumenta a solubilidade efetiva de oxigênio nos mm, atuando

como carregador/descarregador molecular para aumentar a

velocidade de difusão do O2.

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Função da Mioglobina

 Importante reservatório de O2 nos

mamíferos aquáticos;

– Mioglobina 10x mais concentrada que nos mamíferos

terrestres.
Hemoglobina
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Hemoglobina

 Função fisiologicamente específica – o transporte de

Oxigênio.

 Constitui um sistema sofisticado de transporte que fornece

uma quantidade adequada de O2 aos tecidos.

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Transporte iso-hídrico de CO2 como HCO3-

CO2 + H2O ↔ H2CO3

H2CO3 ↔ HCO3 + H+
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Transporte de CO2 como carbamino-hemoglobina

HbNH2 + CO2 ↔ HbNHCO2- + H+

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Estrutura da Hemoglobina

 Estrutura elucidada por Max Perutz em 1968, através de

cristalografia de proteína

por difração de raios X. β2 β1

 Molécula tetramérica,

com estrutura quaternária

α2β2, (dímero αβ);

 4 grupamentos HEME;

α2 α1
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Estrutura da Hemoglobina

 Forma T (Tensa) = Desoxihemoglobina

– Os dois dímeros (αβ) interagem

por meio de ligações iônicas e pontes

Hidrogênio, restringindo o movimento da cadeia polipeptídica.

É A FORMA DE BAIXA AFINIDADE PELO OXIGÊNIO

 Forma R (relaxada) = Oxihemoglobina

– A ligação do oxigênio causa uma ruptura de algumas ligações

iônicas e de pontes de hidrogênio.

É A FORMA DE ALTA AFINIDADE PELO OXIGÊNIO

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Ligação do O2 à Mioglobina
e à Hemoglobina
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Ligação do O2 à Mioglobina
e à Hemoglobina

 A mioglobina pode ligar-se somente a

uma molécula de oxigênio;

 A hemoglobina pode ligar-se a quatro moléculas de oxigênio;

 O grau de saturação (Y) dos sítios de ligação ao O2 em todas as

moléculas de mioglobina ou hemoglobina pode variar de 0 (sítos

vazios) a 100% (sítios todos preenchidos)

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Ligação do O2 à Mioglobina
e à Hemoglobina
 Curva de dissociação do oxigênio

 A mioglobina tem uma maior afinidade

pelo O2 que a hemoglobina;

 A pressão parcial de oxigênio

necessária para obter metade da
saturação dos sítos de ligação (P50) é
de aproximadamente 1mmHg para a
mioglobina e 26mmHg para a
Qto maior a afinidade pelo
hemoglobina. oxigênio, menor a P50.
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Ligação do O2 à Mioglobina
e à Hemoglobina
 Curva de dissociação do oxigênio

 A curva da mioglobina tem uma forma

hiperbólica, mostrando que ela liga-se
reversivelmente a apenas uma
molécula de oxigênio. Portanto, a
mioglobina oxigenada (MbO2) e a
desoxigenada (Mb) estão em equilíbrio
simples;
Qto maior a afinidade pelo
oxigênio, menor a P50.
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Ligação do O2 à Mioglobina
e à Hemoglobina
 Curva de dissociação do oxigênio

 A curva da hemoglobina tem uma

forma sigmoidal, mostrando que as
subunidades cooperam na ligação do
oxigênio (ligação cooperativa).

– A ligação de um oxigênio a um dos

grupos HEME aumenta a afinidade
pelo oxigênio dos grupos heme
restantes, na mesma moléculad de
hemoglobina.
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Efeitos alostéricos
 A capacidade da hemoglobina para ligar-se reversivelmente ao
oxigênio é afetada por:

– pO2;

– pH;

– pCO2;

– Disponibilidade de 2,3-bifosfoglicerato (2,3-BPG)

 Efetores alostéricos – a interação em um sítio na molécula de

hemoglobina afeta a ligação do oxigênio aos grupos HEME em
diferentes localizações na molécula.
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P50 alto X queda de pH

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2,3-BPG em eritrócitos modula a liberação de O2 da Hb

H+BPG x Hb + 4O2 ↔ Hb(O2) + BPG + nH+

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2,3-bifosfoglicerato

 Importante regulador da ligação do O2 à Hb

– Diminui a afinidade da Hb pelo O2 por se ligar a forma T e

não à forma R;

• Liga-se fortemente a desoxi-HB e fracamente à oxi-HB;

– E ONDE SE LIGA NA MOLÉCULA DAHb?

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2,3-bifosfoglicerato (BPG)

 LIGA-SE NA CONCAVIDADE CENTRAL

– Na transição T  R, as duas subunidades

ß se aproximam, estreitando a concavidade central e

expulsando o BPG;

– Portanto, estabiliza a conformação T da Hb pela ligação

cruzada de suas subunidades ß;

– Desloca o equilíbrio R  T, reduzindo a afinidade da Hb pelo

O2 .
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2,3-bifosfoglicerato (BPG)
 Função fisiológica indispensável

– No sangue arterial (pO2=100torr ) a Hb está

95% saturada com O2;

– No sangue venoso (pO2=30torr ) a Hb está 55% saturada com O2;

 Então, ao passar pelos capilares a Hb descarrega cerca de 40%

de O2.

 Portanto, na ausência de BPG, somente pequena parte de O2

seria liberado, devido ao aumento da afinidade

 A BPG exerce papel importante na adaptação às grandes

altitudes
1 Torr ≈ 133,322 Pa ≈ 1,333·10−3 bar ≈ 1,360·10−3 at ≈ 1,316·10−3 atm ≡ 1 mmHg ≈ 19,337·10−3 psi
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2,3-BPG e Altitude elevada

 Acidose metabólica = ↓BPG

 Altitude elevada, anemia (perda sgue) = ↑BPG

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Cadeias de globina durante o desenvolvimento

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Cadeias de hemoglobina humana

Estágio do Símbolo Composição em

desenvolvimento cadeias
Adulto HbA1 α2β2
Adulto HbA2 α2δ2
Feto HbF α2γ2
Embrião Hb Gower-1 ζ2ε2
Embrião Hb Portland ζ2γ2
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Outras hemoglobinas

Composição Fração de
Forma
das cadeias hemoglobina total

HbA α2β2 90%

HbF α2γ2 <2%
HbA2 α2δ2 2 - 5%

HbA1c α2β2- glicose 3 - 9%

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Outras hemoglobinas

 Hemoglobina Fetal (HbF)

 Encontrada no feto e RN;

 Responde por cerca de 60% da Hb total no eritrócito, durante

os primeiros meses de vida fetal;

 Começa a ser sintetizada pelo fígado, depois pela medula

óssea, que na sequencia (após 8 meses gestação) começa a

produzir a HbA, substituindo a HbF.

 BAIXA AFINIDADE PELO BPG

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Outras hemoglobinas

 Hemoglobina A2 (HbA2)

 É um componente menor da hemoglobina normal no adulto,

sugindo cerca de 12 semanas após o nascimento;

 Hemoglobina A1C (HbA1C)

 Forma mais abundante de hemoglobina glicosilada, com

resíduos de glicose ligados aos grupos NH2 das valinas N-

terminais das cadeias de beta-globina;

 Quantidades aumentadas de HbA1C = pacientes diabéticos

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Hemoglobinopatias

 Família de distúrbios causados pela produção de uma molécula

de hemoglobina estruturalmente anormal, pela síntese de

quantidades insuficientes de Hb normal ou, raramente, ambas.

 Anemia falciforme (HbS)

 Talassemias
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Hemoglobinopatias
 Anemia falciforme (HbS)

 Distúrbio mais comum, resultante da

produção de uma variante de hemoglobina;

 Ocorre ppalmente na população negra;

 Através da substituição na molécula ß globina de um resíduo

de glutamato, carregado por uma valina apolar;

 É uma doença homozigota recessiva, ocorrendo em

indivíduos que herdam dois genes mutantes, responsáveis

pela síntese da cadeia beta das moléculas de globina.

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Hemoglobinopatias

 Talassemias

 Doenças hemolíticas hereditárias, nas quais ocorre um

desequilíbrio na síntese das cadeias de globina (síntese de α
e β é defeituosa);

 Pode ser causada por uma série de mutações:

 Deleções de genes;

 Substituições ou deleções de nucleotídeos no DNA.

 α -Talassemia

 β -Talassemia