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CURSO: Biomedicina
DISCIPLINA: Bioquímica Clínica
NOME DO ALUNO: Camila Sampaio Bonfim
R.A: 2008885
POLO: Sudoeste
DATA:
Introdução:
*PADROES DE SORO
Procedimento Aula Prática:
Materiais Utilizados:
Tubos de coleta a vácuo
Algodão
Garrote
Álcool
Seringa
Seringa a vácuo
Braço sintético
Figura.03_ Simulação feita pela Figura.04_ Simulação da forma correta
professora para nos ensinar sobre de como colher sangue de um paciente
como devemos agir com o paciente (foto compartilhada pelo grupo, 2022).
na hora da coleta sanguínea (foto
compartilhada pelo grupo, 2022).
Conclusão:
Em sala de aula a professora detalhou o passo a passo de uma coleta
sanguínea feita pela seringa e a vácuo. Também tivemos espaço para treinar
no braço que nos foi disponibilizado.
Aula 1 / Roteiro 2
Data: 06/05/2022
Princípios de Fotometria
Objetivos
Determinar o espectro de absorção de uma solução de permanganato de
potássio;
Caracterizar o comprimento de onda (λ) onde ocorre absorção máxima;
Construir uma curva padrão do permanganato de potássio.
Materiais Utilizados:
Pipeta Pasteur
Solução de KMnO4 (potássio)
Água destilada
Espectrofotômetro
Cubetas
É preciso que o Espectrofotômetro seja zerado cada vez que uma nova
análise seja feita
Figura.07_ Leitura 450 Figura.07_ Leitura 490
(foto compartilhada pelo grupo, 2022). (foto compartilhada pelo grupo, 2022).
Conclusão:
Em sala de aula, após as leituras realizadas através do
Espectrofotômetro foi possível chegar aos seguintes resultados:
λ A
450 0,097
490 0,406
530 0,760
570 0,423
610 0,070
Aula 1 / Roteiro 3
Data: 06/05/2022
Diabetes tipo 1;
Diabetes tipo 2;
Diabetes gestacional;
Resistência à insulina;
Alterações na tireoide;
Doenças do pâncreas;
Problemas hormonais;
Síndrome de Dumping
Glicemia
Objetivos
A determinação da glicose em amostras de sangue é útil na avaliação do
metabolismo de carboidratos. Sua determinação em líquidos biológicos auxilia na
distinção entre processos infamatórios e infecciosos.
Método Direto
1. Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:
Branco Teste Padrão
Amostra ----- 0,01 mL -----
Padrão (nº 2) ----- ----- 0,01 mL
Reagente 1 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
Materiais Utilizados:
Tubos de ensaio
Estantes
Pipetas
Soro Qualitrol 1H e 2H
Kit Labtest
Banho maria 37 graus
Cubetas
Espectrofotômetro
Obs.: A professora optou por trabalhar com um kit vencido para que nós
aprendêssemos sobre as instabilidades em trabalhar dessa forma. Para saber se irá
reproduzir ou não o resultado correto.
Prática:
Conclusão:
Glicose:
Abs = 0,517 + 0,581 + 0,663 = 0,587
3
PT = 0, 587
0,587 0,587
Glicose = 252 mg/dL (não reproduziu) Glicose = 253 mg/dL (não reproduziu)
Quando se afirma que o resultado não reproduziu, quer dizer que houve
falta de controle, não atingiu o alvo do valor de referência. Essa não
reprodução pode ser por causa de alguns fatores como: temperatura,
equipamento, falha humana, validade do kit, entre outros.
Amilase:
Objetivo
A determinação da amilase em amostras de sangue, urina e outros líquidos
biológicos é teste útil no diagnóstico da pancreatite aguda e suas complicações.
Procedimento manual
Teste Controle
Substrato (nº 1) 0,5 mL 0,5 mL
Materiais Utilizados:
Um tubo de ensaio
Estantes
Pipetas
Qualitrol 1H
Kit Analisa Amilase Direta CNP
Cubetas
Espectrofotômetro
Prática:
Figura.07_ Kit Analisa Amilase Direta CNP Figura.07_ Bula Analisa Amilase Direta CNP
(foto compartilhada pelo grupo, 2022). (foto compartilhada pelo grupo, 2022).
Conclusão:
As absorbâncias foram lidas em 405 mn, as quais deram os devidos
resultados:
Inicial: 3000
1º: 0,380
2º: 0,880
3º: 0,713
A cada leitura foi colocada a cubeta por um minuto e devolvida ao
espectrofotômetro.
Houve linearidade entre as absorbâncias. Após a realização da média, resultou em
0,857 x 6,829 = 5,857, porém essa medida não existe. Fizemos a leitura até o valor
chegar a 384 mg/dL.
Devido ao resultado alterado ao extremo, foi contatado que a alteração pode ter
sido causada por causa do manuseio, pipetagem, temperatura, tempo de reação,
validade do kit, entre outros.
Lipase:
Objetivos
A lipase é um marcador mais específico de doença pancreática aguda do que
a amilase.
Seus níveis estão aumentados em pacientes com pancreatite aguda e
recorrente, abscesso ou pseudocisto pancreático, trauma, carcinoma de pâncreas,
obstrução dos ductos pancreáticos e no uso de fármacos (opiáceos). Está também
aumentada na maior parte das condições infamatórias da cavidade abdominal,
doenças do trato biliar, abscessos abdominais e insuficiência renal aguda e crônica
(com menor frequência do que a amilase).
Procedimento manual
A metodologia deve ser necessariamente realizada em formato birreagente.
Não deve ser preparado reagente de trabalho.
1. Ajustar a temperatura do fotômetro para 37 ºC e o comprimento de onda
em
570 nm (550 - 600);
2. Acertar o zero com água deionizada;
3. Em um tubo rotulado teste ou calibrador, pipetar 0,60 mL do reagente 1;
4. Adicionar 0,010 mL de amostra ou calibrador;
5. Adicionar 0,36 mL do reagente 2, homogeneizar, transferir imediatamente
para a cubeta termostatizada e disparar simultaneamente o cronômetro;
6. Medir as absorbâncias aos 90 e 180 segundos;
7. Usar a diferença de absorbância (∆A) entre os dois tempos (A180 - A90)
para
calcular os resultados.
Cálculos
Ver linearidade.
Lipase (U/L) = Teste (A 180 – A 90)__________ x CC
Calibrador (A 180 – A 90)
CC = concentração do calibrador
Procedimento Aula Prática de Lipase:
Materiais Utilizados:
Tubos de ensaio
Estantes
Pipetas
Soro
Kit Biotecnica
Banho maria 37 graus
Cubetas
Espectrofotômetro
Conclusão:
Cálculos:
Lipase (U/L) = Teste (A 180 – A 90) x CC
Calibrador ( A 180 – A 90)
CC = concentração do calibrador
Cálculo
Ácido úrico (mg/dL) = Absorbância do teste x 6
absorbância padrão
Procedimento Aula Prática:
Figura.09_ 1H amostra 4
(foto compartilhada pelo grupo, 2022).
Conclusão:
Absorbâncias:
Branco: usado para zerar o Espectrofotômetro
Padrão 1: 0,284 Abs = 0,284 + 0,288 + 0,500
Padrão 2: 0,288 3
Padrão 3: 0,500 Abs = 0,357
Padrão Triplicata = 0,357
Amostras 1H:
Amostra 1: 0,249
Amostra 2: 0,164
Amostra 3: 0,171
Amostra 4: 0,287
Cálculo:
Ácido Úrico = Abs teste x 6
Abs padrão
Creatinina:
Objetivo
A determinação da creatinina em amostras de sangue e urina é teste de
avaliação da função renal. A determinação da concentração de creatinina no líquido
amniótico é num dos parâmetros laboratoriais para a avaliação da maturidade fetal.
Procedimento manual
1. Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:
Branco Teste Padrão
Tampão (nº 2) 2,0 mL 2,0 mL 2,0 mL
Amostra ----- 0,25 ml -----
Água destilada ou
0,25 mL ----- -----
deionizada
Padrão (nº 3) ----- ----- 0,25 mL
Ácido pícrico (nº
0,5 mL 0,5 mL 0,5 mL
1)
2. Misturar e colocar em banho-maria, a 37 ºC, durante 10 minutos. O nível da água
no banho deve ser superior ao nível dos reagentes nos tubos de ensaio.
3. Determinar as absorbâncias do teste e padrão em 510 nm ou fltro verde (500 a
540 nm), acertando o zero com o branco. A absorbância do teste será a A1.
Acidificante (nº 4) 0,1 mL 0,1 mL -----
4. Misturar e deixar na temperatura ambiente durante 5 minutos.
5. Determinar a absorbância do teste em 510 nm ou fltro verde (500 a 540 nm),
acertando o zero com o branco. A absorbância do teste será a A2.
Manual de Estágio
Procedimento Aula Prática de Creatinina:
Materiais Utilizados:
Tubos de ensaio
Estantes
Pipetas automáticas
Água destilada
Soro Qualitrol 2H
Kit Labtest Creatinina
Espectrofotômetro
Cubetas
Banho – maria 37 graus
Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança
Prática:
Figura.09_ Foi colocado 250 microlitros Figura.09_ Foi colocado 250 microlitros de padrão
de água destilada no branco no tubo “padrão” (foto compartilhada pelo grupo, 2022).
(foto compartilhada pelo grupo, 2022).
Figura.09_ Foi colocado 500 microlitros Figura.09_ Tubos de ensaio sendo devidamente
de ácido pícrico em todos os tubos preenchidos (foto compartilhada pelo grupo, 2022).
de ensaio (foto compartilhada pelo grupo, 2022).
Figura.09_ Homogeneizando
(foto compartilhada pelo grupo, 2022).
Conclusão:
Leitura 510 mn
P = 0,120
A1 = 0,111
A2 = 0,019
CURVA
Aula 3 / Roteiro 2
Data: 13/05/2022
Estudo de Caso
Objetivo
Interpretar e correlacionar exames laboratoriais nos casos clínicos.
Objetivo
A determinação do colesterol em amostras de sangue é útil na investigação
das
dislipidemias e faz parte da avaliação do risco de doença coronariana isquêmica.
Procedimento manual
1. Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:
Branco Teste Padrão
Amostra ----- 0,01 mL -----
Padrão (nº 2) ----- ----- 0,01 mL
Reagente 1 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
Materiais Utilizados:
Kit Labtest Colesterol Liquiform
Pipetas
Tubos de ensaio
Estantes
Soro qualitrol 2H
Banho – maria a 37 graus
Prática:
Figura.09_ Materiais utilizados – Kit Labtest Colesterol Figura.09_ Bula Colesterol Liquiform Labtest
Liquiform (foto compartilhada pelo grupo, 2022). (documento via site labtest, 2022)
Figura.09_ Aquecendo o banho – maria até chegar Figura.09_ Banho – maria por 10 minutos
a 37 graus (foto compartilhada pelo grupo, 2022). (foto compartilhada pelo grupo, 2022).
Conclusão:
Absorbância Padrão = 0,104
Absorbância Teste = 0,332
Após obter o resultado, foi possível concluir que de acordo com os valores de
referência, obtivemos um resultado normal no exame de colesterol total.
2- Colesterol HDL
Objetivo
A determinação do colesterol ligado às lipoproteínas é útil na investigação das
dislipidemias e faz parte da avaliação do risco de doença coronariana isquêmica.
Procedimento manual
Precipitação de VLDL e LDL
1. Em um tubo 12 x 75, colocar: Soro 0,25 mL Precipitante 0,25 mL
2. Agitar vigorosamente durante 30 segundos. A agitação sugerida é fundamental
para
obtenção de resultados consistentes.
3. Centrifugar a 3.500 rpm por pelo menos 15 minutos para obter um sobrenadante
límpido.
4. Pipetar o sobrenadante límpido imediatamente após a centrifugação, tomando o
cuidado para não ressuspender o precipitado, a fIm de evitar resultados falsamente
elevados.
Materiais Utilizados:
Kit Labtest Colesterol HDL
Pipetas
Tubos de ensaio
Estantes
Soro qualitrol 2H
Banho – maria a 37 graus
Espectrofotômetro
Prática:
Figura.09_ Kit Labtest Colesterol HDL Figura.09_ Bula Colesterol HDL Labtest
(foto compartilhada pelo grupo, 2022). (documento via site labtest, 2022).
Figura.09_ Bula Qualitrol 2H Labtest Figura.09_ 250 microlitros de
(documento via site labtest, 2022). Precipitante (foto compartilhada
pelo grupo, 2022).
Conclusão:
Absorbância Padrão = 0,113
Absorbância Amostra = 0,530
Após obter o resultado, foi possível concluir que houve erro no exame
realizado em sala de aula, tendo em vista que o valor deu muito alto comparando
com os valores de referência ( ). O erro pode ter ocorrido devido a pipetagem, ao
espectrofotômetro, ao material, entre outros motivos.
3- Triglicérides
Objetivo
A determinação dos triglicérides em amostras de sangue é empregada na
abordagem laboratorial das hiperlipidemias.
Procedimento manual
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:
Branco Teste Padrão
Amostra ----- 0,01 mL -----
Padrão (nº 2) ----- ----- 0,01 mL
Reagente 1 (nº 1) 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
Misturar e colocar no banho-maria, a 37 ºC, por 10 minutos. O nível da água
no banho deve ser superior ao nível do reagente nos tubos de ensaio.
Determinar as absorbâncias do teste e padrão em 505 nm ou fltro verde (490
a 520 nm), acertando o zero com o branco.
A cor é estável por 60 minutos.
Cálculo:
Triglicérides (mg/dL) = Absorbância do Teste x 200
Absorbância do Padrão
Materiais Utilizados:
Kit Labtest Triglicérides Liquiform
Pipetas
Tubos de ensaio
Estantes
Soro qualitrol 2H
Banho – maria a 37 graus
Prática:
Aula 3 / Roteiro 4
Data: 13/05/2022
Aplicação da equação de Friedwald e Índice de Castelli
Aula 4 / Roteiro 2
Data: 13/05/2022
Determinação de calcemia e fosfatemia
Fósforo:
Objetivo
A determinação do fósforo inorgânico em amostras de sangue e urina é útil na
avaliação do metabolismo do fósforo.
Procedimento manual
1. Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:
Branco Teste Padrão
Água destilada ou
2,5 mL 2,5 mL 2,5 mL
deionizada
Amostra ----- 0,1 mL -----
Padrão (nº 4) ----- ----- 0,1 mL
Catalisador (nº 1) 1 gota 1 gota 1 gota
al de Estágio
2. Misturar.
Reagente
1 gota 1 gota 1 gota
Molibidato (nº 2)
3. Agitar fortemente (nessa fase ocorre turvação) e colocar em banho de água fria
(20
– 25 ºC) durante 2 minutos. O nível da água no banho deve ser superior ao nível dos
reagentes nos tubos de ensaio.
Tampão (nº 3) 2 gotas 2 gotas 2 gotas
4. Agitar fortemente e colocar em banho de água fria (20 – 25 ºC) durante 5 minutos.
5. Determinar as absorbâncias do teste e do padrão em 650 nm ou fltro vermelho
(640 a 700 nm), acertando o zero com o branco. A cor é estável por 15 minutos. O
branco é incolor. A presença de cor azulada visível no branco ocorre quando se usa
água de qualidade inadequada.
Cálculo
Ver linearidade.
Prática:
Figura.09_ Voltou para o banho de água fria por mais Figura.09_ Branco para zerar o espectrofotômetro
três minutos novamente (foto compartilhada (foto compartilhada pelo grupo, 2022).
pelo grupo, 2022).
Conclusão:
Em sala de aula fizemos o exame de fósforo e obtemos o seguinte resultado
ao obter o valor das absorbâncias:
Amostra = 0,165
Padrão = 0,143
Fósforo = 0,165 x 5
0,143
Fósforo = 1,153 x 5
Fósforo = 5,765 mg/dL
Aula 4 / Roteiro 3
Data: 13/05/2022
Urina Tipo 1 (aspecto físico-químico e sedimentos)
CASOS CLÍNICOS PARA DISCUSSÃO
CASO CLÍNICO 1
Conclusão:
Conclusão:
Conclusão:
Alta e baixa amilase: o que é e porque aumenta ou diminui - provas médicas 2022
(nature-via.com)
https://www.bing.com/search?q=o+que+é+lipasemia&qs=n&form=QBRE&sp=-
1&pq=o+que+é+lipasemia&sc=217&sk=&cvid=FC90A137C7E34151916BF99ACD80
7C40
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1&pq=o+que+é+amilasemia+&sc=119&sk=&cvid=CDEBEB8CCDB74AB2AB3E227E
9BD517D1