3/5/2020

Aula5
A Fosforilação oxidativa
Mecanismo quimiosmótico
Inibidores e desacopladores
A termogenina (UCP) e produção de calor
Doenças mitocondriais

Mecanismo quimiosmótico

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Os grupos condutores de eletrões

FMN Citocromos
Centros e
FAD Fe-S centros de Cu2+
Ubiquinona/Ubiquinol

Os potenciais Redox

H+ in -> out
Energy for Complexo I
phosphorylation

H+ in -> out
Energy for Complexo III
phosphorylation

H+ in -> out
Energy for
phosphoriyltion
Complexo IV

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Estrutura e mecanismo possível do Complexo I

(Complexo I de T. thermophilus)

As Reações Redox no braço periférico

induzem alterações conformacionais
no braço membranar (constituído por
tranportadores de H+)

Complexo II – Succinato desidrogenase

Não bombeia H+ para o

espaço intermembranar, mas
QH2 será usada para esse efeito
pelo complexo III

O Heme B não parece estar envolvido

na transferencia de electrões para Q;
possivelmente protege contra “leakage”
de e- e, assim, evita produção de ROS.

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A ubiquinona é o ponto de entrada para e- com várias origens

-Complexo I (NADH)
-Complexo II (succinato)
-Glicerol-3-P (shutle do glicerol-3-P)
-Acil-CoA desidrogenases (b-oxidação mitocondrial)

Complexo III

Bombeia protões para o espaço

Intermembranar.

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Estrutura e função da citocromo c oxidase (complexo IV)

Alguns H+ matriciais
são bombeados para o espaço
intermembranar; outros são
consumidos (H2O)

O potencial eletroquímico gerado pelos CI, CIII e CIV é utilizado pela

ATP sintetase (CV) para a síntese de ATP

Estratégia experimental para mostrar

que o Complexo V é um motor rotativo
(reversível)

Ver mecanismo em: https://www.youtube.com/watch?v=39UKSfsc9Z0

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O potencial eletroquímico energiza também outros tipos de transporte

Acoplamento do transporte de eletrões com a fosforilação

oxidativa - Controlo respiratório

Oxígrafo

Succinato + FAD => Fumarato + FADH2

Qd o potencial eletroquímico não
é dissipado pela síntese de ATP
Fumarato => malato
não há oxidação de NADH e FADH2
e o Krebs pára.
Malato + NAD+ => Oxaloacetato + NADH

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Inibidores da fosforilação oxidativa

rotenona
complexo I
Amital (barbiturico)
- transporte de electrões
antimicina A complexo III

Cianeto
azida complexo IV - consumo de O2
CO
- síntese de ATP
oligomicina ATP sintetase

Rotenona- Extraída de algumas plantas tóxicas (América e Ásia)

(usada na pesca por nativos)
Antimicina A – produzida por algumas bactérias como anti-fungícos
Oligomicina - idem

Desacopladores da fosforilação oxidativa

• moléculas hidrofóbicas que se dissolvem nas membranas

• transportam protões através da membrana interna
mitocondrial, dissipando o gradiente de protões

+ transporte de electrões
+ consumo de O2
- síntese de ATP

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A cadeia de transporte de eletrões pode ser propositadamente (fisiologicamente)

desacoplada da síntese de ATP.

A UCP-1 (termogenina) e a produção de calor no tecido

adiposo castanho
muito rico em mitocôndrias
oxidação de ácidos gordos associada à produção de calor

A estimulação continuada do
recetor β-adrenérgico pela
noradrenalina (e.g., animais que
hibernam) também induz:

- proliferação do tecido adiposo castanho

- Biogénese mitocondrial
- Transcrição do gene UCP1

Desacoplamento pela termogenina (UCP)

A energia associada ao gradiente eletroquímico não é

capturada quimicamente (síntese de ATP) mas antes
dissipada sob a forma de calor

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Doenças mitocondriais A maioria das ~1000 proteínas mitocondriais são codificadas

em genes nucleares e importadas pelo organelo pós-tradução.
Algumas, no entanto, são codificadas e sintetizadas pelas
próprias mitocôndrias. O mesmo é verdade para os rRNAs e
tRNAs mitocondriais.

Existem variadíssimas doenças genéticas que afetam a mitocôndria.

Algumas resultam de mutação do próprio mtDNA. Estas
- são transmitidas pela mãe de forma não mendeliana
- apresentam severidade proporcional à percentagem de mtDNA
mutado herdado (pode oscilar dramaticamente entre irmãos)
- poderão, em princípio, ser removidas com técnicas de fertilização on vitro. (Ver caso recente em
http://www.nature.com/news/three-parent-baby-claim-raises-hopes-and-ethical-concerns-1.20698)

Os tecidos/orgãos mais afectados são, tipicamente, aqueles que mais

dependem das mitocôndrias (Músculo e Sistema nervoso)

Doenças (alguns exemplos):

LHON (Leber´s hereditary optic neuropathy)
MELAS (Mitochondrial encephalopathy, lactic acidosis and stroke-like
Episodes)
MERRF (Myoclonic epilepsy with ragged red fibers)