LABORATÓRIO MULTIDISCIPLINAR

COMPONENTE CURRICULAR: PROCESSOS BIOLÓGICOS

PROF.
TURMA:
ROTEIRO DE AULA PRÁTICA II (POP)

COMPONENTES:

3ª PRÁTICA
ESTAÇÃO 1: REAÇÕES BIOQUÍMICAS PARA IDENTIFICAÇÃO DE AMINOÁCIDOS E PROTEÍNAS
OBJETIVOS
• Descrever o princípio das reações químicas utilizadas para caracterizar aminoácidos e proteínas (reação de Ninidrina e
reação de Biureto);
• Interpretar os resultados das reações químicas realizadas para identificação de aminoácidos e proteínas;
• Reconhecer, mediante as reações químicas, outras reações entre aminoácidos, como por exemplo, as ligações
peptídicas.

Reação de Ninidrina (identificação de aminoácidos)

A ninidrina (2,2 – diidroxi-hidrindeno – 1,3 diona) é um poderoso agente oxidante que reage com grupo de amino livres
de aminoácidos, peptídeos e proteínas desde que o pH da solução esteja entre 4 e 8. A reação dos aminoácidos com a ninidrina
origina um composto de cor púrpura de Ruherman no geral, e amarelo para prolina, não apresentando a mesma intensidade de
coloração. Agora, observe a reação da ninidrina.

A ninidrina é comumente usada para detectar impressões digitais, uma vez que, graças à reação com os aminogrupos
terminais das moléculas de lisina incorporadas nas proteínas ou peptídeos, é suficientemente sensível para revelar resíduos de
pele.
Reação de Biureto (identificação de proteínas)
O biureto é um reagente analítico, composto de hidróxido de sódio (NaOH 2,5N) e sulfato de cobre 1% (CuSO4). A reação
de Biureto é detectar a presença de ligações peptídicas, dando positiva para proteínas e peptídeos com três ou mais resíduos
de aminoácidos. A reação é também positiva para substância que contêm 2 carbonilas (-CONH2) ligadas diretamente ou por
meio de um único átomo de carbono ou nitrogênio.

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 Princípio da reação de Biureto

MATERIAIS
• 9 tubos de ensaios de vidro;
• Estante;
• Piloto para identificação dos tubos;
• Pipetas de Pasteur
• Solução de ninidrina em etanol (1%);
• Reagente biureto → Sulfato de cobre (CuSO4 1%) + Hidróxido de sódio (NaOH 2,5N);
• Amostras (conforme a tabela).

EQUIPAMENTO

• Banho-maria.

PROCEDIMENTOS
1. Observe as informações da tabela e, no final do experimento, complete a coluna do resultado.
2. Utilize os 9 tubos de vidro (numere-os com piloto de 1 a 9) e a pipeta para adicionar o volume solicitado para cada
amostra;
3. Depois, adicione a quantidade de gotas de ninidrina em etanol (1%) em cada tubo;

VOLUME DA
NINIDRINA
TUBO AMOSTRA AMOSTRA RESULTADO
(GOTAS)
(mL)
1 Água (destilada) 1 4
2 Glicina 0,1 mol/L 1 4
3 Prolina 0,1 mol/L 1 4
4 Alanina 0,1 mol/L 1 4
5 Albumina 0,1% 1 4
Adoçante
6 1 4
(aspartame)

4. Após a adição da ninidrina 1% em etanol, aquecer os tubos em banho-maria fervente durante 3 minutos (albumina 5/6
minutos);
5. Agora, nos tubos 7; 8 e 9 adicione a quantidade dos reagentes conforme tabela a seguir:

VOLUME DA Sulfato de Hidróxido

TUBO AMOSTRA AMOSTRA Cobre de sódio RESULTADO
(mL) (gotas) (gotas)
7 Água (destilada) 1 5 5

2
 8 Alanina 0,1 mol/L 1 5 5
9 Ovoalbumina 0,1% 1 5 5

6. Após a adição do reagente de biureto, anote os resultados comparando cada tubo do experimento ao tubo que contém
apenas água destilada.
7. Anote os resultados comparando cada tubo do experimento ao tubo que contém apenas água destilada.

✓ Explique, com base nos conhecimentos prévios sobre a temática, o resultado apresentado nos tubos de 1 a 9.

Tubo 1

Tubo 2

Tubo 3

Tubo 4

Tubo 5

Tubo 6

Tubo 7

Tubo 8

Tubo 9

✓ Escreva a fórmula química estrutural da água, glicina, prolina, alanina e aspartame.

3
 ESTAÇÃO 3
OBJETIVOS
• Diferenciar no modelo tridimensional a estrutura de aminoácidos baseado na sua cadeia lateral.
• Descrever o processo de formação da ligação peptídica.
• Comparar a estrutura tridimensional de aminoácidos e proteínas.

ATIVIDADE 4: PRÁTICA LABORATORIAL ATIVA.

Siga os passos abaixo:
1. Utilize o conjunto de átomos (KIT MODELOS DE ÁTOMOS) distribuídos pelo professor e construa os
aminoácidos:
a) Glicina
b) Alanina
2. Utilizando os aminoácidos montados façam a ligação peptídica entre eles, evidenciando a liberação da
molécula de água.
3. Depois, desenhe com esquemas o passo a passo de como vocês realizaram essa atividade (mostrando
as estruturas, as ligações e as principais moléculas formadas).