UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO INTEGRADO EM ZOOTECNIA

Fermentação ruminal

Disciplina: Metabolismo energético

Prof. Dr. Adriana Guim
Grupo 1: Gláucia Moraes
Jonas Inácio
 Introdução

 Durante a evolução, os animais ruminantes

desenvolveram características anatômicas e
simbióticas

 Carboidratos
 Energia

 Compostos nitrogenados
não proteicos
 Proteína
 Introdução

 A fermentação em ruminantes é o resultado da

atividade física e microbiológica, a qual converte os
componentes dietéticos a:
Ácidos graxos de cadeia curta

Proteína microbiana

Vitaminas do complexo B e
vitamina K
Dióxido de carbono e Metano

Amônia e Nitrato e etc...

 Introdução

A manutenção de uma população microbiana ruminal

ativa depende de algumas característica ruminais que são
mantidas pelo animal hospedeiro:
Suprimentode alimento mastigado ou ruminado
Remoção dos produtos de fermentação
Adição de tamponantes e nutrientes via saliva
Remoção de resíduos indigestíveis dos alimentos
Manutenção do pH e Temperatura
Anaerobiose
Umidade ideais ao crescimento microbiano
 Objetivo da aula

Abordar:

A caracterização do ambiente ruminal

O processo de fermentação e os fatores que o afetam

Os microrganismos e colonização de partículas

O produtos de fermentação e a cinética ruminal.

 Caracterização do ambiente ruminal

Osmolaridade
Fermentação normal (260 a 340 mOsm)
Após uma alimentação à base de concentrado ou
feno de alfafa peletizado (350 a 400 mOsm)
Pressão osmótica próxima de 260 mOsm
Favorável aos protozoários ciliados
 Pressão osmótica ↑ 350 mOsm
Digestão da fibra e do amido é inibida por efeito
direto sobre o metabolismo microbiano
 Caracterização do ambiente ruminal
 pH e Temperatura

pH: 5,5 a 7,2

↓ 6 Inibe bactérias
fermentadoras de
celulose
↓ Eficiência de
síntese de Ptm
 Temperatura: 38 a
41°C (ideal 39°C)
 Caracterização do ambiente ruminal

Potencial redox
 Entre -250 a -450 mV  refletindo ausência de oxigênio e o
excesso de potencial redutor
 Os microrganismos são obrigados a trabalhar com excesso de
equivalentes redutores (NADH)
 Para dispor desses compostos, eles reduzem todos os
compostos disponíveis:
 CO2 reduzido a metano
 Sulfatos e nitratos a sulfetos e amônia
 Ácidos graxos insaturados a saturados.
Apesar disso, o crescimento microbiano permanece limitado
pela disponibilidade de ATP
 Fatores que afetam o ambiente ruminal e o
processo de fermentação

 Dieta Produtos finas da fermentação

Muda atividade
metabólica dos
microrganismos

A dieta é, provavelmente, o fator mais importante que

influencia o número e a proporção relativa das diferentes
espécies de microrganismos ruminais.
Fatores que afetam o ambiente ruminal e o
processo de fermentação

Mudança abrupta de uma dieta

• Determina o grau de
perturbação da
fermentação ruminal

• Potenciais distúrbios
digestivos
Fatores que afetam o ambiente ruminal e o
processo de fermentação

Quantidade e a composição da dieta

Variáveis externas

Taxa de digestão Taxa de passagem

Turnover do conteúdo ruminal

A ingestão é regulada pela exigência do animal,

composição da dieta e disponibilidade de alimento
Fatores que afetam o ambiente ruminal e o
processo de fermentação

Dietas com altos teores de proteína

Favorecem microrganismos proteolíticos

Dietas altas em amido,

que são baixas em fibra

 Estão associadas a uma

grande população de
utilizadores de amido
.
Fatores que afetam o ambiente ruminal e o
processo de fermentação

ocorrência de microrganismos celulolíticos em um

número reduzido em animais alimentados com dietas
ricas em concentrados dependerá:

 Tamanho de partícula da fibra

 Taxa de passagem

Pequena quantidade de
forragem grosseira:
 Taxa de passagem pode ser
lenta
 ↑ Microrganismos celulolíticos
Fatores que afetam o ambiente ruminal e o
processo de fermentação

Dietas baixas em fibra

 Altas taxas de degradação
 Produção de ácidos graxos voláteis
 Requer tamponantes
Condições favorecem espécies capazes de tolerar algum
abaixamento do pH ruminal

Microrganismos celulolíticos e metanogênicos são

menos tolerantes a tais mudanças
(Slyter, 1976)
Fatores que afetam o ambiente ruminal e o
processo de fermentação

Manipulação dietética da fermentação ruminal

A modificação na fermentação ruminal pode ocorrer
em três níveis: dietético, animal e microbiano.
Os principais objetivos da manipulação ruminal são:
 Melhorar os processos benéficos

 Minimizar, deletar ou altera os processos ineficientes

 Minimizar, deletar ou alterar os processos prejudiciais

para o animal hospedeiro
Fatores que afetam o ambiente ruminal e o
processo de fermentação

A manipulação dietética da fermentação ruminal é

feita com a inclusão de substâncias como:
Enzimas
fibrolíticas Leveduras
Ionóforos

Lipídeos Tampões

Controla e otimiza as reações fermentativas dos

principais componentes dietéticos
Fatores que afetam o ambiente ruminal e o
processo de fermentação

 Ionóforos
Os ionóforos, principalmente a monensina, é:
 Antibiótico produzido pelo Streptomyces
cinnamonensis
 Seu uso aprovado nos USA para gado de corte em
confinamento, 1976, e para animais em pastejo, em
1978.
Somente monensina, lasalocida, salinomicina e
laidomicina propionato são aprovados para uso em
dietas de ruminantes.
Fatores que afetam o ambiente ruminal e o
processo de fermentação

 Ionóforos
 Altamente efetivos contra bactérias Gram-positivas
 Exibem pouca ou nenhuma atividade sobre bactérias
Gram-negativas
Possuem uma membrana externa que contem porinas
(canais de proteína)
Tamanho limite de aproximadamente 600 dáltons
 A maioria dos ionóforos são maiores que 600 Da.

Russell (1997)
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

 Dentre os efeitos benéficos dos ionóforos, podem se

citar:
Melhoria na eficiência do metabolismo energético
 Alterando a proporção de AGCC produzidos no rúmen
Aumento da concentração de propionato e redução
nas concentrações de acetato e butirato, com
diminuição na perda de energia na forma de metano;
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

 Dentre os efeitos benéficos dos ionóforos, podem se

citar:
Redução na degradação de proteína dietética
 Aumentando a quantidade de proteína de origem
alimentar que chega ao intestino delgado;
Aumento da digestibilidade dos alimentos;
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

 Dentre os efeitos benéficos dos ionóforos, podem se

citar:
Redução na incidência de acidose
 Aumento do pH ruminal
 Inibição de bactérias produtoras de ácido lático

A redução da acidose lática está relacionada ao uso de

monensina, já que as bactérias produtoras de ácido
lático (Streptococcus bovis e Lactobacillus spp.) são
Gram-positivas e sensíveis à monensina.
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

Ionóforos causam:
 Redução do CMS
 Sem alterar o ganho de peso
 Melhora a conversão alimentar
 Não altera do CMS
 Melhora ganho de peso
 Melhora a conversão
alimentar
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

Enzimas fibrolíticas
 As enzimas comerciais são extratos de fermentação de
origem bacteriana (Bacillus sp.) ou fúngica
(Trichoderma e Aspergillus spp.).
Aumento nas
 Melhora no ganho de peso
digestibilidades da
 Conversão alimentar de
MS e da fibra
bovinos
Outros trabalhos
não apresentaram
efeito sobre o
desempenho
animal.
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

Enzimas fibrolíticas
 Quanto ao mecanismo de ação:

Sugerido que o aumento da digestibilidade da fibra

seria resultante da melhoria na colonização das
partículas alimentares. Além disso, poderia haver
estímulo da atividade enzimática endógena dentro do
rúmen
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

Enzimas fibrolíticas
Em vacas lactantes no início ou meio da lactação:
 Alimentadas com 55% de volumoso
 O uso de enzimas fibrolíticas (celulases e xilanases)
imediatamente antes da alimentação permite:
 aumento na produção de leite
Efeito maior nas vacas alimentadas no terço inicial da
lactação
Contudo, mais pesquisas são necessárias para entender como o
tratamento melhora a produtividade dos animais.
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação
Leveduras
O aumento no número de bactérias viáveis e de
celulolíticas parece ser o efeito mais consistente em
resposta ao uso de Sacharomyces cerevisae.
.
• Acredita-se que esse
aumento seja
responsável pela maior
degradação da fibra e
do escape ruminal de
proteína microbiana
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

Leveduras
 Além disso, verificou-se que o uso de S. cerevisae
estimulou o crescimento da bactéria gram-negativa
utilizadora de ácido lático, Selenomonas ruminantium.
 Foi sugerido também que essa levedura estimula a
captação de oxigênio e isso levaria ao aumento no
número de bactérias ruminais..
Entretanto, mais pesquisas são necessárias para explicar essa ação.
O uso de Aspergilus oryzae mostrou resultados similares aos da S.
cerevisae, principalmente no que se refere ao aumento no número de
bactérias totais e celulolíticas
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

Lipídios
Os lipídios são utilizados nas dietas de ruminantes para
aumentar a energia das rações
 Principalmente para vacas leiteiras no início da lactação
Decorrência da sua elevada densidade calórica para
manipular a fermentação ruminal, ou para reduzir o custo
das rações.
 Uma fonte lipídica ideal:
 Aquela que tem mínima interferência sobre a fermentação
ruminal
 Alta digestibilidade no intestino
delgado
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

Lipídios
Efeitos da adição de lipídios:
 Depende da quantidade e da fonte dos mesmos

Apresentando os lipídios insaturados e os AGCC mais

efeitos do que os ácidos saturados e os AGCL,
enquanto que os sabões de Ca apresentam efeitos
mínimos sobre a fermentação ruminal.
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

Lipídios
 O efeito mais consistente da suplementação lipídica
é a redução na concentração de amônia ruminal
 Resultante da redução na proteólise e/ou da
reciclagem de bactérias, em consequência da
diminuição do número de protozoários ciliados.
 Pode ocorrer aumento na produção ruminal de
propionato e geralmente, ocorre redução na
metanogênese.
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

Tampões
Tampões são combinações de um ácido fraco e seu
sal, devendo ser solúveis em água e seu pKa deve ser
próximo do pH fisiológico do rúmen, sendo o
bicarbonato de sódio considerado um verdadeiro
tampão com um pKa de 6,25.
Os tampões têm a função de neutralizar o excesso de
ácidos produzidos no rúmen em situações nas quais
os sistemas tamponantes, principalmente o fluxo
salivar, são insuficientes.
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

Tampões
A ação dos tampões no rúmen pode ser explicada
pelo:
 Aumento na ingestão de água
 Aumento na taxa de passagem de líquidos e no
escape ruminal dos carboidratos solúveis, diminuindo
a produção ruminal de propionato e,
consequentemente, aumentando a produção de
gordura do leite.
 Fatores que afetam o ambiente ruminal
e o processo de fermentação

Tampões
 O rúmen é bem tamponado pela secreção salivar
 Mas se a quantidade de fibra dietética é restrita e a taxa de
fermentação de carboidratos é rápida, o pH pode declinar.
 pH cai, bactérias amilolíticas e resistentes à acidez
aumentam, enquanto microrganismos celulolíticos
diminuem.
 Quando o pH decresce de 7,0, ficando entre 5,0 e 5,5,
muitos microrganismos ruminais cessam o seu
crescimento, apesar de conseguirem sobreviver mesmo em
altas concentrações de H+.
Adesão dos microrganismos ao
alimento

 1º passo no processo digestivo

 Aproximação das enzimas
digestivas aos substratos
específicos
 Concentra a digestão em uma
área específica
 Adesão dos microrganismos ao
alimento

Populações associadas ao
fluido ruminal
 Mistura de
microrganismos que se
desprenderam das
partículas de alimento
 Aderem e iniciam a
Correspondem
digestão 20 – 30%
de partículas
da massa microbiana
ingeridas
 Adesão dos microrganismos ao
alimento

Populações associadas à
partícula do alimento
 Mistura de
microrganismos
fortemente associadas à
partícula
Responsáveis
Correspondem 70 por:
– 80%
80%
da da atv. Endoglucanase
massa microbiana
70% amilase
75%proteases
Adesão dos microrganismos ao
alimento

Para absorção de nutrientes

 Degradação a partículas menores

 Enzimas extracelulares
 Adesão dos microrganismos ao
alimento

 Processo de adesão possui 4 fases:

Inicia logo após a ingestão
1 Contato aleatório das bactérias livres no fluido

2 Ocorre a adesão não especifica pelo glicocálix

3 Ocorre a interação específica e induzida

Ocorre em menos de 1 hora

 Adesão dos microrganismos ao
alimento

 Processo de adesão possui 4 fases:

Proliferação celular e formação de colônias
4 bact. (biofilmes) sobre as partículas
potencialmente digestíveis

Ocorre ± 24 horas após a incubação

Máxima colonização
 Adesão dos microrganismos ao
alimento

Processo de adesão e colonização pode ser

afetado por fatores relacionados
 Bactérias
 Substrato
 Ambiente ruminal

Estudos mostram que a máxima adesão foi observada no

estágio intermediário de crescimento celular bacteriana e
qualquer fator que altere a integridade do glicocálix
interfere na adesão
 Adesão dos microrganismos ao
alimento

Processo de adesão e colonização pode ser

afetado por fatores relacionados
 Bactérias
 Substrato
 Ambiente ruminal
Geralmente as bactérias ruminais evitam essa barreira física
A camada cuticular de grãos e forragens, interferem na
e acessam os tecidos internos prontamente digestíveis por
aderência. Lignina, taninos e excesso de gordura da dieta
meio de estômatos e áreas danificadas, ocorrendo a
interferem na aderência e na atv. hidrolítica da bactéria
digestão de dentro para fora
Adesão dos microrganismos ao
alimento

 Gramíneas de clima temperado são mais

susceptíveis à aderência que as de clima
tropical.
Adesão dos microrganismos ao
alimento

 O tanino condensado - Proteína resiste à

digestão microbiana.
 Composto fenólico depositado dentro do
vacúolo da planta
 O tanino condensado forma complexos com
enzimas microbianas, interferindo com a
adesão microbiana, inibindo a digestão da
fibra por bactérias celulolíticas.
Guimarães-Beelen et al.
(2006) avaliaram o
crescimento da população
de bactérias celulolíticas
Ruminococcus flavefaciens
submetidas a doses de
taninos purificado no
fluido, concluindo que há
redução na população.
 Adesão dos microrganismos ao
alimento

Processo de adesão e colonização pode ser

afetado por fatores relacionados
 Bactérias
 Substrato
 Ambiente ruminal

O pH do fluido ruminal afeta o processo de aderência e

digestão das partículas.

A ruminação facilita a hidratação da partícula e permite a

penetração de biofilmes no interior da partícula.
 60:40 V:C
Figura 1. Efeito do pH e do tipo da dieta na DTFDN.
10:90 V:C
Adesão dos microrganismos ao
alimento

 Pires et al. (2006)

compararam a
degradabilidade da
MS de 4 forrageiras:
 Alfafa (52,3% FDN)
 Aveia (58,4% FDN)
 Leucena (86% FDN)
 Guandu (73,6% FDN)
 Degradação de carboidratos (CHO)

 Degradação da celulose
 Ação sequencial e integrada de várias
endocelulases, exocelulases e β-glicosidases que
hidrolisam as ligações β-1,4 no interior e no final da
cadeia liberando glicose

 Degradação da hemicelulose
 Sistemas enzimáticos mais
complexos devido sua
estrutura hererogênea
 Degradação de carboidratos (CHO)

 Degradação do amido
 Ação de amilases bacterianas do tipo α (interior) e
β(extremidade) da cadeia, liberando maltose
Amido

 Degradação da pectina
 Pelas enzimas pectinas
liases, liberando
galactourinídeo
insaturados
Degradação de carboidratos (CHO)

 Várias espécies de bactérias aderem a

grânulos de amido
1. S. bovis Grânulos de amido e matriz proteica
2. R. amylophilus Local de adesão ao
substrato
Grânulosdiferentes
de amido
3. B. fibrisolvens
Produtos da fermentação

 Ácidos graxos de cadeia curta – AGCC

 Apresentam de 1 a 7 carbonos
 Importantes:

Acetato – principal em
mamíferos

Relação molar

75:15:10
Produtos da fermentação
Produtos da fermentação

Outros produtos...

CO2

Álcool
 Produtos da fermentação – Rotas

Produzem enzimas extracelulares e outras

que degradam a celulose e hemicelulose

Oligossacarídeos

Glicose
Celulolíticas
Glicose-6-P
Celulolíticas e não celulolíticas Frutose-6-P
utilizam os produtos finais da
ação das celulases e produzem Triose-fosfato
AGCC.
Produtos da fermentação – Rotas

 A pectina e a hemicelulose são inicialmente

degradadas a xilose e outras pentoses

 Amido e dextrinas são degradados a amilose

e maltose  maltase converte a G-6-P.

 Todas as hexoses e trioses são raramente

detectadas no rúmen, pois são rapidamente
transformados em piruvato (via glicolítica)
Em pH
baixo
Destino dos principais AGCC

O acetato representa de 90 a 100% do

total de AGCC na circulação arterial.

C Ac. graxo
Acetato
Pelo tecido adiposo e pela glândula mamária
Velocidade: mais rápido que o C da glicose
 Destino dos principais AGCC

 O butirato é em sua maior parte absorvidos

pelo epitélio ruminal e intestinal

 A maior parte do propionato é captado pelo

fígado.
 Principalparece
O propionato precursor
fornecerda glicose deem
um mínimo 50%
ruminantes
e um máximo de 75% do requerimento de glicose
do animal. Os aminoácidos, glicerol e lactato são
os precursores do restante de glicose exigida.
Proteína microbiana

 A quantidade de MO digerida no rúmen e a

eficiência dos microrganismos em utilizar a
energia disponível para seu crescimento

Determina

Produção de proteína microbiana

 Proteína microbiana

 No rúmen dois tipos de bactérias:

BFCF BFCNF
Crescem mais lentamente crescem mais rapidamente em
e utilizam amônia para relação aos anteriores e
sintetizarem proteína utilizam amônia, peptídeos e
aminoácidos para sintetizarem
proteína.
Proteína microbiana

 A produção:
 Aumenta com o aumento de MO fermentada
no rúmen
 A composição
 62,5% PB
 21,1% CHO
 12,0% Gordura
 4,4% Cinzas
(Base na MS)
Proteína microbiana

 Exigência de energia:
 Mantença, crescimento e multiplicação
 Na mantença inclui gastos:
 Motilidade
 Turnover dos constituintes celulares
 Transporte ativo
 Entre outros
 Gases da fermentação ruminal

 CO2 + 4H2  CH4 + 2H2O

ATP

Gasto
Considerações finais

 O rúmen é muito complexo. Para entender

os mecanismos que ocorrem sobre a
fermentação ruminal, é importante
conhecer as características do ambiente.
A fermentação ruminal pode ser
manipulada pela dieta, utilizando ionóforos,
enzimas, lipídeos, leveduras e tampões.
 O sucesso da fermentação ruminal está na
adesão e colonização dos microrganismos
às partículas ingeridas.
Obrigada!