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Universidade Federal de Santa Catarina

Campus Blumenau
Departamento de Ciências Exatas e Educação
CEE1221 – Química Orgânica Experimental
Bacharelado em Engenharia Têxtil

CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA


Alexander Schacht Sasse (20250274) e Beatriz Krüger (19202942)
Alex_sasse@hotmail.com, beatrizkruger@terra.com.br

Objetivo: Identificar componentes de um analgésico, separar componentes de extratos naturais via


cromatografia em camada delgada (CDD) e aplicar os conhecimentos necessários quanto à
polaridade e interações intermoleculares dos compostos para análise final.

Palavras-chave: Identificar, separar, componentes, cromatografia, polaridade. /

1. INTRODUÇÃO 2. RESULTADOS E DISCUSSÃO

A cromatografia, se demonstra uma O experimento foi iniciado com o ensaio


técnica interessante na análise e separação de /cromatográfico das substâncias, 𝛃-Caroteno e
substâncias e compostos. Clorofila. Inicialmente, em uma placa de
Essa técnica consiste na separação de alumínio revestida por uma camada de sílica
compostos entre duas fases, sendo uma delas gel, foram feitas as marcações da linha de
a fase estacionária e a outra um eluente, aplicação, bem como do local de aplicação
denominado fase móvel, que dependendo de das substâncias e da linha do solvente.
sua polaridade, terá uma interação maior ou A cromatografia, se demonstra uma
menor com a substância a ser analisada, técnica interessante
fazendo com que essa corra mais ou menos
pela fase estacionária. Imagem 1: Fórmula Molecular do
A partir de um ensaio de cromatografia é 𝛃-Caroteno.
possível identificar a composição de
determinadas substâncias em comparação
com outras, cuja composição já é conhecida.
Além disso, também é possível analisar a Fonte:https://13moleculasapular.wordpress.c
polaridade das substâncias utilizadas, om/2014/04/01/porque-e-que-comer-muita-ce
observando a afinidade destas com a fase noura-nos-pode-deixar-laranja/
móvel, o eluente, e com a fase estacionária,
nesse caso, a placa de alumina. Imagem 2: Fórmula Molecular da
Por meio da distância percorrida pelas Clorofila a.
soluções no ensaio é possível calcular o fator
de retenção da solução analisada, o que
também permite ter uma noção da polaridade
dessas substâncias, de acordo com o solvente
utilizado, seja este polar ou apolar.
É possível também, ter uma noção da
diferença de interações intermoleculares, que
ocorrem em determinados componentes de
compostos analisados, já que se este
apresentar mais de uma mancha, estas
tenderão a se arrastar de forma ordenada, pela Fonte:https://www.researchgate.net/figure/Fi
fase estacionária, de acordo com a força das gura-3-Estrutura-generica-da-clorofila-caracte
interações intermoleculares, inerentes a elas. rizada-por-diversas-ligacoes-conjugadas_fig3
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Com as marcações efetuadas, as cálculo do Fator de Retenção (Rf) de cada


substâncias, 𝛃-Caroteno e Clorofila, foram mancha, demonstrado a seguir.
aplicadas na placa com o auxílio de um
capilar. 𝑅𝑓𝑨 =
𝑑𝑐
=
3,0
= 0, 88
𝑑𝑠 3,4
A placa contendo os extratos orgânicos foi
colocada, em seguida, em um béquer 𝑑𝑐 3,1
contendo o eluente, o qual tivemos cuidado 𝑅𝑓𝑩 = 𝑑𝑠
= 3,4
= 0, 91
para tomar uma medida que ficasse abaixo da
linha de aplicação do cromatograma. 𝑅𝑓𝑪 =
𝑑𝑐
=
1,9
= 0, 56
Para esse primeiro procedimento foi 𝑑𝑠 3,4

utilizado como eluente um composto de


𝑑𝑐 1,4
acetato de etila : éter de petróleo, 2:3, uma 𝑅𝑓𝑫 = 𝑑𝑠
= 3,4
= 0, 41
mistura de uma substância de polaridade
média na proporção 2 e outra substância, com 𝑑𝑐 0,8
𝑅𝑓𝑬 = = = 0, 23
características mais apolares na proporção 3, 𝑑𝑠 3,4
sendo assim, nosso eluente terá características
mais apolares. Observando a mancha A derivada do
Após essa primeira etapa ser finalizada, o 𝛃-Caroteno, percebesse que essa, adquiriu um
seguinte cromatograma foi obtido: forte tom amarelado, característico da
substância, além disso foi obtido um fator de
Imagem 3: Cromatograma obtido das retenção igual a 0,88, o que demonstra que a
substâncias 𝛃-Caroteno e Clorofila no eluente substância possui mais afinidade com a fase
acetato de etila : éter de petróleo, 2:3. móvel, que possui características mais
apolares, dessa forma temos que o 𝛃-Caroteno
também possui características similares,
quanto a polaridade.
Já a clorofila, deu origem a 4 manchas,
tendo elas colorações levemente esverdeadas
e amareladas.
A mancha B, que possui mais afinidade
com a fase móvel, de característica apolar,
obteve um Rf igual a 0,91, muito similar ao
Rf obtido pela mancha A, o que nos indica
que essa mancha é possivelmente um
carotenóide que assim como o 𝛃-Caroteno,
demonstrou características mais apolares.
Já a mancha C, teve uma evolução menor
que a mancha B, apresentando um Rf igual a
0,56, além disso, a mancha apresenta uma
coloração mais amarelada, o que de acordo
com fontes pesquisadas [1], indica a presença
Fonte: Autores de xantofilas, um grupo que também é
classificado como carotenóides porém, como
Após a obtenção do cromatograma, as pode ser observado na cromatografia, possui
manchas foram nomeadas e foram aferidas uma afinidade menor com a fase móvel, o que
suas distâncias, da linha de aplicação para o
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indica uma polaridade mais elevada do que a Imagem 5: Fórmula Molecular da Cafeína
substância apresentada pela mancha B. (C).
Já a mancha D, possui uma coloração
mais esverdeada se comparada às demais,
dessa forma temos que essa mancha
compreende a clorofila a. Como podemos
observar no cromatograma a clorofila a
possui uma menor afinidade com a fase
móvel, exibindo um Rf igual 0,41, Fonte:https://www.pngwing.com/pt/free-png-
apresentando uma polaridade maior que as tceww/download
xantofilas, todavia, ao mesmo tempo vemos
que ela apresenta uma polaridade menor que a Nessa segunda etapa foram obtidos dois
substância presente na mancha E. cromatogramas, já que foram realizados dois
A mancha E, de coloração ensaios com eluentes diferentes, no primeiro
verde-amarelada, seria clorofila b, que como utilizou-se a acetona : clorofórmio 1:1, duas
podemos verificar apresentou um Rf igual a substâncias com características polares, já no
0,23, ou seja, possui uma afinidade menor segundo, foi utilizado o tolueno : clorofórmio
com a fase móvel, se comparada as demais : ácido acético glacial : metanol 12:5:1,8:0,1,
manchas identificadas no cromatograma, o que origina um composto de polaridade
possuindo assim, características mais polares média, já que o tolueno, apolar, encontrasse
se comparada às demais substâncias em uma concentração superior às demais
apresentadas pelo cromatograma. substâncias que possuem características
A segunda etapa do experimento consistiu majoritariamente polares.
em analisar os componentes de um No primeiro ensaio, cujo eluente foi
analgésico. O procedimento foi realizado de acetona : clorofórmio 1:1, foi obtido o
forma similar à primeira etapa. seguinte cromatograma:
Dessa vez foram realizadas 3 marcações
na placa de alumina, nas quais foi feita a Imagem 6: Cromatograma obtido das
aplicação de amostras de ácido acetilsalicílico substâncias ácido acetilsalicílico (AAS),
(AAS), Cafeína (C) e uma amostra Cafeína (C) e uma amostra desconhecida (A)
desconhecida (A). no eluente acetona : clorofórmio 1:1.

Imagem 4: Fórmula Molecular do ácido


acetilsalicílico (AAS).

Fonte:https://app.planejativo.com/q/21985/qu
imica-3/propriedades-fisicas-e-quimicas-dos-
compostos-organicos Fonte: Autores
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Após a obtenção do cromatograma, as Imagem 7: Cromatograma obtido das


manchas foram nomeadas e foram aferidas substâncias ácido acetilsalicílico (AAS),
suas distâncias, da linha de aplicação para o Cafeína (C) e uma amostra desconhecida (A)
cálculo do Fator de Retenção (Rf) de cada no eluente tolueno : clorofórmio : ácido
mancha, demonstrado a seguir. acético glacial : metanol 12:5:1,8:0,1.
𝑑𝑐 2,4
𝑅𝑓𝑨 = 𝑑𝑠 = 3,8 = 0, 63

𝑑𝑐 1,8
𝑅𝑓𝑩 = 𝑑𝑠
= 3,8
= 0, 47

𝑑𝑐
𝑅𝑓𝑪 = 𝑑𝑠
= 3,8
= 0, 71

𝑑𝑐 2,2
𝑅𝑓𝑫 = 𝑑𝑠
= 3,8
= 0, 58

Observando o comportamento da
substância desconhecida (A), vemos que essa
deu origem a duas manchas, sendo elas, as
manchas A e B. Analisando a mancha A,
vemos que essa teve uma maior afinidade
com o eluente polar, obtendo um Rf igual a
0,63.
Analisando a mancha B, vemos que essa,
teve uma afinidade menor com com a fase Fonte: Autores
móvel, se comparada a mancha A, obtendo
um valor de Rf igual a 0,47, o que demonstra Após a obtenção do cromatograma, as
uma polaridade menor que a substância manchas foram nomeadas e foram aferidas
presente na mancha A. suas distâncias, da linha de aplicação para o
Já a mancha C derivada do ácido cálculo do Fator de Retenção (Rf) de cada
acetilsalicílico (AAS), teve uma evolução mancha, demonstrado a seguir.
maior no cromatograma, obtendo um Rf igual
a 0,71, o que demonstra uma afinidade maior 𝑅𝑓𝑨 =
𝑑𝑐
=
2,7
= 0, 73
com a fase móvel e de igual forma, uma 𝑑𝑠 3,7

polaridade similar. 𝑑𝑐 1,7


Já a mancha D originária da Cafeína (C), 𝑅𝑓𝑩 = 𝑑𝑠
= 3,7
= 0, 46
não teve uma evolução tão acentuada, quanto
a mancha oriunda do (AAS), obtendo um 𝑑𝑐 2,8
𝑅𝑓𝑪 = = = 0, 76
valor de Rf igual a 0,58, o que demonstra uma 𝑑𝑠 3,7
afinidade levemente maior com a fase
𝑑𝑐 2,1
estacionária e em consequência uma 𝑅𝑓𝑫 = 𝑑𝑠
= 3,7
= 0, 57
polaridade levemente menor que o (AAS).
Já no segundo ensaio, cujo eluente foi Observando o comportamento da
tolueno : clorofórmio : ácido acético glacial : substância desconhecida (A), vemos que essa
metanol 12:5:1,8:0,1, foi obtido o seguinte novamente deu origem a duas manchas, sendo
cromatograma: elas, as manchas A e B. Analisando a mancha
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A, vemos que essa teve uma maior afinidade Imagem 9: Fórmula Molecular da
com o eluente de polaridade média, obtendo 𝞺-toluidina.
um Rf igual a 0,73.
Analisando a mancha B, vemos que essa,
teve uma afinidade menor com com a fase
móvel, se comparada a mancha A, obtendo
um valor de Rf igual a 0,46, o que demonstra
uma polaridade maior que a substância
presente na mancha A.
Já a mancha C derivada do ácido
acetilsalicílico (AAS), teve uma evolução
maior no cromatograma, obtendo um Rf igual
a 0,76, o que demonstra uma afinidade maior
com a fase móvel e de igual forma, uma
polaridade similar.
Já a mancha D originária da Cafeína (C), Fonte:https://www.chemsynthesis.com/base/c
não teve uma evolução tão acentuada, quanto hemical-structure-3482.html
a mancha oriunda do (AAS), obtendo um
valor de Rf igual a 0,57, o que demonstra uma No primeiro ensaio, cujo eluente foi
afinidade levemente maior com a fase cloreto de metileno puro, uma substância de
estacionária e em consequência uma características apolares, foi obtido o seguinte
polaridade maior que o (AAS). cromatograma:
Já na terceira etapa do experimento foram
analisadas as substâncias 𝛃-naftol e Imagem 10: Cromatograma obtido das
𝞺-toluidina. Nesse caso foram realizados 3 substâncias 𝛃-naftol e 𝞺-toluidina no eluente
ensaios nos quais foram utilizados os cloreto de metileno puro.
eluentes, cloreto de metileno puro, cloreto de
metileno contendo 25% de acetato de etila e
cloreto de metileno contendo 50% de acetato
de etila.

Imagem 8: Fórmula Molecular do 𝛃-naftol.

Fonte:https://www.pngwing.com/pt/free-png-
iqwve
Fonte: Autores
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Após a obtenção do cromatograma, as cloreto de metileno contendo 25% de acetato


manchas foram nomeadas e foram aferidas de etila.
suas distâncias, da linha de aplicação para o
cálculo do Fator de Retenção (Rf) de cada
mancha, demonstrado a seguir.

𝑑𝑐 2,6
𝑅𝑓𝑨 = 𝑑𝑠
= 3,8
= 0, 68

𝑑𝑐 3,4
𝑅𝑓𝑩 = 𝑑𝑠
= 3,8
= 0, 89

𝑑𝑐 3,0
𝑅𝑓𝑪 = 𝑑𝑠
= 3,8
= 0, 79

A mancha A originária do 𝛃-naftol,


apresentou uma coloração acobreada, bem
como um Rf de 0,68, o que demonstra uma
afinidade menor com o eluente, indicando
uma polaridade levemente maior, se Fonte: Autores
comparada as demais manchas apresentadas.
A 𝞺-toluidina, no entanto, diferentemente Após a obtenção do cromatograma, as
do que será apresentado nos cromatogramas manchas foram nomeadas e foram aferidas
seguintes, apresentou nesse caso duas suas distâncias, da linha de aplicação para o
manchas, sendo elas as manchas B e C, o que cálculo do Fator de Retenção (Rf) de cada
pode ter ocorrido devido a alguma mancha, demonstrado a seguir.
contaminação durante o procedimento
experimental. 𝑑𝑐 3,4
Podemos verificar, no entanto, que ambas 𝑅𝑓𝑨 = 𝑑𝑠
= 3,6
= 0, 94
as manchas, B e C, apresentaram uma
mobilidade maior na fase móvel se 𝑅𝑓𝑩 =
𝑑𝑐
=
3,3
= 0, 92
𝑑𝑠 3,6
comparadas com a mancha A, apresentando
um Rf igual a 0,89 e 0,79, respectivamente, o
A mancha A originária do 𝛃-naftol,
que indica uma afinidade maior com esta fase,
apresentou novamente uma coloração
sendo assim temos que a 𝞺-toluidina,
acobreada, bem como um Rf de 0,94 o que
apresenta uma polaridade levemente menor
demonstra, desta vez, uma afinidade maior
que o 𝛃-naftol.
com o eluente, que possui dessa vez uma
Já no segundo ensaio, cujo eluente foi o
polaridade levemente mais elevada.
cloreto de metileno contendo 25% de acetato
A 𝞺-toluidina, desta vez, apresentou uma
de etila, sendo o acetato uma substância de
única mancha B, de coloração amarelada,
caráter polar, sendo assim, temos um eluente
apresentando uma mobilidade similar àquela
com uma polaridade levemente maior do que
apresentada pela mancha A, exibindo um Rf
a apresentada na primeira parte da terceira
igual a 0,92, o que indica uma afinidade
etapa, para esse teste foi obtido o seguinte
elevada com a fase móvel.
cromatograma:
É perceptível também que ambas as
substâncias apresentaram um Rf maior nesse
Imagem 11: Cromatograma obtido das
segundo teste, do que àqueles apresentados na
substâncias 𝛃-naftol e 𝞺-toluidina no eluente
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primeira fase da terceira etapa, o que nos eluente, que possui dessa vez uma polaridade
mostra que ambas as substâncias tiveram ainda mais elevada.
maior afinidade com o eluente composto de A 𝞺-toluidina apresentou, novamente, uma
25% de acetato de etila. única mancha B, de coloração amarelada, que
Já na terceira e última etapa do ensaio, demonstrou uma mobilidade menor, àquela
cujo eluente foi o cloreto de metileno apresentada pela mancha A, exibindo um Rf
contendo 50% de acetato de etila, foi obtido o igual a 0,92, o que indica uma afinidade
seguinte cromatograma: elevada com a fase móvel, no entanto, não tão
elevada quanto a afinidade apresentada pelo
Imagem 12: Cromatograma obtido das 𝛃-naftol.
substâncias 𝛃-naftol e 𝞺-toluidina no eluente
cloreto de metileno contendo 50% de acetato 3. CONCLUSÕES
de etila.
Observando a primeira parte do
experimento, verificamos que é possível
utilizar a cromatografia, a fim de separar
diferentes substâncias de uma composto,
como no caso da clorofila, que apresentam
diferentes características quanto a sua
polaridade.
Para esse ensaio, também podemos
concluir, que há uma variabilidade entre as
interações moleculares apresentadas por esses
compostos, dessa forma podemos ordená-las
de acordo com a força dessas interações, de
maneira decrescente, da seguinte forma:

Clorofila b (E) > Clorofila a (D) > Xantofilas


(C) > 𝛃-Caroteno (A) = Carotenoide (B)
Fonte: Autores
Já para a segunda etapa do experimento,
Após a obtenção do cromatograma, as podemos concluir que a cafeína possui uma
manchas foram nomeadas e foram aferidas polaridade superior ao ácido acetilsalicílico.
suas distâncias, da linha de aplicação para o Também é perceptível que a amostra
cálculo do Fator de Retenção (Rf) de cada desconhecida apresentou duas manchas, ou
mancha, demonstrado a seguir. seja é formada por duas substâncias distintas,
verificando os resultados de Rf apresentados
𝑑𝑐 3,6
𝑅𝑓𝑨 = = = 0, 97 em ambos os ensaios, tanto para a acetona,
𝑑𝑠 3,7
quanto para o tolueno, vemos que a mancha A
𝑑𝑐 3,4 apresentou um valor de Rf similar ao da
𝑅𝑓𝑩 = 𝑑𝑠
= 3,7
= 0, 92 cafeína, mancha D, já a mancha B apresentou
um Rf similar ao apresentado pela mancha C,
A mancha A originária do 𝛃-naftol, do AAS.
apresentou mais uma vez a coloração Dessa forma podemos concluir que a
acobreada, bem como um Rf de 0,97 o que amostra desconhecida é provavelmente um
demonstra, uma afinidade maior com o composto formado pelas duas substâncias,
cafeína e ácido acetilsalicílico.
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Já na terceira etapa foi possível observar não deu tempo para arrumar as referências, mas
que, à medida que a polaridade do eluente é acho que ele não vai descontar muito por isso,
aumentada, verifica-se uma mobilidade tomara que não, desculpa Alex, deveria ter feito
diferente das manchas apresentadas pelas antes já, passei muito tempo discutindo o
experimento, mas acho que vai dar boa
substâncias analisadas.
Conforme fomos aumentando a
concentração de acetato de etila, percebemos
que a mancha de 𝛃-naftol, corre mais pelo
cromatograma, o que também é perceptível
pelo aumento no valor no Rf, ou seja, é um
composto com polaridade maior.
Já a 𝞺-toluidina, apresentou um
comportamento, oposto, embora não seja
possível analisar de forma adequada a
primeira etapa dessa terceira fase, devido a
uma possível contaminação, podemos
verificar que houve um decréscimo no valor
do Rf da mancha B, se compararmos a
segunda e a terceira fase dessa terceira etapa,
o que demonstra que essa substância possui
uma polaridade menor se comparada ao
𝛃-naftol.

4. REFERÊNCIAS

Pavia, D.; Lampman, G. M.; Kriz, G. S.; Engel, R.


G. Química Orgânica Experimental, Técnicas
em escala pequena. Segunda Edição, Porto
Alegre: Bookman, 2009.

chrome-extension://efaidnbmnnnibpcajpcglclefind
mkaj/https://www.oswaldocruz.br/download/ficha
s/Acetato%20de%20etila2003.pdf

[1]chrome-extension://efaidnbmnnnibpcajpcglclef
indmkaj/https://www.fcav.unesp.br/Home/departa
mentos/tecnologia/luciamariacararetoalves/aula-8-
--fotossintese-fase-luminosa-2022.pdf

Ensaio de cromatográfia de Clorofila.


Disponível em:<
https://www.researchgate.net/figure/Figura-6-Vist
a-de-la-cromatografia-de-la-hoja-de-espinaca-dest
acando-la-clorofila-a-y_fig4_281203990>.
Acesso em: 04 out. 22.
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QUESTIONÁRIO 9-

1 - O recobrimento da cuba cromatográfica é


feito com o papel filtro para que resultados
melhores sejam obtidos no experimento. O
papel auxilia na saturação da cuba pelos
vapores com a mesma composição da fase
móvel, o eluente.

2 - Não necessariamente, já que duas


substâncias distintas podem apresentar o
𝞺-toluidina 𝛃-naftol
mesmo valor para o Rf. Para não existirem
dúvidas, faz-se a aplicação dos dois
compostos na mesma placa e observa-se o
comportamento. Caso o valor de Rf seja o
mesmo, provavelmente as duas substâncias
são idênticas.

3 - Para que a fase móvel, o eluente, arraste as


substâncias adsorvidas na fase estacionária, a Cloreto de metileno Acetato de etila
interação com o solvente deve ser mais forte
em comparação à interação com a placa de À medida que se aumentava a concentração
sílica gel. As forças intermoleculares entre os de acetato de etila na mistura do solvente,
dois são semelhantes. obtinha-se um valor maior de Rf tanto para a
PTA quanto para o 𝛃-naftol. Porém o melhor
5 - Caso o método escolhido de revelação das resultado foi com o solvente sendo o cloreto
manchas seja o por vapor de iodo, a análise e de metileno puro, já que separou a p-toluidina
visualização poderá apresentar problemas em dois compostos, o que não ocorreu nas
com manchas. Esta técnica é utilizada para outras soluções de cloreto de metileno:acetato
revelação de digitais, logo aparecerão digitais de etila, de concentração 75:25 e 50:50, onde
pelo manuseio com as mãos. se observou uma mancha maior e próxima da
linha superior da placa utilizada na separação.
6 - O método mais comum é a revelação pela Ao se tratar da PTA, cuja polaridade é maior
luz UV, onde a placa é colocada dentro de que a do 𝛃-naftol, e ao se adicionar um
uma câmara cuja luz emitida pertence a faixa composto também mais polar na mistura, o
espectral do ultravioleta. Também pode ser acetato de etila, a interação entre o eluente e
utilizado o vapor de iodo, cuja reação com os compostos se torna mais forte, logo
vários compostos orgânicos forma complexos, provocando uma ascensão maior na placa.
manchas nas colorações amarelo ou café.
10 - No experimento realizado, trabalhou-se
7 - As aplicações podem ser listadas como: apenas com éter de petróleo com acetato de
verificar a identidade de 2 compostos, etila, não com acetona. Ao que se pode
determinar o número de compostos numa perceber com o resultado da cromatografia
mistura, acompanhar o desenvolvimento de por camada delgada da clorofila em AcOEt :
uma reação, determinar a pureza de um éter de petróleo na proporção 2:3 (o que seria
composto, entre outros. 40:60), este eluente utilizado separou com
grande êxito os compostos da clorofila. Cada
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mancha na fase estacionária se apresentou alumina, enquanto na placa de sílica gel o


bem definida, demonstrando assim o composto subirá por capilaridade e poderá ser
potencial deste eluente na utilização do separado.
mesmo para a cromatografia em coluna.

11 -

𝞺-toluidina AAS

a) O caráter básico da PTA irá influenciar na


reação com o meio gástrico que possui um pH
muito ácido. O seu par de elétrons livres
auxilia na ionização neste meio e, sendo
assim, mais solúvel em água. Ao contrário do
composto anterior, o caráter ácido do AAS
fará com que ele seja mais solúvel no acetato
de etila.

b) O pH do estômago sendo básico fará com


que o AAS esteja ionizado, sendo assim mais
solúvel em água. O contrário se aplica ao
PTA, sendo este mais solúvel em acetato de
etila.

c) A importância se deve ao fator de absorção


de cada fármaco e da sua estabilidade em
cada meio. Caso o composto não seja
ionizável em meio aquoso, a eficácia e o
poder de atuação do medicamento no
organismo serão prejudicados.

12 - O azul de metileno, pelo seu caráter


básico, irá reagir com o caráter ácido da placa
de sílica gel, ficando retido no substrato,
enquanto que na placa de alumina, pela sua
natureza básica, o composto ascenderá na
coluna e poderá ser separado. Por outro lado,
o alaranjado de metila, caracterizado pela
natureza ácida, ficará retido na placa de

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