João Pereira – 103534 – Biologia e Geologia

Rafaela Monteiro – 107533 – Biologia e Geologia

Registos - Trabalho prático 2

1. Registe, num desenho, o aspeto da coluna de cromatografia numa fase inicial da

separação e numa fase intermédia.

Aspeto da coluna de cromatografia numa fase inicial da separação e numa

fase intermédia, respetivamente.
2. Registe, num desenho, o aspeto das placas de TLC (2.2.2 C e 2.2.2 D) antes e depois da
eluição.

3. Calcule os valores de Rf da acetofenona e da vanilina e comente a sua ordem de eluição

com base na polaridade dos compostos.
Fator de retardação da vanilina:
2,3
Rf= =0,51
4,5
Fator de retardação da acetofenona:
3,9
Rf= =0,87
4,5
 Segundo os cálculos a acetofenona tem um fator de retardação maior, sendo esta a primeira a
sofrer eluição devido à sua polaridade mais baixa. A vanilina tem uma polaridade maior que a
da acetofenona logo, sofre eluição depois.
4. Identifique, tanto quanto lhe for possível, os componentes das misturas analisadas (2.2.2
C e 2.2.2 D).
Na mistura analisada em 2.2.2 C) é possível distinguir dois componentes distintos, sendo estes,
corantes correspondentes à família das clorofilas (apresentam cor verde) e da família dos
carotenoides (apresentam uma cor amarela).
Na mistura analisada em 2.2.2 D) podemos concluir a mistura utilizada é constituída por
acetofenona e vanilina. A acetofenona encontra-se na mistura em concentrações superiores às da
vanilina.
5. Compare as duas técnicas cromatográficas que utilizou relativamente à eficiência de
cada uma delas.
As duas técnicas cromatográficas utilizadas foram, a cromatografia em camada fina e a
cromatografia em coluna. Depois de realizar a atividade pudemos concluir que a cromatografia
em camada fina tem um grau de eficiência superior ao da cromatografia em coluna, devido ao
facto de que nesta fomos capazes de identificar e separar um total de 6 componentes distintos
enquanto, em uma cromatografia em coluna apenas nos foi possível isolar, de forma pura, um
componente, tendo obtido também uma mistura de 4 mais compostos.
Uma forma de conseguir melhorar a eficiência da técnica de cromatografia em coluna seria usar
um mais gradual aumento de polaridade no eluente (permite que mais componentes sejam
afetados por este eluente separadamente, facilitando a sua recolha e separação) e/ou o uso de
uma coluna mais alta (permite uma maior distância entre componentes).