Impresso por Júlia T., E-mail Julia_tironi@hotmail.com para uso pessoal e privado.
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QMC 5230 –2018.1 – Turma 05503
Experimento - Cromatografia
Alana Milan Damo, Nátaly Neves, Mayra de Souza.
Palavras Chave: fases, misturas, separação, técnica, eluente, solubilidade.
Objetivos
Aprender as técnicas básicas para o
desenvolvimento de cromatografia em camada
delgada e cromatografia em coluna, analisar e
identificar os componentes coloridos extraídos de amostras, e sim, interagir com elas. Ele é a fase
folhas verdes e os da cenoura, e ainda identificar o móvel e por isso, promove a separação dos
efeito do solvente no valor do Rf para dois componentes)
compostos.
Introdução
A cromatografia é uma técnica que tem por
finalidade geral a identificação de substâncias e de
separação/ purificação de misturas. Usando
propriedades como a solubilidade. ¹ Esta técnica
envolve o equilíbrio do analito entre duas fases
químicas ou físicas
Para o processo de separação de misturas, a
mesma passa por duas fases, sendo uma estacionária
(fixa),que é imobilizada em uma coluna ou sobre
uma superfície plana e outra móvel, que é composta
por um solvente ou combinação de solventes,
chamado eluente, os constituintes dessa mistura
interagem com as fases através de forças
intermoleculares e iônicas, fazendo assim a
separação, de acordo com a polaridade dos
componentes da amostra, eles ou interagiram mais
com a fase estacionária ou com a fase móvel ,na
maioria das vezes mais apolar que a fase
estacionária1,2
Outro importante constituinte da
cromatografia é Rf FATOR DE
RETARDAMENTO ou FATOR DE RETENÇÃO,
ocorre quando duas substâncias têm diferentes
constantes de distribuição Kc entre a fase
estacionária e a móvel, ele definido pela razão entre
as distâncias percorridas pela substância e pela fase
móvel, como descrito na equação abaixo:3
Data do experimento: 20/04/2018
dc:distância percorrida pelos componentes da
mistura
ds: distância percorrida pelo eluente(solvente,
entretanto, não irá dissolver ou reagir com as
2
A cromatografia em coluna é
considerada uma técnica de partição em que se
utiliza duas fases, sólida e líquida, ela pode ser usada
para fins preparativos, dependendo do tamanho da
coluna.1,3
Já a cromatografia em camada delgada é
uma técnica simples e rápida para análise qualitativa
de pequenas quantidades. Pode ser utilizada para
identificar componentes de uma mistura, determinar
a pureza de compostos e isolar componentes puros
de uma mistura. ¹
Resultados e Discussão
O primeiro procedimento a ser feito seria a
preparação das placas cromatográficas, porém como
é uma técnica mais demorada e complexa usamos
placas prontas.
Começamos então com a prática Separação
dos componentes de uma mistura: C  om um capilar
foi feito duas manchas a meio centímetro da base da
placa e separadas entre si, uma de extrato de folhas
verdes e outra de extrato de cenoura. Colocamos
então a placa em uma cuba cromatográfica contendo
eluente (acetato de etila :éter de petróleo 2:3),
sempre observando se o nível de eluente estava
abaixo das manchas na placa.
Após a eluição deixamos secar a placa e
utilizamos a câmara de luz U.V, e o vapor de iodo
para revelar a placa. O β-caroteno apareceu como
uma mancha amarelada, e esperava-se que teríamos
duas manchas de clorofilas A e B verde oliva e verde
azulada, mas só obtemos um tom de verde, devido a
mistura de outros compostos ou da fonte do extrato,
e após isso calculamos os Rf.
Rf do β-caroteno: 2.3/ 4.2 = 0,547
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QMC 5230 –2018.1 – Turma 05503
Rf da clorofila: 1.9/ 4.2 = 0,450
Figura 1 - Cromatografia na esquerda da clorofila e a
direita do β-caroteno.
Ao analisar os valores de Rf dos compostos
foi verificado que a clorofila ficou mais retida, isso
significa que ela é mais polar que o β-caroteno que
por sua vez conseguiu uma distância maior devido a
sua menor interação com a fase estacionária 2
Na segunda parte a prática realizada foi Efeito do
solvente no valor de Rf: e m uma placa de sílica gel
ativada aplicamos com um capilar, uma solução
diluída de β-naftol e outra de p-toluidina usando
como eluente os solventes:
a) cloreto de metileno puro; b) cloreto de metileno
contendo 25% de acetato de etila; c) cloreto de
metileno contendo 50% de acetato de etila. Após o
solvente atingir o topo da placa, retiramos a placa da
cuba, evaporar o solvente e colocamos as placas na
câmara de luz UV, e posteriormente no vapor de
iodo para revelar as manchas das substâncias, e
então calculamos o Rf de cada placa.
Rf β-naftol em cloreto puro: 1.2/3.8=0,31
Rf β-naftol em 25% de ac. etila: 2.1/2.6 =0,80
Rf β-naftol em 50% de ac. etila: 2.4/3.2= 0,75
Rf p-toluidina em cloreto puro: 2/3.8= 0,52
Rf p-toluidina em 25% de ac. etila:1.8/2.6=0.69
Rf p-toluidina em 50% de ac. etila: 2.7/3.2=0,84
Os Rf’s variam pela quantidade de acetato
de etila devido a polaridade do solvente, com o
aumento da polaridade ocorre uma maior interação
com grupos polares.
O solvente mais polar elui melhor
substâncias polares por melhor dissolve-los e
deslocar o equilíbrio da reação.
Data do experimento: 20/04/2018
Figura 2 - Cromatografia em graduação de acetato de
etila, na esquerda (1) é o β-naftol e na direita (2) o
p-toluidina
E a última parte foi comparar uma amostra
de cafeína pura com a cafeína obtida em um
experimento anterior. Como nossa amostra de
cafeína obtida em aula foi pouca, recortamos um
pedaço de filtro aonde ela estava retida e misturamos
com diclorometano para obter a solução de cafeína,
então seguindo o mesmo procedimento das outras
etapas, com um capilar aplicamos amostra de cada
cafeína na placa, uma em cada extremidade e
colocamos a placa na cuba cromatográfica com um
solvente constituído por CH2Cl2, MeOH e NH4OH
com concentrações de 85:10:5 respectivamente.
Aguardamos o solvente subir até a linha feita na
base, deixamos evaporar e em seguida levamos para
revelar as cores em vapor de iodo e na câmara de luz
UV. Para a solução de cafeína pura não conseguimos
obter nenhuma marca, devido a baixa concentração
da mesma, ou também pelo fato de que deveríamos
ter aplicado mais vezes a cafeína na placa. Então
obtemos o valor de Rf somente para nossa amostra
de cafeína, sendo de:
Rf: 4/4.6 = 0,86
Figura 3 - Cromatografia da cafeína, a esquerda amostra
de cafeína extraída no experimento anterior e na direita
amostra de cafeína presente no laboratório.
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QMC 5230 –2018.1 – Turma 05503 Data do experimento: 20/04/2018

Conclusões
Conclui-se assim que o experimento
realizado de cromatografia é mais uma técnica para
verificar se a amostra está presente ou ausente, com
o auxílio de métodos de detecção, como a luz UV.
Foi verificado também que o valor que Rf pode
aumentar ou diminuir de acordo com a mistura de
solvente, devido a polaridade da amostra e do
solvente.
________________
Ref..1
Material de apoio - Apostila de aula.
Ref..2
http://www.quimicasuprema.com/2013/12/o-que-e-c
romatografia.html

Ref..3
Técnicas básicas de cromatografia , M
 aria Luiza
Faria Salatino, 2016,USP, Baseado em
"Fundamentos de Cromatografia"C. H. Collins, G.
L. Braga, P. S. Bonato, 2006

Ref..4
Collins, C. H., Braga, G. L. Bonato, P. S.
Fundamentos de cromatografia. Ed. Unicamp. 7ª ed.
2006.