Somos a Mobius e o nosso propósito é fazer mais pela vida

Está em nosso DNA trabalhar a favor da vida, inovar e buscar processos de última geração.

Somos a Mobius Life Science e fazemos parte de um grupo sólido de empresas que atua

no mercado há mais de 25 anos. Trabalhamos no desenvolvimento das mais inovadoras e

tecnológicas soluções para o ramo da saúde. Para contribuir com a qualidade de vida de

milhares de pacientes, estruturamos, comercializamos e entregamos produtos e serviços

destinados ao segmento da medicina diagnóstica molecular. Com uma equipe formada por

multiprofissionais, entregamos as melhores soluções, aliadas às tendências e necessidades

do mercado, a fim de contribuir par a um diagnóstico médico cada vez mais rápido, preciso

e personalizado.
Com o objetivo de contribuir com a qualidade de vida de
milhares de pacientes, estruturamos, comercializamos e
entregamos produtos e serviços destinados ao segmento da
medicina diagnóstica molecular.

Com uma equipe formada por multiprofissionais, entregamos

as melhores soluções, aliadas às tendências e necessidades
do mercado, a fim de contribuir para um diagnóstico médico
cada vez mais rápido, preciso e personalizado.

Oferecemos as melhores
soluções para os nossos clientes

Foco principal em diagnóstico molecular;

Portfólio de alta qualidade e produtos registrados pela Anvisa;

Suporte técnico e personalizado para atender todas as necessidades dos

clientes;

Assessoria científica dedicada aos clientes;

Capacitação, treinamento e educação continuada;

Programa de manutenções preventivas eficientes, com objetivo de

reduzir os impactos nas rotinas de prestação de serviços e evitar ações
corretivas;

Logística ágil e segura para todo o Brasil.

 O complexo Mycobacterium tuberculosis (MTB)
é reconhecido como agente etiológico da tuberculose
(TB), uma doença granulomatosa progressiva que afeta
principalmente os pulmões (tuberculose pulmonar), com
capacidade menos frequente de afetar outros órgãos
(extrapulmonar) como intestino, meninges, ossos,
articulações, linfonodos, pele e outros tecidos1,2,3.
A TB possui transmissão aérea, através da inalação de
gotículas produzidas pela tosse, espirro ou fala de um
indivíduo com tuberculose ativa pulmonar ou laríngea.
Estas gotículas, que contêm os bacilos causadores da
infecção, podem manter-se em suspensão no ar por muitas
horas, sendo capazes de alcançar os alvéolos e causar a
chamada primo-infecção. Após exposição, apenas 10% dos
indivíduos infectados progridem para doença ativa.
Entretanto, o patógeno pode permanecer em estado
latente por muitos anos e ser reativado
causando a doença. O risco de
progressão para doença é maior logo
após a infecção inicial e aumenta
drasticamente para pessoas
co-infectadas com HIV/
AIDS ou outras condições
de comprometimento
imunológico. Outras
vias de transmissão,
como pele e
placenta, são raras e desprovidas de importância
epidemiológica1,2,3.
Estima-se que um indivíduo com doença pulmonar
ativa (baciloscopia positiva) infecte, em média, de 10
a 15 pessoas em um ano. O risco de transmissão está
diretamente relacionado com o tratamento, diminuindo
gradativamente após o início do esquema terapêutico,
e em geral, após 15 dias, encontra-se muito reduzido.
Assim, a realização de baciloscopia de controle tem papel
fundamental para avaliar a eficácia do tratamento como
para avaliar o risco para os contatos3,4.
Importante destacar que a infecção prévia pelo MTB não
confere imunidade e os casos de recidivas ou reinfecção
podem ocorrer, principalmente em regiões com alta
prevalência da doença. Até 2019, ano anterior a pandemia
causada pelo SARS-CoV-2, era considerada a doença
infecciosa com maior taxa de mortalidade no mundo, sendo
estimados pela Organização Mundial de Saúde (OMS) 1,3
milhões de mortes e 9,9 milhões de novos casos em 2020.
Os países em desenvolvimento são os mais vulneráveis,
com mais de 95% dos casos reportados5.
O Brasil está entre os 30 países de alta carga para TB e para
coinfecção TB-HIV, sendo, portanto, considerado prioritário
para o controle da doença pela Organização Mundial de
Saúde (OMS)5,6.

TB
Cambodja
Serra Leoa

Brasil Bangladesh
África do Sul
República Centro- Coreia do Norte
Angola
Africana
China Paquistão
Congo Azerbaijão
Congo Filipinas
Lesoto Bielorrússia
Etiópia Russia
Botsuana Namíbia Cazaquistão
India Vietnã
Camarões Tanzania Quirguistão
Chade Indonésia Peru
Zambia
Suazilândia Quênia Moldávia
Gana Moçambique Somália
Guiné-Bissau Myanma Tajiquistão
Malawi Nigériar Ucrânia
Uganda Papua-Nova Guiné Uzbequistão
Tailândia
Zimbábue

TB/HIV MDR-TB

Fonte: World Health Organization’s Global Tuberculosis Report, 2015.

Figura 1. As três listas globais de países com alta carga de TB, TB/HIV e MDR-TB usadas pela OMS durante o período
2016–2020.
 Tratamento
O tratamento da TB tem duração de seis meses
e consiste em duas fases, denominadas fase
de ataque e fase de manutenção. Na primeira
fase, é utilizada a associação de quatro fármacos
de primeira linha (isoniazida, rifampicina,
pirazinamida e etambutol) e, na segunda fase, são
utilizadas somente rifampicina e isoniazida. Apesar
de ser uma doença curável, com taxa de sucesso de
85%, o tratamento é de difícil adesão pelos pacientes
devido ao longo período e aos efeitos colaterais
decorrentes da toxicidade dos fármacos utilizados. Como
consequência destes fatores, há o desenvolvimento da
TB resistente1,2,3,4.
A resistência é uma grande ameaça ao controle da
doença, que é realizado por medidas e programas
estabelecidos por órgãos de saúde pública. Globalmente,
em 2018, a OMS estimou que 3,4% dos 7 milhões de
casos novos e 18% dos casos previamente tratados de
TB apresentavam multirresistência (MR), sendo que
destes casos, 9,5% apresentavam TB extensivamente
resistente (XR). O tratamento de TB-MR é complexo e
crítico, pois são administrados fármacos mais tóxicos e
menos eficazes por um período mínimo de 20 meses,
enquanto nos casos de TB-XR, este cenário torna-se mais
problemático devido à carência de opções terapêuticas.
Apenas 52% dos pacientes com TBMR e 28% dos
pacientes com TB-XR são tratados com sucesso (OMS,
2018)7.

Diagnóstico
O diagnóstico precoce, juntamente com a triagem sistemática As novas tecnologias para a detecção rápida de resistência
de contatos e grupos de risco, são os componentes principais da aos antimicrobianos anti-TB tornaram-se, portanto, uma
“End TB Strategy” pela Organização Mundial de Saúde. Apesar prioridade na pesquisa e implementação. Neste
de programas governamentais de controle da tuberculose, nem cenário, os métodos moleculares proporcionam um
todos os pacientes infectados têm acesso ao diagnóstico inicial rápido diagnóstico, além de possibilitarem
adequado e há poucos métodos de diagnóstico disponíveis, a execução diretamente de amostras
considerados clássicos já que estão há décadas em rotina. Estes clínicas, potencial de alto rendimento
métodos apresentam sensibilidade variável e podem levar até e a diminuição dos requisitos de
12 semanas para o resultado, acarretando um longo tratamento biossegurança laboratorial8,9.
ineficaz e contínua transmissão da doença8,9.

Hibridização de sonda em linha

Os ensaios moleculares baseados em sondas em linha (LPA (Hain Lifescience, Nehren,
– do inglês Line Probe Assay) são uma família de testes Germany) para a detecção rápida
baseados em fitas de DNA que determinam o perfil de e simultaneamente da resistência
resistência aos farmacos através do padrão de ligação de e/ou a sensibilidade a rifampicina e
amplicons (fragmentos de DNA amplificados) com sondas isoniazida, e em 2016, recomendou o uso
do tipo selvagem (WT) e sondas visando as mutações (MUT) do GenoType MTBDRsl® (Hain Lifescience,
mais comuns associadas a resistência aos antimicrobiandos Nehren, Germany) para detecção de resistência a drogas de
de primeira e segunda linha do tratamento10. segunda linha, como fluoroquinolonas e aminoglicosídeos,
para os casos de TB resistente a rifampicina ou TB
Em 2008, a OMS endossou o uso do GenoType MTBDRplus®
multirresistente11,12,13.

Referências
1. Forbes, B.A., Hall, G.S., Miller, M.B., et al. Practice Guidelines
for Clinical Microbiology Laboratories: Mycobacteria. Clin
Microbiol Rev. 2018;31(2): pii: e00038-17.
2. Lawn, S.D., Zumla, A.I. Tuberculosis. Lancet. 2011;378:
57-72.
3. Guinn KM, Rubin EJ. 2017. Tuberculosis: just the FAQs. mBio
8:e01910-17.
4. Natarajan A, Beena PM, Devnikar AV, Mali S. A systemic
review on tuberculosis. Indian J Tuberc. 2020 Jul;67(3):295-
311.
5. Global tuberculosis report 2021. Geneva: World Health
Organization; 2021.
6. Global tuberculosis report 2015. Geneva: World Health
Organization; 2015.
7. Global tuberculosis report 2018. Geneva: World Health
Organization; 2018.
8. Pai M, Nicol MP, Boehme CC. 2016. Tuberculosis
diagnostics: state of the art and future directions. Microbiol
Spectrum 4(5):TBTB2-0019-2016.
9. Poeta P, Silva V, Guedes A, Eduardo Pereira J, Cláudia Coelho
A, Igrejas G. Tuberculosis in the 21th century: Current status
of diagnostic methods. Exp Lung Res. 2018 Sep;44(7):352-
360.
10. Hain Lifescience. GenoType MTBDRplus® e GenoType
MTBDRsl®, 2021. Disponível em: https://mobiuslife.com.br/
wp-content/uploads/2018/04/hain.pdf# page=10.
11. Global Laboratory Initiative. Line probe assays for
drugresistant tuberculosis detection: Interpretation and
reporting guide for laboratory staff and clinicians. 2018.
12. WHO. The use of molecular line probe assays for the
detection of resistance to isoniazid and rifampicin. Geneva,
World Health Organization, 2016a.
13. WHO. The use of molecular line probe assays for the
detection of resistance to second-line anti-tuberculosis
drugs. Policy guidance. Genebra, Suíça: World Health
Organization 2016.
Linha Genotype
Guia Ilustrado
Área de Extração
• Colocar jaleco e luvas. contida no kit Genolyse) para todas as amostras e
• Descontaminar área de trabalho com solução de controle negativo. Usar 100 µL de tampão de lise
Hipoclorito de Sódio 1,5% recém diluída. (A-LYS) e 2 µL de IC por amostra.
• Caso o controle interno de DNA (IC) acompanhe o Kit • Se um controle negativo for incluído, usar 100 µL
Genotype, preparar mistura A-LYS/IC (solução A-LYS de A-LYS ou mistura A-LYS/IC e continuar com o
procedimento do kit Genolyse, passo 3.

Extração de DNA
Amostra Inicial
GenoType MTBDRplus/sl VER 2.0, GenoType
CMdirect
3 - Incubar por 5 minutos a 95°C em banho
Amostras clínicas: Usar 500 µL de amostra
maria, realizar breve spin.
clínica descontaminada
ATENÇÃO: Pré-aquecer
GenoType MTBDRplus/sl VER 2.0, GenoType
Mycobacterium CM VER 2.0/AS, GenoType
MTBC, GenoType NTM-DR
4 - Adicionar 100 µL de tampão de
Neutralização (A-NB) e agitar em vórtex
Bactérias com crescimento em meio líquido: por 5 segundos
Usar 1 mL de cultura

5 - Centrifugar por 5 minutos na velocidade

Bactérias com crescimento em meio sólido:
máxima da centrífuga.
Coletar com alça de inoculação, suspender
em 100 µL de tampão A-LYS ou mistura
A-LYS/IC, agitar em vórtex e continuar com o
procedimento do kit Genolyse, passo 3.
6 - Solução de DNA, para armazenamento
por longos períodos, transferir o
sobrenadante em um novo tubo e
armazenar a -20°C.
Extração de DNA com Genolyse

1 - Centrifugar por 15 minutos a 10.000xg em

uma centrífuga com rotor livre de aerossóis,
remover o sobrenadante cuidadosamente.

2 - Adicionar ao pellet 100 µL de tampão

A-LYS ou mistura A-LYS/IC e agitar em vórtex.

Descontaminar pipetas, racks de ponteiras e área de trabalho com solução de Hipoclorito de Sódio 1,5% recém diluída.
Por favor, certifique-se que o procedimento descrito neste guia corresponde com a instrução de uso que acompanha o kit recebido.
Linha Genotype
Guia Ilustrado
Área de Pré-PCR
• Colocar jaleco e luvas. abertos, fechar a tampa do tubo após cada passo de
• Descontaminar área de trabalho com solução de pipetagem.
Hipoclorito de Sódio 1,5% recém diluída. • Sempre que abrir um novo frascos de AM-A ou AM-B,
• Evitar manuseio e pipetagem com os frascos realizar as aliquotas necessárias e armazenar a -20°C

PCR Master Mix

Preparo de Master Mix (Por Amostra)

IMPORTANTE
• Sempre usar Master mix “fresca”, preparada no
momento do uso.
• Não usar vortex.
AM-A AM-B
• Calcular o número de amostras e controles que serão
usados e preparar a Master Mix de acordo.
10 µL 35 µL Misturar
AM-A AM-B Cuidadosamente

Preparo de Alíquotas

45 µL de Master Mix por tubo

Adicionar solução de DNA em cada alíquota de Master Mix

IMPORTANTE
• Os volumes descritos são aplicáveis para DNA extraído com o Kit Genolyse
• Para o controle negativo usar 5µL de água ou controle negativo extraído ao invés da solução de DNA
• Caso um controle positivo seja adicionado, pipetar 5µL de controle positivo em uma das aliquotas de Master Mix.

5µL de solução de DNA + 45µL de Master Mix Mistura de amplificação

Descontaminar pipetas, racks de ponteiras e área de trabalho com solução de Hipoclorito de Sódio 1,5% recém diluída.
Por favor, certifique-se que o procedimento descrito neste guia corresponde com a instrução de uso que acompanha o kit recebido.
Linha Genotype
Guia Ilustrado - GT45
Área de Hibridização e Detecção
• Colocar jaleco e luvas. temperatura ambiente e HYB e STR a 45°C.
• Descontaminar área de trabalho com solução de • Diluir, de acordo com a quantidade necessária, os
Hipoclorito de Sódio 1,5% recém diluída. reagentes CON-C e CON-D em diluição 1:100 e os
• Pré-aquecer soluções RIN e água destilada a reagentes SUB-C e SUB-D em diluição 1:100.

Hibridização

Usar o Twincubator com o programa

adequado para o procedimento de
hibridização e detecção. STR

1 mL STR Incubar por 15 minutos

a 45°C. Remover STR
completamente.

+
DEN

20 µL DEN mais Misturar e incubar por 5 minutos

20 µL amplicon em temperatura ambiente.

RIN

HYB 1 mL RIN Incubar por 1 minuto em

temperatura ambiente.
Remover RIN completamente.

1 mL HYB Adicionar e misturar

cuidadosamente.

Inserir DNA-STRIP no poço.

Incubar por 30 minutos a 45°C. Remover reagente HYB
completamente.

Descontaminar pipetas, racks de ponteiras e área de trabalho com solução de Hipoclorito de Sódio 1,5% recém diluída.
Por favor, certifique-se que o procedimento descrito neste guia corresponde com a instrução de uso que acompanha o kit recebido.
Linha Genotype
Guia Ilustrado - GT45
Área de Hibridização e Detecção
• Colocar jaleco e luvas. temperatura ambiente e HYB e STR a 45°C.
• Descontaminar área de trabalho com solução de • Diluir, de acordo com a quantidade necessária, os
Hipoclorito de Sódio 1,5% recém diluída. reagentes CON-C e CON-D em diluição 1:100 e os
• Pré-aquecer soluções RIN e água destilada a reagentes SUB-C e SUB-D em diluição 1:100.

Detecção
10 µL CON - C + 1 mL CON - D = conjugado diluído

H2O

1 mL H2O Enxaguar com água por

1 minuto. Remover água
completamente.
10 µL SUB - C + 1 mL SUB - D = substrato diluído
1 mL de de Incubar por 30 minutos
conjugado em temperatura ambiente.
diluído Remover conjugado
completamente.

RIN
1 mL de Incubar por 3-20 minutos
substrato em temperatura ambiente.
diluído Remover substrato
completamente.
1 mL RIN Incubar por 1 minuto em
temperatura ambiente.
Remover reagente RIN
completamente.

H2O

RIN
1 mL H2O Parar reação lavando duas
vezes com água.
1 mL RIN Incubar por 1 minuto em
temperatura ambiente.
Geno

Remover DNA-STRIP da
Remover reagente RIN
2

bandeja e secar em papel

3

completamente. absorvente, analisar os

resultados utilizando o
template.

Descontaminar pipetas, racks de ponteiras e área de trabalho com solução de Hipoclorito de Sódio 1,5% recém diluída.
Por favor, certifique-se que o procedimento descrito neste guia corresponde com a instrução de uso que acompanha o kit recebido.
Linha Genotype
Guia Ilustrado - GTFast¹
Área de Hibridização e Detecção
• Colocar jaleco e luvas. • Diluir, de acordo com a quantidade necessária, os
• Descontaminar área de trabalho com solução de reagentes CON-C e CON-D em diluição 1:100 e os
Hipoclorito de Sódio 1,5% recém diluída. reagentes SUB-C e SUB-D em diluição 1:100.
• Pré-aquecer soluções RIN e água destilada a
temperatura ambiente e HYB e STR a 45°C.

Hibridização

Usar o Twincubator com o programa

adequado para o procedimento de
hibridização e detecção.
STR

1 mL STR Incubar por 15 minutos

a 45°C. Remover STR
completamente.
+
DEN

20 µL DEN mais Misturar e incubar por 5 minutos

20 µL amplicon em temperatura ambiente.

HYB

1 mL HYB Adicionar e misturar

cuidadosamente.

Inserir DNA-STRIP no poço.

Incubar por 30 minutos a 45°C. Remover reagente HYB
completamente.
Linha Genotype
Guia Ilustrado - GTFast¹
Área de Hibridização e Detecção
• Colocar jaleco e luvas. temperatura ambiente e HYB e STR a 45°C.
• Descontaminar área de trabalho com solução de • Diluir, de acordo com a quantidade necessária, os
Hipoclorito de Sódio 1,5% recém diluída. reagentes CON-C e CON-D em diluição 1:100 e os
• Pré-aquecer soluções RIN e água destilada a reagentes SUB-C e SUB-D em diluição 1:100.

Detecção
10 µL CON - C + 1 mL CON - D = conjugado diluído 10 µL SUB - C + 1 mL SUB - D = substrato diluído

1 mL de de Incubar por 20 minutos

conjugado a 37°C. Remover
diluído conjugado 1 mL de Incubar por 20 minutos
completamente. substrato a 37°C. Remover
diluído conjugado
completamente.

RIN
H2O

1 mL RIN Incubar por 1 minuto em

temperatura ambiente. 1 mL H2O Parar reação lavando duas
Remover reagente RIN vezes com água.
completamente.
Geno

Remover DNA-STRIP da 2

bandeja e secar em papel

3

absorvente, analisar os
H2O resultados utilizando o
template.

1 mL H2O Enxaguar com água por

1 minuto. Remover água
completamente.

Descontaminar pipetas, racks de ponteiras e área de trabalho com solução de Hipoclorito de Sódio 1,5% recém diluída.
Por favor, certifique-se que o procedimento descrito neste guia corresponde com a instrução de uso que acompanha o kit recebido.
¹para kits Genotype MTBDRsl usar apenas protocolo do Genotype 45 (pág. 02)
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