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A fase pré-analítica é responsável por 70% dos erros ocorridos no laboratório, ela engloba a
indicação do exame, redação da solicitação, leitura e interpretação da solicitação, transmissão de
eventuais instruções de preparo do paciente, avaliação do atendimento às instruções previamente
transmitidas e procedimentos de coleta, acondicionamento, transporte e preservação da amostra
biológica até o momento da efetiva realização do exame.
Uma das principais finalidades dos resultados dos exames laboratoriais é reduzir as dúvidas que
a história clínica e o exame físico fazem surgir no raciocínio médico. Para que o laboratório
clínico possa atender, adequadamente, a este propósito, é indispensável que o preparo do
paciente, a coleta, o transporte e a manipulação dos materiais a serem examinados obedeçam a
determinadas regras.
Variação cronobiológica:
Gênero:
Além das diferenças hormonais específicas e características de cada sexo, alguns outros parâmetros
sanguíneos e urinários se apresentam em concentrações significativamente distintas entre homens
e mulheres, em decorrência das diferenças metabólicas e da massa muscular, entre outros fatores.
Em geral, os intervalos de referência para estes parâmetros são específicos para cada gênero.
Idade:
Posição:
Atividade física:
O esforço físico pode causar aumento da atividade sérica de algumas enzimas, como a
creatinoquinase, a aldolase e a aspartato aminotransferase, pelo aumento da liberação celular. Esse
aumento pode persistir por 12 a 24 horas após a realização de um exercício. Alterações significativas
no grau de atividade física, como ocorrem, por exemplo, nos primeiros dias de uma internação
hospitalar ou de imobilização, causam variações importantes na concentração de alguns parâmetros
sanguíneos. Após uma coleta de sangue o intervalo de tempo recomendado para iniciar a prática de
um exercício físico ou retornar as atividades habituais, é importante ressaltar que cada caso deve
ser avaliado individualmente, ficando a decisão final para o próprio paciente, ou a critério e
orientação médica. A ingestão de alimentos é necessária para encerrar o estado de jejum, antes da
prática esportiva, sob o risco de hipoglicemia durante esta atividade.
Jejum:
Dieta:
A dieta a que o indivíduo está submetido, mesmo respeitado o período regulamentar de jejum, pode
interferir na concentração de alguns componentes, na dependência das características orgânicas do
próprio paciente. Alterações bruscas na dieta, como ocorrem, em geral, nos primeiros dias de uma
internação hospitalar, exigem certo tempo para que alguns parâmetros retornem aos níveis basais.
A ingestão de café não é permitida antes da coleta, a cafeína pode induzir a liberação de epinefrina,
que estimula a neoglicogênese, com consequente elevação da glicose no sangue. Além disto, pode
elevar a atividade de renina plasmática e a concentração de catecolaminas.
Este é um item amplo e inclui tanto a administração de substâncias com finalidades terapêuticas
como as utilizadas para fins recreacionais. Ambos podem causar variações nos resultados de
exames laboratoriais, seja pelo próprio efeito fisiológico in vivo ou por interferência analítica, in vitro.
Pela frequência, vale referir o álcool e o fumo. Mesmo o consumo esporádico de etanol pode causar
alterações significativas e quase imediatas na concentração plasmática de glicose, de ácido láctico e
de triglicérides, por exemplo. O uso crônico é responsável pela elevação da atividade da gama
glutamiltransferase, entre outras alterações. O tabagismo é causa de elevação na concentração de
hemoglobina, no número de leucócitos e de hemácias e no volume corpuscular médio; redução na
concentração de HDL-colesterol e elevação de outras substâncias como adrenalina, aldosterona,
antígeno carcinoembriônico e cortisol. O fumo não é permitido antes da coleta.
Aplicação do torniquete:
Como outras causas de variações dos resultados dos exames laboratoriais, devem ser lembradas
alguns procedimentos diagnósticos (a administração de contrastes para exames radiológicos ou
tomográficos, a realização de toque retal, de eletroneuromiografia) e alguns procedimentos
terapêuticos, como: hemodiálise, diálise peritoneal, cirurgias, transfusão sanguínea e infusão de
fármacos.
Infusão de fármacos:
É importante lembrar que a coleta de sangue deve ser realizada sempre em local distante da
instalação do cateter. Mesmo realizando a coleta em outro local, se possível, deve-se aguardar pelo
menos uma hora após o final da infusão para a realização da coleta.
Gel separador:
Algumas vezes, o sangue é colhido em tubos contendo uma substância gelatinosa com a finalidade
de funcionar como barreira física entre as hemácias e o plasma ou soro, após a centrifugação. Este
gel é um polímero com densidade específica de 1,040 contendo um acelerador da coagulação e
pode, eventualmente, liberar partículas que interferem com eletrodos seletivos e membranas de
diálise. Em alguns casos, pode causar variação no volume da amostra e interferir em determinadas
dosagens. Considerando que a composição deste gel varia entre os diferentes fornecedores, é
recomendável consultar o fabricante sobre a existência de estudos bem conduzidos demonstrando
ou excluindo possíveis limitações e interferências.
Hemólise:
Hemólise leve tem pouco efeito sobre a maioria dos exames, mas se for de intensidade significativa
causa aumento na atividade plasmática de algumas enzimas, como aldolase, aspartato
aminotransferase, fosfatase alcalina, desidrogenase láctica e nas dosagens de potássio, magnésio e
fosfato e pode ser responsável por resultados falsamente reduzidos de insulina, dentre outros.
Hemólise tem sido definida como a liberação dos constituintes intracelulares para o plasma ou soro,
quando ocorre a ruptura das células do sangue. Estes componentes podem interferir nos resultados
das dosagens de alguns analitos, é geralmente reconhecida pela aparência avermelhada do soro ou
plasma, após a centrifugação ou sedimentação, causada pela hemoglobina liberada quando da
ruptura dos eritrócitos. Desse modo, a interferência pode ocorrer mesmo em baixas concentrações
de hemoglobina liberada (invisíveis a olho nu).
No entanto, a hemólise nem sempre se refere à ruptura de hemácias; fatores interferentes podem
também ser originados da lise de plaquetas e granulócitos, que pode ocorrer, por exemplo, quando
o sangue é armazenado em baixa temperatura, mas não em temperatura de congelamento.
Lipemia:
BIBLIOGRAFIA
Procedimentos básicos para minimizar ocorrências de erro:
O flebotomista deve se assegurar de que a amostra será colhida do paciente especificado na
requisição de exames. Para isto, recomendam-se:
Para pacientes muito jovens, inconscientes ou com algum tipo de dificuldade de comunicação:
- Pode ocasionar redução da contagem de células de até 5%. Tapinhas no local da coleta também
não são recomendados.
- Garroteamento prolongado
Em tubo com EDTA, pela sobra/excesso de anticoagulante (sal), pode desidratar os eritrócitos
(crenados), causando diminuição do hematócrito e do VCM. A proporção de EDTA dos tubos de
diferentes marcas é de 1,5 a 2,2 mg de anticoagulante por cada mililitro de sangue venoso.
É de uso proibido pela Anvisa, mesmo se provado, por validação, seu bom funcionamento, pois
pode haver perda do vácuo, contaminação com micro-organismos e maior tendência à formação de
coágulos.
Pode favorecer a formação de coágulos. Ideal: 8 a 10 vezes, por inversão, de forma suave.
- Formação de hematoma
Pode ocasionar diluição da amostra pelas soluções glicosada e fisiológica. Entre os parâmetros
avaliados no hemograma, o hematócrito é o que está mais sujeito aos efeitos da diluição. Quando
houver suspeita de que a amostra foi diluída, deve-se solicitar a coleta de nova amostra, justificando
a solicitação.
-Hemólise da amostra
Pode acontecer em consequência a uma série de fatores, como escolha de agulha de calibre
pequeno; aspiração muito rápida, quando realizada com seringa; perda da veia durante a coleta;
homogeneização brusca; longo período de armazenamento em temperatura inadequada; e
congelamento da amostra. Proporcionalmente à intensidade da hemólise, há alterações, como
diminuição da contagem de eritrócitos, redução do hematócrito e da hemoglobina.
-Coagulação da amostra
Ocorre, principalmente, por homogeneização insuficiente após a coleta. Essas amostras devem ser
desprezadas, já que a formação de coágulo afeta todos os parâmetros avaliados no hemograma.
Deve-se solicitar a coleta de nova amostra, justificando a solicitação.
Relacionadas à coleta
Sangue coagulado
- A demora na aspiração do sangue durante a coleta permite a ativação das plaquetas e da
coagulação antes da ação do EDTA. Quando a coagulação é completa, é facilmente observada.
Quando a coagulação é parcial, há formação de pequenos coágulos, às vezes imperceptíveis.
Citopenia sem causa evidente exige pesquisa de coágulos na amostra.
Plasma derramado
Decorrente da postura do paciente pode haver redução de até 5% nos resultados da contagem
eritrocitária, níveis de hemoglobina e hematócrito, quando a amostra é coletada mais de uma vez,
após 20 minutos, de um mesmo paciente, com variação na sua postura (de decúbito dorsal para
sentado) e posição do braço. O decúbito dorsal causa um aumento de até 3% na contagem
eritrocitária, hemoglobina e hematócrito9 esses aumentos podem ser maiores (entre 5 e 10%) em
cardiopatas e obesos.
Horário da coleta
O ideal é que seja pela manhã, pois os valores de referência foram obtidos nesse horário. Em
outros horários, por exemplo, à tarde, alguns parâmetros hematológicos podem sofrer
modificações, tais como a diminuição da hemoglobina entre 0,3 e 1,5 g/dL. Pode haver modificações
nos parâmetros leucocitários, pois a contagem vespertina pode sofrer aumento de até 15% em
relação à contagem matinal, decorrente do ritmo circadiano do cortisol. Esse mecanismo fisiológico
também influencia, de forma contrária, as contagens de eosinófilos e basófilos. As contagens de
eosinófilos e basófilos tendem a mostrar um padrão mais consistente, com valores menores à tarde
e mais elevados de manhã. Esses valores aparecem de forma paralela com as mudanças diurnas
dos glicocorticoides. A presença de neutropenia em hemograma coletado em condições basais exige
confirmação com coleta no fim da manhã ou na segunda metade da tarde. A poliglobulia presente
em hemograma coletado no fim do dia deve ser confirmada com nova coleta de manhã cedo.
Amostra inadequada
Por uso de tubo incorreto (p.ex., heparina) ou tubo não preenchido adequadamente (volume acima
ou abaixo do indicado). A heparina pode ser usada para avaliar as hemácias, porém, lisa leucócitos e
dificulta a visualização das plaquetas (coloração violácea de fundo).
Outras causas
Certos procedimentos diagnósticos devem ser lembrados como potenciais riscos para alteração de
parâmetros hematológicos, tais como a administração de novos contrastes existentes no mercado
para exames de imagem, alguns procedimentos terapêuticos, como hemodiálise, diálise peritoneal,
cirurgia, transfusão sanguínea e infusão de fármacos. Em relação à infusão de fármacos, é
importante lembrar que a coleta de sangue para hemograma deve ser realizada, sempre que
possível, em local distante da instalação do cateter, preferencialmente no outro braço. Mesmo
realizando a coleta no outro braço, se possível, deve-se aguardar pelo menos uma hora após o final
da infusão. Apesar de as causas pré-analíticas discutidas interferirem nos resultados dos
hemogramas, as diferenças nos resultados costumam ser clinicamente irrelevantes na maioria das
vezes, de modo que a coleta e realização do hemograma podem ser feitas a qualquer hora do dia e
da noite. Entretanto, evita-se coletar o hemograma após exercício físico (leucocitose/neutrofilia) e
nas duas horas seguintes a refeições abundantes e gordurosas.
• tipo de sangue: capilar (mistura do sangue com líquido extravascular) ou venoso;
BIBLIOGRAFIA
1. Souza ML, Corio P, Temperini MLA, Temperini JA. Aplicação de espectroscopias raman e
infravermelho na identificação e quantificação de plastificantes em filmes comerciais de PVC
esticável. Quim Nova 2009; 32(6):1452-6. Disponível em: www.scielo.br/pdf/qn/v32n6/17.pdf.
Acessado em: 12/mar/2013.
Bibliografia 1. Clinical and Laboratory Standardization Institute (CLSI). 2. CLSI H3-A6, Procedures for
the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture; Approved Standard, 6.ed. 3. Manual
de conduta em exposição ocupacional a material biológico. Disponível em: https://
bvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/04manual_acidentes.pdf).
Para a Antissepsia da pele no local da punção, usada para prevenir a contaminação direta do
paciente e da amostra, o antisséptico escolhido deve ser eficaz, ter ação rápida, ser de baixa
causticidade e hipoalergência na pele e mucosa. O álcool etílico possui efeito antisséptico na
concentração de 70%, sendo o mais usado, pois, nesta composição, preserva sua ação antisséptica,
e diminui a inflamabilidade. Nesta diluição, tem excelente atividade contra bactérias Gram-positivas
e Gram-negativas, boa atividade contra Mycobacterium tuberculosis, fungos e vírus, além de ter
menor custo.
As mãos devem ser higienizadas após o contato com cada paciente, evitando assim contaminação
cruzada. Esta higienização pode ser feita de duas maneiras:
As mãos devem ser higienizadas após o contato com cada paciente, evitando, assim, a contaminação
cruzada.
A higienização pode ser feita com água e sabão, ou usando álcool gel.
A fricção com álcool reduz em 1/3 o tempo despendido pelos profissionais de saúde para a higiene
das mãos, aumentando a aderência a esta ação básica de controle. Quanto às desvantagens, é
citado o odor que fica nas mãos e a inflamabilidade, que é observada apenas com as soluções de
etanol acima de 70%.
ÁGUA E SABÃO
ÁLCOOL GEL
Calçando as luvas:
As luvas devem ser calçadas com cuidado para que não rasguem, e devem ficar bem aderidas à pele
para que o flebotomista não perca a sensibilidade na hora da punção.
Luvas
As luvas descartáveis são barreiras de proteção, e podem ser confeccionadas em látex, vinil,
polietileno ou nitrila.
Alguns funcionários podem desenvolver dermatite pelo uso prolongado desses equipamentos de
proteção individual. Para esses casos, luvas de outros materiais devem ser experimentadas (nitrila,
polietileno e outras composições). O uso de luvas sem talco, assim como a utilização de luvas
revestidas internamente de algodão, também podem ser uma alternativa para estes funcionários
sensibilizados.
Procedimento
As luvas devem ser calçadas, com cuidado, para que não rasguem. Devem ficar bem aderidas à pele,
para que o flebotomista não perca a sensibilidade no momento da punção.
• Recomenda-se usar um algodão embebido com solução de clorexedina alcoólica ou álcool etílico
70%, comercialmente preparado.
• Permitir a secagem da área por 01 minuto, para evitar hemólise da amostra, e também a
sensação de ardência quando o braço do paciente for puncionado.
O procedimento de venopunção deve ser precedido pela higienização do local para prevenir a
contaminação microbiana de cada paciente ou amostra.
Antissépticos
• Dentre eles, citamos: álcool isopropílico 70% ou álcool etílico, iodeto de povidona 1 a 10% ou
gluconato de clorexidina para hemoculturas, substâncias de limpeza não-alcoólicas (como
clorexidina, sabão neutro).
Procedimento
• Recomenda-se usar uma gaze umedecida com solução de álcool isopropílico ou etílico 70%,
comercialmente preparado
• Limpar o local com um movimento circular do centro para fora.
• Permitir a secagem da área por 30 segundos para prevenir hemólise da amostra e reduzir a
sensação de ardência na venopunção.
• Se a venopunção for difícil de ser obtida e a veia precisar ser palpada novamente para efetuar a
coleta, o local escolhido deve ser limpo novamente.
BIBLIOGRAFIA
BARREIRAS PESSOAIS
Luvas para atendimento clínico e cirúrgico, que deverão ser descartadas após o atendimento a cada
paciente
Óculos de proteção
Gorro
Propé
USO DE MÁSCARAS
§As máscaras devem ser colocadas após o gorro e antes dos óculos de proteção.
§As máscaras devem adaptar-se confortavelmente à face, sem tocar lábios e narinas.
§Não devem ser usadas fora da área de atendimento, nem ficar penduradas no pescoço.
§As máscaras devem ser removidas enquanto o profissional estiver com luvas. Nunca com as mãos
nuas.
§Para sua remoção, as máscaras devem ser manuseadas o mínimo possível e somente pelos bordos
ou cordéis, tendo em vista a pesada contaminação.
Máscaras e óculos de proteção não são necessários no contato social, tomada da história clínica,
medição da pressão arterial ou procedimentos semelhantes.
§Óculos de proteção com vedação lateral ou protetores faciais de plástico, devem ser usados
durante o tratamento de pacientes com risco de contaminação proveniente de aerosóis ou
respingos de sangue e saliva.
§Os óculos de proteção também devem ser usados no espurgo ou sala de utilidades, na desinfecção
de superfícies e manipulação de instrumentos na área de lavagem.
§Óculos e protetores faciais não devem ser utilizados fora da área de trabalho.
USO DE GORROS
•Os cabelos devem ser protegidos da contaminação através de aerossóis e gotículas de sangue e
saliva, substâncias irritantes e procedimentos invasivos. Deve ser priorizada a utilização de gorros
descartáveis, que devem ser trocados quando houver sujidade visível.
USO DE AVENTAIS
§Sempre que houver possibilidade de sujar as roupas com sangue ou outros fluidos orgânicos,
devem ser utilizadas vestes de proteção, como aventais reutilizáveis ou descartáveis.
§Avental não estéril - usado em procedimentos semicríticos e não críticos, de preferência de cor
clara, gola alta do tipo "gola de padre", com mangas que cubram a roupa e comprimento 3/4,
mantido sempre abotoado.
§Avental estéril - usado em procedimentos críticos, vestido após o profissional estar com o EPI e ter
realizado a degermação cirúrgica das mãos. Deve ter fechamento pelas costas, gola alta tipo "gola
de padre", com comprimento cobrindo os joelhos e mangas longas com punho em elástico ou
ribana.
USO DE LUVAS
§Sempre que houver possibilidade de contato com sangue, saliva contaminada por sangue, contato
com a mucosa ou com superfície contaminada, o profissional deve utilizar luvas. Embora as luvas
não protejam contra perfurações de agulhas, está comprovado que elas podem diminuir a
penetração de sangue em até 50% do seu volume. As luvas não são necessárias no contato social,
tomada do histórico do paciente, medição da pressão sanguínea ou procedimentos similares. Luvas
não estéreis são adequadas para exames e outros procedimentos não cirúrgicos; luvas estéreis
devem ser usadas para os procedimentos cirúrgicos.
§Colocar o pacote sobre uma mesa ou superfície lisa, abrindo-o sem contaminá-lo. Expor as luvas de
modo que os punhos fiquem voltados para si.
§Retirar a luva esquerda (E) com a mão direita, pela dobra do punho. Levantá-la, mantendo-a longe
do corpo, com os dedos da luva para baixo. Introduzir a mão esquerda, tocando apenas a dobra do
punho.
§Introduzir os dedos da mão esquerda enluvada sob a dobra do punho da luva direita (D). Calçar a
luva direita, desfazendo a seguir a dobra até cobrir o punho da manga do avental.
§Após o uso, retirar as luvas puxando a primeira pelo lado externo do punho, e a segunda pelo lado
interno.
•- Agarre uma das luvas na extremidade superior e pelo lado externo na região do punho.
- Estique e puxe a extremidade superior da luva para baixo, enquanto a inverte durante a remoção.
- Insira os dedos da mão sem luva dentro da extremidade interna da luva ainda vestida.
- Puxe a Segunda luva de dentro para fora enquanto encapsula a primeira luva na palma da mão.
Exercício 1:
A)É necessária adequada rastreabilidade dos insumos utilizados nas coletas sanguíneas,
permitindo, quando necessário, estabelecer uma ligação entre os materiais colhidos e os lotes
dos produtos usados nos procedimentos.
B)É facultado ao coletador a homogeneização por inversão ou agitação das amostras de sangue
total em tubos contendo anticoagulante.
D)O tempo de centrifugação das amostras para obtenção de soro independe da força centrífuga
relativa (RCF) de cada equipamento, sendo que o recomendável é 9 000 rpm (rotações por
minutos), por 20 minutos.
Exercício 2:
A coleta dos materiais clínicos e as condições pré-analíticas são tão importantes quanto a fase
analítica. Quais são as condições que mais podem interferir nos resultados dos exames?
Assinale a alternativa correta:
A)Idade e sexo.
C)Jejum e repouso.
Exercício 3:
Exercício 4:
D)O jaleco (guarda-pó) deve ser utilizado em qualquer ambiente do laboratório, inclusive no
local reservado para as refeições.
E)Em ambiente para análises clínicas não há nenhum tipo de risco físico.
Exercício 5:
A)Caixa de papelão.
Exercício 6:
C)Somente os sinais de risco químico são obrigatórios nas áreas restritas do laboratório e as
atividades que envolvem produtos químicos devem ser realizadas em áreas restritas.
D)Para manter a qualidade dos resultados, todos os reagentes devem ser preparados no
momento da análise, sendo descartado o excesso quando houver.
E)Não é imprescindível a elaboração dos procedimentos escritos, pois isto não interfere na
otimização dos trabalhos, na redução do tempo gasto e do risco de acidentes.