Enzimas microbianas

As enzimas são proteínas conhecidas como catalisadores biológicos devido

a sua capacidade de promover reações de maneira mais rápida e eficiente.
Nos seres vivos, as enzimas possuem papel fundamental nas reações
metabólicas, sendo indispensáveis para a sobrevivência.
Além disto, as enzimas possuem diversas aplicações industriais, podendo
ser aplicadas em vários processos de bioprodução.
Objetivo
Isolar e selecionar microrganismos resistentes a altas temperaturas e
eficientes na produção das enzimas hidrolíticas amilase, celulase e fitase.
Esses microrganismos são chamados de termorresistentes (ou termófilos).
A figura 1 é uma fonte termal localizada em um parque nos Estados
Unidos. Ela é considerada a maior fonte de água quente do país e a terceira
maior do mundo.
As cores variam com a estação do ano, mas são resultado de algas e da de
microrganimos termorresistentes.
Importância
Os microrganismos termorresistentes são de grande interesse para as
bioindústrias emergentes pela possibilidade de melhorar os bioprocessos
sob condições de altas temperaturas.
Suas enzimas termoestáveis apresentam potencial industrial considerável
oferecendo melhores rendimentos sob condições operacionais extremas.
A descoberta dessas enzimas, com suas inúmeras aplicações
biotecnológicas, vem revolucionando o mercado industrial,
principalmente as hidrolases extracelulares (proteases, amilases,
pectinases e celulases), estáveis à temperatura e ao pH extremo.
Por isso, é de grande relevância para a comunidade científica o isolamento
desses microrganismos para a produção de enzimas com novas
propriedades.
Metodologia
Os experimentos foram realizados no Laboratório de Microbiologia do
Solo da Embrapa Milho e Sorgo, em Sete Lagoas, MG, Brasil. Basicamente
foram 4 etapas
1. As amostras foram coletadas em sacos plásticos devidamente
identificados, em porções de no mínimo 500g, em triplicata, em 3
regiões diferentes da leira, no ápice, meio é base. No momento da
coleta foi registrada a temperatura de cada amostra. Logo após a
coleta as amostras foram colocadas em caixa de isopor e levadas para
o laboratório.
2. Para obtenção de morfotipos termorresistentes, as amostras passaram
por diversos por procedimentos de homogeneização, diluição e
filtração. As colônias selecionadas foram conservadas em óleo
mineral.
3. As colônias de bactérias, fungos e actinomicetos isoladas na etapa
anterior foram suspensas em solução salina estéril e realizou-se a
contagem dos microorganimos. Posteriormente 0,1 ml de cada
suspensão de bactérias, fungos e actinomicetos foi inoculado em
TSB (Caldo Tripticaseína Soja), em duas repetições, para incubação
em altas temperaturas.
4. Os microrganismos que apresentaram melhor resistência à incubação
foram inoculados em triplicata, em meios sólidos específicos para a
produção de cada enzima e avaliação do potencial de produção. Foi
medido o Índice Enzimático (IE) que é expresso pela relação entre o
diâmetro médio da colônia e o diâmetro médio do halo, foi estimado.
Os microrganismos que apresentaram maior índice apresentaram a
maior atividade enzimática.