Controle do Crescimento Microbiano

Importância
 Microbioma
 convivem com o animal e ambiente de forma equilibrada

 Necessidade de controle para:

 prevenir ou controlar a transmissão de doenças infecciosas;
 prevenir a contaminação ou crescimento de micro-organismos
em alimentos;
 prevenir a deterioração e danos de materiais por micro-
organismos e a contaminação de produtos (indústria);
 prevenir a contaminação de materiais cirúrgicos por micro-
organismos.
Terminologia
 INFECÇÃO: humanos/animais
 CONTAMINAÇÃO: objetos/superfícies

 Terapêutica: substância química administrada em um animal para tratá-lo

 Controle: substâncias químicas utilizadas para se evitar a contaminação/infecção

 Infecção: micro-organismo presente no organismo, podendo ou não o indivíduo infectado

ficar doente
 Doença: micro-organismo se multiplica e leva à produção de sinais

 Morte (micro-organismo): perda irreversível da capacidade de se multiplicar

Definição de termos

 ESTERILIZAÇÃO
 remoção ou destruição de todos os micro-organismos existentes, inclusive os esporos
bacterianos, em um material inanimado (objetos/superfícies)

* não comporta meio termo

 DESINFECÇÃO
 remoção ou destruição da maior parte dos micro-organismos presentes - material
inanimado

* o foco principal são os micro-organismos patogênicos *

Definição de termos

 ANTISSEPSIA
 remoção ou destruição da maior parte dos micro-organismos - aplicado a
tecidos/superfícies VIVAS
* o foco principal são os micro-organismos patogênicos *

 ASSEPSIA
 Cuidados para impedir a contamição microbiana
 15 cm entorno da chama
 ausência de contaminação significativa
 Terminologia relacionada ao controle do crescimento
microbiano
Termo Definições e comentários
Processo de destruição, inativação definitiva e/ou remoção de todas as formas de vida
de um objeto ou material. Inclui esporos bacterianos que são as formas mais resistentes
Esterilização de vida. É um processo absoluto, não havendo graus de esterilização (ou está estéril ou
não está estéril).

Destruição/inativação de micro-organismos, principalmente os patogênicos. São usadas

geralmente substâncias químicas que são aplicadas a objetos ou materiais. Reduzem a
Desinfecção quantidade ou inibem o crescimento, mas não esterilizam.

“Desinfecção” química da pele, mucosas e tecidos vivos. É um caso particular de

Antissepsia desinfecção.

Técnicas assépticas previnem a entrada de micro-organismos.

Assepsia Ausência/baixa carga de micro-organismos em uma área.
 ** Terminologia especializada**

Termo Definições e comentários

Realizada com o objetivo de eliminar esporos de Clostridium botulinum em
Esterilização comercial
alimentos. 80°C por 10 min.
Remoção mecânica de micro-organismos, principalmente patógenos, de uma área
determinada, em tecido vivo, utilizando-se uma substância química (degermante).
Degermação Antes de injetar algum medicamento, passa-se algodão com álcool para retirada
mecânica dos micro-organismos a fim de se evitar uma possível infecção do
indivíduo.
Diminuir contagem microbiana em utensílios utilizados em restaurantes, a fim de
Sanitização
evitar a transmissão desses micro-organismos de uma pessoa a outra.
Bactericida, fungicida, viricida = substâncias químicas que matam os micro-
‘-cida’
organismos (bactérias, fungos e vírus, respectivamente).
‘-stático’ Bacteriostático – inibe o crescimento bacteriano
 A taxa de morte microbiana

• Depende do número de micro-

organismos presentes (curva de morte
microbiana);

• Influências ambientais (desinfetantes

atua melhor em soluções aquecidas);
▫ Matéria orgânica – inibe a ação

• Tempo de exposição;

• Características microbianas.
Ações dos agentes de controle microbiano
Alterações na Danos às
permeabilidade proteínas e aos
da membrana ácidos nucleicos

Danos aos
Desnaturação
lipídios e
da proteína
proteínas

Extravasamento Danos ao ácido

do conteúdo nucleico (DNA e
celular RNA)
Controle do crescimento microbiano
 MÉTODOS FÍSICOS
 temperatura
 frio
 calor
*pasteurização
 radiação
 filtração

 MÉTODOS QUÍMICOS
 substâncias químicas

**GERALMENTE**
 esterilização  métodos físicos
 desinfecção/antissepsia  métodos químicos
 MÉTODOS FÍSICOS

Temperatura – Frio
 frio (retarda a multiplicação - metabolismo)
 refrigeração
 congelamento
 conservação de alimentos, drogas e culturas de micro-organismos
 liofilização: dessecação-congelamento
 Remoção da água em alto vácuo em baixas temperaturas
 conservação de culturas de micro-organismos (antibiótico)
Temperatura
 Calor seco (destrói por efeitos de oxidação)
 estufa / forno Pasteur (vidrarias de laboratório e material cirúrgico)
 180°C-200°C/2h
 flambagem / chama direta (bico de Bunsen / vassoura de fogo)
 Alça de inoculação
 incineração (queima de carcaças)
 promovem a queima dos micro-organismos até se tornarem cinzas

* métodos de esterilização

**mais lento que o calor úmido e com menor poder de penetração**

Temperatura – Calor úmido
 Calor úmido
 autoclave
 câmara de vapor de água sob pressão - desnatura proteínas
 121°C/15min (esterilizar material limpo) ou 30min (descontaminar
material)
 Meio de cultura, curativos, soluções.
* método mais prático e seguro de esterilização
**mais eficiente que o calor seco (mais rápido e com maior poder de penetração)**

 água em ebulição
 mata os patógenos bacterianos e quase todos os vírus e fungos;
entretanto, esporos bacterianos e alguns vírus permanecem viáveis
* método de desinfecção – comum para sanitizar mamadeiras
2/10/19
Temperatura

 Pasteurização

 desnaturação de proteínas – mata todos os micro-organismos patogênicos e a maioria

dos não patogênicos

 leite, alguns derivados de leite e algumas bebidas alcoólicas (cerveja e vinho)

 leite pasteurizado: 72°C/15s
 leite UHT (ultra high temperature): 140°C/4s
Radiação
 energia transmitida pelo espaço

 Ionizante - Raios gama – remover e-

 grande poder de penetração – destruição do DNA
 empregados em substâncias e materiais termolábeis, como plásticos, vitaminas,
etc.

 Não ionizante - Raio UV

 baixo poder de penetração – danos no DNA
 controle de ambientes fechados – lâmpada UV
Filtração
 utilização de filtros bacteriológicos
 membranas com diâmetro de poros que variam de
acordo com o micro-organismo
 líquidos e ar

 processo usado para substâncias que não podem

sofrer elevações de temperatura (termolábeis)
Pressão osmótica
• Altas concentrações de sais e açúcares para
conservar o alimento.

• Ambiente hipertônico que ocasiona na

saída de água da célula microbiana.

• Leveduras e bolores são mais resistentes

 Métodos físicos empregados no controle do crescimento microbiano
Método Mecanismo de Comentários Uso preferencial
ação
Forno Oxidação Método eficaz de esterilização. Ficar atento Vidraria e materiais
ao binômio tempo x temperatura resistentes a altas
temperaturas
Calor seco

Flambagem (bico Queima do micro- Método eficaz de esterilização Alça e fio de platina
de Bunsen) organismo até virar
cinzas
Incineração Queima de todo Método eficaz de esterilização Papéis, carcaças de animais,
material até virar restos de curativos, algodão,
cinzas etc
Autoclavação Desnaturação de Método eficaz de esterilização. Meios de cultura, utensílios,
proteínas Trinômio: tempo x temperatura x pressão instrumentos hospitalares que
toleram pressão e
Calor úmido

temperatura
Fervura / Desnaturação de Mata bactérias, fungos, muitos vírus em 15 Larga utilização caseira
Ebulição proteínas minutos. Não é eficaz para todos os esporos
bacterianos
Pasteurização Desnaturação de Mata bactérias patogênicas eventualmente Leite, creme de leite,
proteínas transmitidas por alimentos e reduz o número cerveja, vinho
de micro-organismos em geral
Continuação

Método Mecanismo de Comentários Uso preferencial

ação
Ionizante Destruição do DNA Método eficaz de esterilização. Esterilização de produtos
Radiações

Custo elevado (raio gama) farmacêuticos e suprimentos médicos

Não ionizante Alteração no DNA Emprego restrito como esterilizante Lâmpadas germicidas (UV) em
ambiente fechados

Filtração Remoção mecânica Separação de bactérias e fungos, em Produtos líquidos termolábeis e

meios ou soluções líquidas e gazes filtração do ar em câmaras e salas

Baixas temps. Interrupção do Efeito microbiostático Conservação de alimentos, drogas e

(frio) metabolismo culturas de micro-organismos

Pressão osmótica Plasmólise Resulta na perda de água das células Conservação de alimentos
microbianas
MÉTODOS QUÍMICOS

 Substâncias químicas

 Fatores que interferem na eficácia dos desinfetantes e antissépticos

 agente infeccioso em questão
 material a ser tratado
 concentração do produto
 tempo de atuação
 presença de matéria orgânica
 pH
Teste de desinfetante
 Teste de uso-diluição
 Método de disco-difusão

Quat – composto quaternário de amônio

Agente químico ideal
 ser esterilizante
 alta dispersabilidade
 ação rápida
 efeito residual
 ser inodoro
 não ser tóxico
 não ser corrosivo
 não alergênico
 estável
 baixo custo
 não reagir com matéria orgânica
 biodegradável
Resistência dos micro-organismos
a agentes químicos
Fenol e compostos fenólicos
 Fenol
 inicialmente: controlar odor de esgoto
 irrita a pele e tem odor desagradável
 pastilhas para garganta: efeito anestésico mas pouco efeito
antimicrobiano

 Compostos fenólicos
 rompem lipídios
 atuam na presença de matéria orgânica e têm efeito residual
 desinfecção de locais/objetos com pus, saliva e fezes
 cresóis – ótimos desinfetantes de superfície
Bifenóis
 derivados do fenol

 Hexaclorofeno
 ativos contra estafilococos e estreptococos – procedimentos cirúrgicos e hospitalares

 Triclosano
 sabonetes antibacterianos e pastas de dente
 resistência por parte de muitas bactérias
 inibe a ação de enzima necessária na síntese de lipídios
Biguanidas

 atuam no rompimento da membrana

 bactérias gram-positivas e gram-negativas (exceto Pseudomonas spp.) e alguns
vírus envelopados

 Clorexidina

 antissepsia das mãos antes de cirurgias

 antissepsia pré-operatória da área a ser incisada
Halogênios
 Iodo
 impede a síntese de proteínas
 eficaz contra todos os tipos de bactérias, muitos esporos bacterianos, vários fungos e
alguns vírus
 antisséptico
 tintura de iodo: solução em álcool aquoso
 iodóforo: iodo + molécula orgânica, com lenta liberação do iodo; são menos
irritantes que a tintura

 Cloro
 impede ação enzimática
 ácido hipocloroso, hipoclorito de cálcio, hipoclorito de sódio, dióxido de cloro,
cloraminas
 desinfecção de água e de equipamentos de fábrica de alimentos
 antisséptico em baixas concentrações
 Líquido de Dakin (hipoclorito de sódio)
Álcoois
 desnaturação de proteínas e dissolve lipídios
 matam efetivamente bactérias e fungos, mas não esporos bacterianos e vírus não
envelopados
 não deixam resíduos

 utilizados na degermação,

 Etanol: 70% (60 a 95%)

 Isopropanol (menos volátil)
Metais pesados e compostos

 prata, mercúrio, cobre e zinco (ação oligodinâmica)

 desnaturação proteica

 Nitrato de prata 1%: antisséptico

 Sulfadiazina de prata: queimaduras
 Cloreto de mercúrio: anti-mofo em tintas
 Zinco: algicida, telhados, soluções bucais e xampus anticaspa
Agentes de superfície
 Tensoativos e surfactantes

 Sabões: remoção mecânica

 Sanitizantes ácido-aniônicos: atóxicos, não corrosivos e rápida ação

 Compostos quaternários de amônio – Quat - “Herbalvet”:

 alteram permeabilidade celular
 bactericidas fortes contra gram-positivas (menos ativos contra gram-negativos),
fungicidas e viricidas contra vírus envelopados
 não atuam contra esporos bacterianos e micobactérias
Aldeídos
 inativação de proteínas

 formaldeído
 em forma de gás é um excelente desinfetante
 mais comum - solução aquosa (formalina) – usada em laboratórios

 glutaraldeído
 menos irritante e mais efetivo que o formaldeído
 desinfetante de instrumentos hospitalares (endoscópios e equipamentos
respiratórios) – a 2% é bactericida e viricida em 10 min / esporicida em 3 a 10h
Peroxigênios e outras formas de oxigênio
 agentes oxidantes

 peróxido de hidrogênio
 antisséptico: não muito bom para feridas abertas – é rapidamente degradado em água
e oxigênio gasoso pela ação da catalase presente nas células
 desinfetante: pode ser esporicida em altas concentrações

 ácido peracético
 mata bactérias e fungos em poucos minutos; e vírus e esporos bacterianos em 30
minutos - esterilizante
 não deixa resíduos tóxicos e é muito pouco afetado pela presença de matéria orgânica
Esterilização química

 óxido de etileno
 se em ação por várias horas
 inibe funções celulares vitais (age em proteínas e ácidos nucleicos)
 altamente penetrante

 peróxido de hidrogênio
 se aquecido
 não tão penetrante quanto o óxido de etileno
 não pode ser usado para esterilizar produtos têxteis ou líquidos

 dióxido de cloro
 gás de curta duração
 fumigação de ambientes fechados contaminados com esporos
bacterianos
Agentes químicos usados
no controle microbiano
continuação
 Não existe agente antimicrobiano ou técnica perfeita/ideal

 Sempre tem que se levar em conta a finalidade a que se destina o seu emprego

 Lembrar que em relação aos agentes químicos todos apresentam toxicidade

 Destes processos dependem o sucesso profissional e a segurança