Microbiologia Aplicada

ESTÁCIO – FRATELLI VITA – SDE396

CURSO: ENFERMAGEM. SEMESTRE 2021.2

Profa. Raísa Coelho

Aula 04. Princípios de Biossegurança

Objetivos:

1. Normas de Biossegurança;

2. Principais Meios de Cultura para Crescimento Bacteriano;

3. Técnicas de semeadura e seus objetivos;

4. Caracterização das bactérias (análises fenotípicas e genotípicas);

5. Colorações mais utilizadas para diferenciação de grupos bacterianos.

 Conceitos Básicos de Biossegurança

Conjunto de ações voltadas para a prevenção, minimização ou eliminação de riscos inerentes às

atividades de pesquisa, produção, ensino, desenvolvimento tecnológico e prestação de serviços, visando

a saúde do homem, dos animais, do meio ambiente e a qualidade dos trabalhos desenvolvidos.

Lei nº 11.105, de 25 de março de 2005 – Política Nacional de Biossegurança.

 Conceitos Básicos de Biossegurança
CLASSIFICAÇÃO DOS RISCOS

1. Físicos {ruído, vibrações, pressões anormais, temperaturas extremas, materiais cortantes e pontiagudos}

2. Químicos {produtos que possam penetrar no organismo por via respiratória; contato ou absorção pela pele ou ingestão}

3. Biológicos {bactérias, fungos, parasitos, vírus, sendo associados a fluidos biológicos}

4. Ergonômicos {interferentes das características psicofisiológicas, causando desconforto e afetando a saúde}

5. De acidentes {fatores que coloquem o trabalhador em situação de perigo, afetando integridade, bem-estar físico e moral}
 Conceitos Básicos de Biossegurança

RISCOS BIOLÓGICOS { relacionados ao risco proporcionado pelo agente etiológico/causador }

Risco 1 Risco 2 Risco 3 Risco 4 Risco 5

Risco individual Risco de doença

Escasso risco Risco individual Elevado risco
moderado e animal grave e
individual e elevado e baixo individual e
comunitário disseminação no
comunitário risco comunitário comunitário
limitado meio ambiente alto.
 Conceitos Básicos de Biossegurança
Contenção de agentes de riscos

Utilização de EPIs

Luvas

Jalecos ou
aventais

Máscaras

Toucas

Óculos

Protetores
auriculares
 Conceitos Básicos de Biossegurança
Contenção de agentes de riscos

Equipamentos de proteção coletiva

Equipamento de contenção física para manipulação de agentes infecciosos.

Proteção do profissional durante a manipulação de materiais biológicos

altamente infectantes, substâncias tóxicas e culturas de células.

Localizado em local de pouco trânsito e distante de portas.

 Conceitos Básicos de Biossegurança
Equipamento de proteção coletiva - EPC

Classes de cabines
Classe I

• Não há recirculação do ar. Protege apenas o operador, não o

material. Mcos de baixo ou moderado risco.

Classe II

• Parte do ar recirculada. Proteção do operador, do material e do

meio ambiente. Cultura de microbactérias e substâncias tóxicas
ou voláteis.

Classe III

• Indicada para mcos de alto poder infectante. Alto grau de

proteção ao operador e ao meio ambiente. Luvas presas à câmara.
 Conceitos Básicos de Biossegurança Chuveiro de
segurança

Equipamento de proteção coletiva - EPC

Autoclave
- Acesso facilitado e treinamento adequado

Lava-olhos
 Conceitos Básicos de Biossegurança
Condutas para controle de infecção

{ remoção de materiais não desejáveis (sujeira física) }

Lavagem das mãos Antissepsia Limpeza Desinfecção Esterilização

↓ 80% das infecções Degermação { remoção de detritos e impurezas depositados sobre a pele }

Microbiota transitória Antissepsia { processo pelo qual o com presente em tecidos é eliminado após
a utilização de um agente químico antimicrobiano }

Microbiota residente
{ processo físico ou químico → destrói mcos presentes em objetos
inanimados, mas não formadores de esporos }

{ elimina todos os mcos, por meio de atividade química e física }

 Conceitos Básicos de Biossegurança
Principais métodos de esterilização

Calor úmido (Autoclave) Óxido de etileno

Temperatura: 121ºC Químico. Uso hospitalar.
Tempo: 15-30 minutos (bactérias formadoras de esporos)
Uso: meios de cultura e descarte

Calor seco (forno de Pasteur)

Metais, vidros e materiais termorresistentes.

Temperatura: 160 – 180ºC

Radiação (ionizante e não ionizante)

Ácidos nucleicos dos mcos
Ionizante (freq ↑): raios x e gama | Não ionizante (freq ↓): UV, infravermelho e micro-ondas
 Conceitos Básicos de Biossegurança
Descarte de material biológico

Perfurocortantes
- Caixas de paredes impenetráveis
- ¾ da capacidade
- Lixo contaminado → incineração

Culturas e materiais contaminados

- Autoclave (saco de autoclave) → saco de autoclave

Gazes e luvas

- Descarte em saco branco com símbolo de infectante.

 Boas práticas de laboratório clínico (BPLC)
Descarte de material biológico

- Proibido alimentos, bebidas, aplicação de cosméticos e fumo;

- Recomendação: prender cabelos e evitar uso de adornos;
- Proibido o uso de calçados abertos;
- Toda amostra biológica deve ser considerada potencialmente contaminada;
- Obrigatório o uso de EPI;
- Proibido pipetar com a bota;
- Descontaminação de bancada pré e pós-trabalho;
- Proibido reencapar e entortar agulhas após o uso;
- Nunca processar materiais não identificado;
- Depositar todo material contaminado em recipientes apropriados para autoclavação;
- Higiene das mãos pré e pós-procedimento
 Boas práticas de laboratório clínico (BPLC)
Transporte de amostras

Utilização de caixas rígidas, com tampa Cabines de Segurança

higienizável, que permita a posição
vertical dos frascos.

UV pré e pós (10-15min)

Limpeza e organização prévias
Não recomendado o bico de Bunsen
para evitar danos ao filtro.
 Acidentes - Procedimentos

-
Material biológico Químico
Isolar a área
- Manter sem atividade por 30min - Uso de EPI
- Utilizar EPI - Conter líquido com vermiculita ou
- Papel toalha + solução com hipoclorito de sódio (2%) ou cloro ativo – 15min areia
- Material levado para autoclave - Coleta de resíduo e descarte em saco
- Perfurocortantes > caixa preto
- Repetir descontaminação

Centrífuga
- Desligar e manter fechada (30min) – Dispersão de aerossóis
- Uso do EPI
- Estilhaços removidos com pinça > caixa de perfurocortantes
- Hipoclorito > água e sabão
- Material desprezado em saco para resíduo infectante
 Meios de cultivo
Substâncias exigidas pelas bactérias e que são úteis a seu crescimento e multiplicação.

Fontes de C Fontes de N Fontes de energia Sais inorgânicos

FINALIDADES:

- Crescimento bacteriano CLASSIFICAÇÃO [Consistência]

- Isolamento bacteriano Líquidos {solução aquosa} - turvação

Semissólidos {ágar} – motilidade bacteriana

- Estudo da morfologia colonial
Sólidos { > [ ] de ágar, além dos nutrientes } –
- Patogenicidade
placa de Petri ou tubos – formação de colônias
- Características bioquímicas

* Controle 10% do lote, estufa, 24h, 35ºC

 Meios de cultivo
Substâncias exigidas pelas bactérias e que são úteis a seu crescimento e multiplicação.

CLASSIFICAÇÃO (FUNÇÃO):

Simples Enriquecimento Seletivos Diferenciais Manutenção

Crescimento com
Componentes Substâncias
Sangue, soro, ovo, características Viabilidade.
essenciais inibidoras
extrato de relativamente
(mcos pouco
leveduras... definidas Ex.: conservantes
exigentes). Ex.: ágar
de cepas
Salmonella
Ex.: ágar sangue Ex.: ágar bacterianas
Ex.: caldo simples Shiguella
MacConkey

CLASSIFICAÇÃO (NATUREZA):

Animados Células vivas (animais, tecidos vivos, ovos embrionados)

Inanimados Sem células vivas. Naturais, sintéticos ou semissintéticos.

 Fim de aula!

MICROBIOLOGIA APLICADA

Biossegurança e Bactérias

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