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uel.br/pessoal/rogerio/genetica/respostas/pratica_03.html
Observe, na figura acima que a diferença entre os alelos A¹ e A² reside em um único nucleotídeo:
o sétimo par do alelo A¹ é C:G, contra T:A do alelo A². O esquema também mostra que essa
modificação resulta em códons diferentes no RNA mensageiro: CGG para o alelo A¹ e UGG para
o alelo A². Acontece que CGG resulta em incorporação do aminoácido arginina no peptídio
codificado pelo alelo A¹ e UGG resulta em triptofano no peptídeo codificado pelo alelo A².
Arginina é um aminoácido com um grupamento lateral hidrofílico e o triptofano possui
grupamento aromático. Tais propriedades diferentes podem alterar a forma como esses dois
peptídeos se dobram e interagem com outros peptídeos e seus substratos, podendo modificar o
fenótipo de quem os herdar.
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A duplicação do DNA
A duplicação dos cromossomos dos eucariotos começa em vários pontos da molécula de DNA,
com a ação de enzimas helicase e girase separando a dupla fita e levando a formação de várias
"bolhas de replicação", conforme exemplificado abaixo:
Como pode ser observado, cada bolha tem duas forquilhas de replicação, uma que segue para a
esquerda e a outra para a direita. Sendo assim, determine como a replicação do DNA se dá em
cada forquilha de replicação, tendo em vista as diferentes situações apontadas abaixo:
A) O por quê da necessidade de primers ou iniciadores para o início da duplicação do DNA:
As enzimas de síntese de DNA, chamadas DNA polimerases, não conseguem iniciar produção
de uma nova fita dessa molécula usando apenas o molde monofilamentar de DNA (uma das fitas
abertas). Nesse caso, também é necessário que, aderido a esse molde, exista um pequeno
segmento de RNA chamado primer ou iniciador - sintetizado por uma RNA polimerase (ou, nesse
caso, por uma primase) - e que oferece uma extremidade 3´-OH livre para que a DNA polimerase
continue o processo de duplicação dessa nova fita. Posteriormente, esse primer é retirado e
substituído por DNA:
(A) Abertura da forquilha de replicação, (B) Síntese do primer pela primase e (C) Extensão da
síntese de cada fita pela DNA polimerase.
B) A direção de síntese da nova fita de DNA e o fato das duas fitas moldes correrem em sentido
antiparalelo:
Além de necessitar de uma fita molde e de um primer, a DNA polimerase somente consegue
sintetizar uma nova molécula de DNA acrescentando novos nucleotídeos ao carbono 3´ do
açúcar (o carbono 5´ fica localizado na parte oposta a esse açúcar). Por isso se diz que a síntese
dos ácidos nucléicos ocorre no sentido 5´ → 3´. Como cada fita da molécula de DNA corre em
sentido inverso, a sua duplicação ocorre em direções opostas. O esquema abaixo mostra o
sentido da duplicação em apenas uma das fitas da molécula de DNA:
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C) O por quê de uma das fitas ser chamada de lagging (lenta) e a outra de leading (rápida):
Pelo fato da molécula de DNA ser formada por duas fitas que correm em sentido antiparalelo,
durante a abertura da forquilha de replicação, um dos filamentos vai sendo aberto no sentido 5'
→ 3' e o outro no sentido 3' → 5'. Assim, embora a progressão da síntese dessas duas fitas
aconteça simultaneamente, a medida em que essa forquilha é extendida, em uma delas a DNA
polimerase sempre terá uma extremidade 3´-OH livre para colocar o próximo nucleotídeo (a fita
leading). Na outra, de tempos em tempos, será necessária a síntese de um novo primer, para
que ela possa continuar esse processo (a fita lagging), conforme pode ser observado no
esquema abaixo:
Como vimos, um dos novos filamentos de DNA é sintetizado continuamente pela DNA
polimerase III; o outro, precisa ser sintetizado em partes. Fragmentos de Okazaki são justamente
os trechos curtos de primer + DNA (com cerca de 100 a 200 nucleotídeos, nos eucariotos)
produzidos temporariamente na fita de replicação descontínua.
Logo em seguida, os primers são removidos de ambas as fitas pela DNA polimerase I (a seta em
vermelho do esquema abaixo) que, ao mesmo tempo, vai completando a síntese da fita de DNA
no trecho liberado. Por fim, os filamentos adjacentes de DNA são unidos via ligação covalente
pela DNA ligase (o triângulo amarelo que aparece no esquema abaixo):
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Transcrição
O mecanismo de transcrição do DNA em RNA:
As moléculas de ácidos nucleicos (DNA e RNA) somente conseguem se parear se estiverem em
sentidos opostos. Esse sentido é dado pela posição dos carbonos 5' e 3' do açúcar (uma pentose
- desoxiribose no DNA e ribose no RNA) presente nessas moléculas, como pode ser observado
no esquema abaixo:
Isso vale para as duas fitas de uma molécula de DNA (por isso se diz que as duas fitas dessa
molécula correm em sentido antiparalelo), para as associações DNA-RNA, que ocorrem, por
exemplo, durante a transcrição, ou RNA-RNA, que ocorrem, por exemplo, durante a tradução,
entre moléculas de RNAs mensageiros e RNA transportadores. Além disso, a síntese de novas
fitas de ácidos nucleicos, quer seja DNA ou RNA, somente ocorrem no sentido 5´ → 3´. Portanto,
a fita que lhe serve de molde deve correr em sentido oposto (3´ ← 5´). Assim, se formos
considerar o processo de duplicação do trecho de DNA abaixo, este se dará da seguinte forma:
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Transcrição e tradução
Questão 1. A figura abaixo mostra um mesmo trecho de DNA, só que em cada uma das
situações o sítio de início e de término da transcrição se encontram em posições distintas:
A) O que significam os termos promotor e finalizador desse esquema? Quais seriam as funções
dessas sequências que estão presentes nas moléculas de DNA?
O sítio promotor é a região da molécula de DNA que informa o local em que um determinado
gene se origina. Ele é composto por sequências específicas de nucleotídeos reconhecidas pelas
enzimas responsáveis pela síntese de RNA. É depois dessa sequência que uma molécula de
RNA começa a ser sintetizada. Por outro lado, a região finalizadora contém uma sequência
nucleotídica também específica, que indica onde a transcrição da molécula de RNA deverá ser
encerrada. O esquema abaixo exemplifica o processo de transcrição bacteriano:
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B) Determine quais serão as sequências transcritas das moléculas de RNA mensageiros (RNAm)
para essas duas sequências. Não se esqueça de marcar as suas respectivas extremidades 5' e
3':
Na situação hipotética A, a transcrição se dará da seguinte forma:
C) Utilizando a tabela do código genético disponível abaixo, determine como seria a sequência
peptídica codificada por cada um dos dois RNAm produzidos nessas duas situações:
Devemos prestar atenção ao fato que toda molécula de RNAm que chega em um ribossomo para
a tradução sempre começará a ser lida pela sua extremidade 5´. Portanto, a fita de cima deverá
ser lida da esquerda para a direita e, a fita de baixo, da direita para a esquerda. A sequência de
uma molécula de mRNA é lida de 3 em 3 nucleotídeos, de uma maneira não sobreposta. Ou
seja, cada trinca de nucleotídeos, também chamada de códon, é lida uma única vez. E existe ao
menos um códon específico para cada um dos 20 aminoácidos comumente encontrados nos
peptídeos. Assim, usando a tabela do código genético para traduzirmos esses trechos,
descobrimos que esses dois RNAs nos fornecerão as seguintes sequências peptídicas:
Colocando os peptídeos formados, lado a lado, podemos perceber que eles não terão a mesma
sequência peptídica:
Situação hipotética A: Met-Ala-Gly-Ser-Val-Gly-His
D) Por que as sequências peptídicas não são idênticas se o trecho de DNA transcrito foi o
mesmo?
Isso acontece porque as duas fitas da molécula de DNA não são iguais, mas sim
complementares. Ou seja, se em uma das fitas temos uma adenina, na região correspondente da
outra fita teremos que ter uma timina, e assim por diante. Por esse motivo é que as regiões
promotoras dos genes são importantes. Elas informam para as enzimas envolvidas no processo
de transcrição não apenas o ponto exato em que a síntese da molécula de RNA deverá ser
iniciada, mas também qual das duas fitas do DNA deverá servir de molde para isso. Por sua vez,
essa fita de RNA codificará um peptídeo específico, que pode ser uma enzima, um hormônio,
uma proteína de membrana, uma proteína de defesa, e assim por diante.
B) Depois que o hnRNA mensageiro for processado, qual será a sequência resultante do RNA
mensageiro (mRNA)?
Depois de sintetizado esse hnRNA normalmente sofre uma série de modificações. Uma delas
envolve a retirada dos íntrons (os trechos em azul), resultando na seguinte sequência
codificadora no mRNA maduro:
C) Qual será a sequência de aminoácidos codificada por esse RNA mensageiro processado?
Depois de pronto, o mRNA segue para o citoplasma, onde será traduzido nos ribossomos, a
partir da sua porção 5', na seguinte sequência peptídica:
Legenda:
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Questão 3. Considerando os diferentes códons dos mRNA dados a seguir, indique como seria a
sequência da molécula de DNA que lhe deu origem, quais seriam os respectivos anticódons do
tRNA que se ligariam a esses códons, bem como o aminoácido a ser incorporado no peptídeo:
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