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Provas de Coombs

Prof. Dr. Luiz Carlos de Mattos Laboratrio de Imunogentica Molecular Hemocentro de So Jos do Rio Preto

Departamento de Biologia Molecular


Faculdade de Medicina de So Jos do Rio Preto

Antiglobulina humana (soro de Coombs)

soro humano

Antiglobulina humana Anti-IgG, anti-IgM, anti-IgA

Y Y Y

Anti-C3b, anti-C3c, anti-C3d

Soro de Coombs
1. Soros poli-especficos: 2. anti-IgG, anti-IgM, anti-IgA, anti-C3b, anti-C3c, anti-C3d.

Soros mono-especficos: anti-IgG anti-IgM

anti-IgA
anti-C3b Anti-C3c anti-C3d

Prova direta da antiglobulina


Coombs direto: 1. Princpio: Deteco de eritrcitos sensibilizados in vivo por anticorpos ou por fraes do complemento.

2.

Aplicaes:

Doena hemoltica perinatal


Anemias hemolticas auto-imunes Anemias hemolticas induzidas por drogas Reaes hemolticas ps-transfusionais

Prova direta da antiglobulina


Coombs direto positivo

Centrifugao

Eritrcitos sensibilizados in vivo

Eritrcitos aglutinados
Coombs direto negativo

Y
Centrifugao Eritrcitos no sensibilizados in vivo

Eritrcitos no aglutinados

Y Y

Y Y

Prova indireta da antiglobulina


Coombs indireto:

1.

Princpio: Deteco de anticorpos anti-eritrocitrios atravs da sensibilizao de hemcias in vitro.

2.

Aplicaes:
Pesquisa de anticorpos irregulares no soro de pacientes poli-transfundidos, gestantes, doadores, etc... Identificao das especificidades de anticorpos irregulares em painel de hemcias Investigao das reaes hemolticas ps-transfusionais Identificao de antgenos eritrocitrios (fenotipagem)

Prova indireta da antiglobulina


Primeira fase: sensibilizao dos eritrcitos in vitro

Y Y

+
Incubao Hemcias I e II

Soro com anticorpos irregulares

Eritrcitos sensibilizados in vitro

+
Incubao Hemcias I e II Soro sem anticorpos irregulares Eritrcitos no sensibilizados in vitro

Y Y

Prova indireta da antiglobulina

Eritrcitos sensibilizados in vitro

Centrifugao

Eritrcitos sensibilizados in vitro aglutinados


Coombs indireto negativo

Y
Centrifugao Eritrcitos no sensibilizados in vitro

Eritrcitos no sensibilizados in vitro no aglutinados

Y Y

Y Y

Segunda fase: deteco dos eritrcitos sensibilizados.

Coombs indireto positivo

Prova indireta da antiglobulina


A prova de Coombs indireta pode ser realizada: Em meio salino

Em meio albuminoso
Em soluo de baixa fora inica Com hemcias tratadas com enzimas (bromelina, papana, ficina Com uso de poli-etileno-glicol (PEG) Em tubos Em micro-placas Em gel-card

Em fase slida
Automatizadas

Controle de Coombs
Reaes de Coombs com resultados negativos.

Hemcias sensibilizadas (controle de Coombs) Centrifugao

Y
Eritrcitos no aglutinados

Hemcias sensibilizadas aglutinadas

Y Y Y

Y Y
Eritrcitos no aglutinados

Y Y