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RNA de

interferência
Professora: Adriana Seixas
Alunas: Andressa Pivato
Como tudo começou (1990)?

Utilizando petúnias, foram introduzidas cópias


adicionais do gene que codificava enzima
envolvida na indução de cor violeta das flores. No
entanto, a adição de mais cópias do gene levou a
um bloqueio parcial ou total da via de produção da
enzima relacionada com a síntese da cor violeta.
Andrew Fire e Craig Mello trabalharam a potente
e específica interferência genética por RNA de
cadeia dupla em C. elegans.
2006-Nobel
Neste trabalho descrevem as moléculas de dsRNA
como mais eficientes no processo.
Mas o que é
RNAi???
É desencadeado pela presença de RNA de dupla
fita (dsRNA, double-stranded RNA).

Esse processo também é conhecido por


silenciamento gênico a nível pós-transcricional
(PTGS, posttranscriptional gene silencing), uma
vez que o RNAi gera a quebra do RNA mensageiro
(mRNA) específico, resultando na redução e/ou
silenciamento da tradução do mesmo. 
RNAi

Provém de dsRNA, com aproximadamente 21-30 pares


de base (pb), que possuem regiões que são reconhecidas
pelas enzimas da maquinaria intracelular de RNAi.
Após o processamento endógeno ou exógeno:
micro RNA (miRNA) - Participam na regulação da
tradução do mRNA da célula.
pequeno RNA de interferência (siRNA, short-
interfering RNA) - Participam do sistema de defesa do
genoma de plantas e animais, além de controlar a
tradução do mRNA.
miRNA
Drosha cliva o pri-miRNA.
Os pré-miRNAs são
transportados para o citoplasma
através dos poros nucleares.
RNAse III (Dicer) processa os
pré-miRNAs em uma fita dupla
de RNA (miRNA duplex).
Apenas uma das fitas do
duplex que interage com o
complexo proteico de
silenciamento induzido (RISC,
RNA-induced silencing
complex).
siRNA
1) Transdução de vetores no
interior da célula (setas
vermelhas) - expressa genes
transcritos em moléculas de
shRNA que tenham como
alvo o gene que se espera
silenciar. O shRNA é clivado
pela proteína Drosha e assim
é processado pelo mecanismo
de RNAi.
2) siRNAs podem ser
introduzidas diretamente em
culturas de células (setas
Saúde;

Aplicações do
Melhoramento agrícola
RNAi

Controle de pragas.
Melhorament
o agrícola
Resistência ao mosaico dourado
no feijoeiro*
• Em diferentes ambientes, foi avaliada a interação do feijão
GM com populações de microrganismos, insetos e artrópodes,
bem como seu uso na alimentação de mamíferos, sem
qualquer efeito adverso.

• Também se realizou sua caracterização molecular e análises de


composição nutricional. As características foram estáveis tanto
nas plantas GM quanto nas testemunhas convencionais.
Feijão GM • Mais adiante, aprovado nos testes de biossegurança, tornou-se
o primeiro produto geneticamente modificado aprovado e
totalmente desenvolvido por uma instituição pública na
América Latina. E o primeiro feijão geneticamente modificado
no mundo.

• Logo depois, outros grupos de pesquisa desenvolveram milho,


tomate e mandioca resistentes a geminivírus.
Controle a
pragas
Saúde
A Degeneração Macular Relacionada
a Idade (DMRI) é uma doença que
afeta a mácula, parte da retina
responsável pela visão central,
necessária para leitura,
reconhecimento de pessoas, entre
outros.
Como ocorre?
Peptídeo com propriedades que
estimulavam a neovascularização e o
crescimento do endotélio celular,
denominado como fator de
crescimento vascular endotelial
Saúde
A hipercolesterolemia é uma condição
que se caracteriza pela presença de
taxas elevadas de colesterol no
sangue, que afeta um quinto da
população brasileira.
O RNAi pode ser utilizado para
bloquear a produção de LDL.
Obrigada

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