Universidade do Estado do Rio de Janeiro

Instituto de Biologia Roberto Alcantara Gomes

Departamento de Farmacologia e Psicobiologia
Laboratório de Farmacologia Cardiovascular e Plantas Medicinais

Efeito anti-hipertensivo do extrato hidroalcoólico de

folhas de Colônia (Alpinia zerumbet) em ratos
espontaneamente hipertensos

Aluno: Matheus Pontes de Menezes

Orientador: Profª Drª Dayane Teixeira Ognibene
 Introdução
A hipertensão arterial sistêmica (HAS) representa a principal causa de
morbidade e mortalidade global, contribuindo direta ou indiretamente para
50% das mortes por doenças cardiovasculares.

No Brasil, mais de 30% da população é hipertensa, dessa parcela 60% de

idosos com idade acima de 60 anos. Estima-se que a prevalência da doença
aumentará em aproximadamente 60% nos próximos 30 anos.

2015

http://www.who.int/gho/mortality_burden_disease/en / http://www.thelancet.com/journals/lancet/article/PIIS0140-6736(14)61682-2/fulltext
Introdução
A HAS se caracteriza pelo aumento estável nos níveis de pressão, tanto
sistólica quanto diastólica --> nível de pressão arterial sistólica maior ou igual
a 140 mmHg, e nível de pressão diastólica maior ou igual a 90 mmHg (7ª
Diretriz Brasileira de Hipertensão Arterial, 2016).

HAS associa-se à alterações funcionais e estruturais de certos órgãos alvos,

podendo ser agravada pela presença de fatores de risco, tais como:

Diabetes mellitus;
Obesidade;
Ingestão excessiva de sal;
Genética;
Faixa etária;
Introdução

Como consequência a essa alteração agravada por fatores de risco estão

eventos como:

infarto agudo do miocárdio;

doença renal crônica;

insuficiência cardíaca;
Introdução
Fatores envolvidos:

 A HAS está associada à alterações funcionais e estruturais características

como:

disfunção endotelial

remodelamento arterial influenciado pelo estresse

oxidativo
inflamação vascular
Introdução

Estresse oxidativo

Desequilíbrio entre substâncias pró-oxidantes e antioxidantes. Esse

desequilíbrio gera um aumento da biodisponibilidade de EROs, o que
leva a danos nos tecidos.

Atividade das enzimas antioxidantes (SOD, CAT, GPx)

Velazquez I, Plaud M, Wojna V, Skolasky R, Laspiur JP, Melendez LM. Antioxidant enzyme
dysfunction in monocytes and CSF of Hispanic women with HIV-associated cognitive
impairment. J Neuroimmunol. 2009
Introdução
Disfunção Endotelial:

Redução no relaxamento vascular dependente do endotélio, ocorrendo,

dentre outros motivos, pela diminuição da biodisponibilidade de NO.

Alteração na via L-arginina/NO endotelial.

Alto nível de estresse oxidativo, sugerindo um papel central de espécies

reativas de oxigênio

ONOO-

Adaptado de Toblli JE, DiGennaro F, Giani JF,

Dominici FP. Nebivolol: impact on cardiac and
endothelial function and clinical utility. Vasc
Health Risk Manag, 2012.
Introdução
Disfunção Endotelial:

Redução no relaxamento vascular dependente do endotélio, ocorrendo,

dentre outros motivos, pela diminuição da biodisponibilidade de NO.

Alteração na via L-arginina/NO endotelial.

Alto nível de estresse oxidativo, sugerindo um papel central de espécies

reativas de oxigênio

Adaptado de Toblli JE, DiGennaro F, Giani JF,

Dominici FP. Nebivolol: impact on cardiac and
endothelial function and clinical utility. Vasc
Health Risk Manag, 2012.
Introdução
Disfunção Endotelial:

Redução no relaxamento vascular dependente do endotélio, ocorrendo,

dentre outros motivos, pela diminuição da biodisponibilidade de NO.

Alteração na via L-arginina/NO endotelial.

Alto nível de estresse oxidativo, sugerindo um papel central de espécies

reativas de oxigênio

EROs

Adaptado de Toblli JE, DiGennaro F, Giani JF,

Dominici FP. Nebivolol: impact on cardiac and
endothelial function and clinical utility. Vasc
Health Risk Manag, 2012.
Introdução
Remodelamento arterial

Associado a alterações do diâmetro luminal e na espessura da camada média,

em resposta ao aumento da pressão arterial.

Na HAS, o remodelamento das artérias de maior calibre, como a aorta, é

caracterizado, principalmente, pela redução do lúmen e aumento da
espessura da camada íntima-media.

Vascular biology of ageing—Implications in hypertension; Adam Harvey, Augusto C.

Montezano, and Rhian M. Touyz, 2015
Introdução
 Alpinia Zerumbet: é uma espécie aromática da família Zingiberaceae, distribuída por
regiões tropicais e subtropicais no mundo. Originária do Oeste da Ásia, no Brasil se
encontra mais ao Nordeste do país, onde é popularmente conhecida como “colônia”.

 Estudos prévios do nosso grupo mostraram o efeito anti-hipertensivo (modelo DOCA-

salt) e vasodilatador dependente do endotélio, promovido pelo extrato hidroalcoólico
da folha da colônia, com a participação da via NO-GMPc e dos receptores B2 da
bradicinina.

Vasodilatador

Anti-hipertensivo Antioxidante

Antiulcerogênico Ansiolítico

(LAHLOU, 2003) (SANTOS et al., 2011) (DE MOURA R.S., 2005)

Objetivo

Objetivo geral:

Avaliar os efeitos do extrato hidroalcoólico de folhas da colônia (Alpinia

zerumbet) sobre as alterações cardiovasculares observadas em ratos
espontaneamente hipertensos (SHR).
Objetivo

Objetivos específicos:

Avaliar os efeitos da colônia sobre seguintes parâmetros

Pressão arterial sistólica, diastólica e média;

Respostas vasodilatadoras induzidas por acetilcolina e nitroglicerina em
leito arterial mesentérico isolado;
Peroxidação lipídica e atividade das enzimas antioxidantes superóxido
dismutase e catalase em plasma;
Morfologia da artéria aorta.
Materiais e métodos
Efeito vasodilatador da Colônia: LAM de 6 ratos Wistar normotensos, com 90 dias de idade.

Efeito do tratamento crônico com Colônia: 20 ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e 20

ratos Wistar-Kyoto (WKY), com 90 dias de idade, pesando entre 300g e 430g

GRUPOS EXPERIMENTAIS

WKY Água

Colônia
WKY+COL
50mg/kg/d 5
semanas
SHR Água

Colônia
SHR+COL 50mg/kg/d
Materiais e métodos

 Obtenção do extrato hidroalcoólico de folhas da Colônia (Alpinia zerumbet):

Descrito por Soares de Moura, 2005.
Materiais e métodos

Pressão Arterial: realizadas de modo não invasivo, pela técnica de

pletismografia de cauda - 1 vez/semana durante 5 semanas do tratamento.
Materiais e métodos

Eutanásia: os ratos foram anestesiados e realizada a laparotomia, com

posterior coleta de sangue, assim como isolamento do leito arterial
mesentérico (LAM).

Os rins e corações foram coletados e congelados a -80°C para posterior

utilização em diferentes ensaios. As artérias aortas coletadas foram
preservadas em formol para posterior análise morfológica.
Materiais e métodos
Reatividade vascular:

Efeito da viabilidade vascular no tratamento crônico com a colônia:

O LAM foi isolado e acoplado a um sistema de perfusão de órgãos,
onde foram testadas a viabilidade e função do endotélio nos grupos.
Materiais e métodos

Atividade da enzima antioxidante SOD em plasma: analisado por

espectrofotometria (480nm).

Atividade da enzima antioxidante Catalase em plasma: analisado por

espectrofotometria (240nm).

Medida de dano oxidativo em lipídeos no plasma: (TBARS) - analisado

por espectrofotometria (532nm).
Materiais e métodos

Análise da espessura da camada íntima-média da aorta: os cortes da

aorta foram alocados em lâminas histológicas para a coloração HE. As
análises foram realizadas com o programa Image-Pro Plus;

Análise Estatística: os dados foram analisados utilizando-se ANOVA,

para comparar as diferenças entre os diversos grupos experimentais, com
posterior uso do teste Tukey.
Resultados e Discussão

- Resposta vasodilatadora do extrato hidroalcoólico da Colônia

20
% Relaxamento

40

60

80

100
1 3 6 10 30 60 100
Colônia (g)

De MOURA RS et al., 2005

 Resultados e Discussão

- Efeito do tratamento com Colônia sobre a pressão arterial

WKY
WKY+Colônia
SHR
A) 220
SHR+Colônia
B) 180 C) 180

* * * *
* * * *
200 * 160
* 160
* * * * *
* & * * *&

PAM (mm Hg)

PAD (mm Hg)
PAS (mm Hg)

180 140 *
*& *& 140 *&
160 * &
*&
120 *&
*& 120
* &
140 *&
100
* &
100
120
80
100 80
1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5
Semanas Semanas Semanas

De MOURA RS et al., 2005

Resultados e Discussão

- Efeito do tratamento com Colônia sobre as respostas vasodilatadoras em LAM

WKY
WKY + Colônia
SHR
SHR + Colônia
A) B)
0 0

20 20

% Relaxamento
% Relaxamento

40 40

60 60
*
80 80
*
100 100

Acetilcolina (pmol) Nitroglicerina (nmol)

KONG X. et al., 2015

Resultados e Discussão

- Efeito do tratamento com Colônia sobre os níveis de peroxidação

lipídica em plasma

TBARS (nmol TBA/mg ptn) 1.0

0.8

0.6

0.4

0.2

0.0

SIMÃO S. et al., 2011

Resultados e Discussão

- Efeito do tratamento com Colônia sobre as atividades de enzimas antioxidantes

em plasma

SHEN X.C. et al., 2012

Resultados e Discussão

- Efeito do tratamento com Colônia sobre as alterações morfológicas da

aorta

GU Q. et al., 2014
Conclusão

Os resultados do presente estudo demonstraram que o tratamento crônico

com o extrato hidroalcoólico de folhas de Colônia (Alpinia zerumbet) reduz
a pressão arterial e a hipertrofia da artéria aorta em ratos
espontaneamente hipertensos.

Estes efeitos benéficos podem estar relacionados ao seu efeito

vasodilatador e ao aumento da atividade da enzima antioxidante
superóxido dismutase.

No entanto, ainda são necessários estudos para esclarecer os mecanismos

envolvidos neste efeito benéfico induzido pelo extrato.