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Sebenta
IMUNODEPRIMIDOS
Baseada no
ABBAS
Autores:
Catarina Jacinto Correia
Filipa Pereira
Helena Couto
Ins Pacheco Nunes
Joana Miranda
Joo Pedro Apolinrio
Joo Pedro Soares
Joo Pedro Sousa
Mnica Santos
Rui Carvalho
Margarida Nunes
Realizada em:
Fevereiro de 2012
1
PREFCIO
Imunologia - Uma doena com imunidade adquirida
2 edio: A Imunologia Contra-ataca
Caros colegas,
Existe uma multiplicidade de stios para estudar Imunologia e sabemos que,
devido ao seu imenso valor relativo no exame de Mdulo II a), h a tendncia para a
deixar ficar para trs. Tentmos, por isso, compilar a informao de vrios stios num
s local.
A nossa ideia no era que esta sebenta fosse uma traduo do Abbas, mas
mais um resumo que aborde a matria da disciplina de forma concisa. Juntmos ento
os temas das aulas tericas, os temas principais descritos no livro aconselhado, e
tambm do Arosa, e crimos um ndice que nos parece ser o mais indicado. Para uma
mais fcil navegao, iro notar que no incio de cada tema tm o ttulo
correspondente respectiva aula terica, a data em que foi leccionada e ainda os
recursos que foram usados para aprofundar esse tema.
Esperamos que a sebenta d para desvendar ao mximo os mistrios da
Imunologia no mnimo de tempo possvel. No entanto, se desejarem aprofundar mais
os temas, devero recorrer aos livros aconselhados.
Estamos ainda vossa disposio caso queiram fazer algum reparo,
encontrem algum erro ou qualquer coisa que queiram ver esclarecida. Contactem-nos
pelo nosso mail campus. Caso no o encontrem, utilizem o e-mail da nossa comisso
de curso (comissaodecurso1016@aefml.com).
Nesta 2 edio, ps-exame da 1 fase (e, por isso, com maior conscincia do
que focado no mesmo), procurmos resumir partes excessivamente extensas,
explicar pormenores que nos escaparam e corrigir alguns erros e imprecises.
Realizada no intervalo entre as duas fases, na esperana de ainda servir quem
enfrentar nova provao no dia 2 de Maro, esta nova verso, longe de estar perfeita,
, ainda assim, um ligeiro upgrade em relao sebenta anterior.
Os autores
ndice
T1: Introduo Imunologia .......................................................................... 2
T2: Imunidade Inata........................................................................................... 2
T3 I: Inflamao Resposta Inflamatria ................................................. 2
T3 II: Inflamao Migrao Leuccitos para os Tecidos .................. 2
T4: Homeostasia e Clonalidade ..................................................................... 2
TP4: Introduo/Diferenciao e Activao Linfocitria ................... 2
T5: Activao de Linfcitos T ......................................................................... 2
T6 I: Imunidade Humoral Activao de Linfcitos B e Produo
de Anticorpos........................................................................................................ 2
T6 II: Imunidade Humoral Mecanismos Efectores da Imunidade
Humoral .................................................................................................................. 2
T7: Imunidade Celular Mecanismos Efectores da Imunidade
Mediada por Clulas........................................................................................... 2
T8: Apresentao de Antignios pelo MHC .............................................. 2
T9: Imunodeficincias Primrias.................................................................. 2
T10: Tolerncia .................................................................................................... 2
*Hipersensibilidade ........................................................................................... 2
T11: Memria imunolgica, adjuvantes e vacinas ................................. 2
T12: Imunodeficincias secundrias-HIV/SIDA..................................... 2
INTRODUO IMUNOLOGIA
Historicamente, imunidade significava proteco contra a doena, mais
especificamente, doena infecciosa. As clulas e molculas responsveis por essa
imunidade constituem o sistema imunitrio, e a sua aco colectiva e coordenada
em resposta introduo de substncias exgenas denominada de resposta
imunitria.
A funo fisiolgica do sistema imunitrio a defesa contra microrganismos
infecciosos. No entanto, at substncias exgenas no-infecciosas podem
desencadear resposta imunitria.
E ainda, mecanismos que tm como finalidade a proteco do organismo face a
ameaas externas, tambm so capazes de provocar dano ao nvel dos tecidos e, at
mesmo, doena.
Em certas situaes, at molculas do prprio podem desencadear respostas
imunitrias (assim chamadas de respostas auto-imunes).
Assim, uma melhor definio de resposta imunitria:
Especificidade
Memria
Capacidade de
distingir o self do
non-self
Diversidade
Expanso clonal
Especializao
Promoo da
Homeostasia
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T2:
Imunidade
Inataser, entre outros, abordado ao longo desta sebenta)
(O tema
da imunidade adquirida
Data terica de 4 de Outubro de 2011
Captulos do Abbas: 4
IMUNIDADE INATA
IMUNIDADE INATA (NO-ESPECFICA) CARACTERSTICAS:
Primeira linha de defesa do organismo face invaso por
microorganismos estranhos. Consiste num conjunto de mecanismos de
defesa, celulares e bioqumicos, pr-existentes infeco, que desencadeiam
uma resposta rpida no sentido de prevenir, controlar e minimizar a infeco.
Resposta sem grande especificidade.
No possui memria imunolgica.
Componentes de defesa inata reagem de modo diferente consoante a
infeco. A Imunidade Inata contra micrbios estimula a resposta imunitria
adaptativa (imunidade adquirida), optimizando-a contra diferentes tipos de
micrbios.
Reconhece produtos de clulas mortas ou danificadas, trata de eliminlas e iniciar um processo de reparao dos tecidos afectados. Reconhece
substncias intrnsecas que no se deviam encontrar em tecidos saudveis,
como cristais intracelulares.
COMPONENTES:
1- BARREIRAS ANATMICAS E
FISIOLGICAS:
Pele e mucosas:
o Epiderme: vrias camadas de
clulas epiteliais, sendo a
mais externa constituda por
clulas mortas e por uma
cama impermeabilizante, a
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queratina.
o Derme: com vasos sanguneos, glndulas sudorparas e folculos pilosos.
Estes contm glndulas sebceas, que produzem sebum. O sebum tem
cidos lcticos e cidos gordos que mantm o pH da pele cido (3-5),
inibindo o crescimento de microrganismos.
o Mucosas: organismos de defesa aguda inata que impedem a entrada de
microrganismos nas mucosas: saliva, lgrimas e secrees mucosas.
Possuem substncias anti-bacterianas e anti-virais.
Movimentos intestinais
Oscilao dos clios bronco-pulmonares
Tosse e espirros
2- BARREIRAS QUMICAS:
Lisozimas (secrees oro-naso-farngicas e lgrimas):
o
Grupo proteico produzido por clulas infectadas por vrus. Liga-se a clulas vizinhas e despoleta um estado geral anti-vrico.
Sistema Complemento
o
Proteina C-Reactiva
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Clula Fagoctica
Microorganismos
PRR
PAMPs ou MAMPs
DAMPs
(Pathogen-Associated Molecular
Patterns)
(Microbe-Associated Molecular
Patterns)
(Damage-Associated
Molecular Patterns)
membrane-bound,
como os TLRs (Toll-Like
receptors) ou MRs (Mannose
receptors), encontrados na
membrana celular e em
vesculas endossomais
superfcie das clulas
cytoplasmatic,
como
os
NOD,
presentes
no
citoplasma
P
Padres moleculares
A
associados a patognese
M
Classes de molculas
expressas P
por agentes
patognicos
s
Microrganismos diferentes
podem expressar o mesmo
o
PAMP, reconhecido pelo
mesmo PRR. Assim
sendo, o
u
mesmo PRR pode reconhecer
PAMPs de microrganismos
diferentes.
M
A
M
P
s
(
P
a
Clulas Danificadas
P
Padres moleculares
associados A
a dano celular
M
Molculas expressas por
P
clulas danificadas
ou a
morrer. (nosso expressas
por clulas em apoptose)
o
u
M
A
M
P
s
(
P
a
t
Activao de clulas
NK - Natural Killer
SISTEMA COMPLEMENTO
Grupo de protenas serosas que circulam em estado inactivo. Quando activas,
destroem as membranas dos organismos patognicos e promovem a fagocitose.
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PATHWAY
Classical
Alternative
Lectin
Desencadeado
pela
protena
plasmtica
mannose-binding
Lectin (MBL) que,
como o nome indica,
reconhece resduos
terminais de manose
em glicoprotenas e
glicolpidos
de
micrbios e liga-se a
eles.
MASP1 e MASP2 so
activadas
com
funes semelhantes
C1r e C1s associamse
MBL
e
desencadeiam
cascatas proteolticas
semelhantes
ao
classical pathway.
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RESPOSTA INFLAMATRIA
Inflamao: Processo de que o organismo dispe para localizar, neutralizar ou
eliminar um agente agressor (viral, bacteriano, outro); i.e., o afluxo de leuccitos,
protenas e molculas do plasma sanguneo ao foco inflamatrio,
desencadeando-se os mecanismos reaccionais que caracterizam este processo.
Calor
Rubor
Edema
Dor
Citocinas pr-inflamatrias
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REACO INFLAMATRIA
Neutrfilos
Moncitos
Recrutados em 1 lugar
efeito Histamina
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MIGRAO CELULAR
De um modo geral a migrao celular processa-se em quatro tempos:
Fixao das clulas circulantes ao endotlio vascular e rolamento sobre este;
Activao;
Adeso mais firme s clulas endoteliais;
Travessia desse endotlio, atradas para o foco inflamatrio sob o efeito dos
estmulos quimiotcticos ali gerados.
Os padres de migrao celular so complexos: dependem no s da variabilidade
das suas molculas de superfcie como da natureza e da densidade das molculas
expressas pelas clulas endoteliais. Assim, por exemplo, as clulas endoteliais das
chamadas vnulas de endotlio alto (presentes em rgos linfides secundrios) so
muito diferentes das clulas endoteliais encontradas em tecidos no linfides. Ou seja,
com este exemplo pretende-se demonstrar que a expresso de novas molculas de
adeso, ou o aumento da sua densidade, nas clulas endoteliais, sob influncia
de citocinas produzidas no foco inflamatrio , assim, um fenmeno que
acompanha o processo inflamatrio no geral.
Para alm da migrao celular, participam activa e decisivamente no processo
inflamatrio as molculas que chegam ao foco da inflamao por transudao do
plasma processo determinado, sobretudo, pelo aumento de permeabilidade
vascular. , assim, possvel a grandes molculas, como anticorpos, componentes do
complemento e molculas de outros sistemas enzimticos do plasma aflurem ao foco
inflamatrio. Assim, geram-se factores quimiotcticos com vrias origens, citocinas e
quimiocinas.
Por sua vez, as clulas que intervm no processo inflamatrio produzem citocinas cujo
papel particularmente importante na sinalizao e interaco celular.
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Origem
TNF*
(tumor necrosis
factor)
Macrfagos, Linfcitos T
IL-1*
Macrfagos, Clulas
Endoteliais, algumas
clulas epiteliais
Quimiocinas
Macrfagos, Clulas
Endoteliais, Linfcitos T,
Fibroblastos, Plaquetas
inflamao, coagulao
Neutrfilos: activao
Hipotlamo febre
Fgado: sntese de protenas de fase
aguda
Msculo e Adipcitos: catabolismo
( caquexia)
Outros tipos celulares: apoptose!
Cls.Endoteliais:
activao
inflamao, coagulao
Hipotlamo febre
Fgado: sntese de protenas de fase
aguda
Leuccitos: quimiotaxia, activao,
migrao p/ tecidos
Macrfagos, Clulas
Dendrticas
IL-6 outra citocina importante na resposta inflamatria aguda que tem efeitos
a nvel local e a nvel sistmico. Inclui, como efeitos, a sntese de inmeros
mediadores inflamatrios no fgado, a estimulao da produo de neutrfilos na
medula ssea e a diferenciao de linfcitos TH que produzem IL-17. A IL-6
sintetizada por fagcitos mononucleares, clulas endoteliais vasculares, fibroblastos e
outras clulas em resposta a PAMPs, IL-1 e ao TNF.
O receptor para a IL-6 consiste basicamente numa cadeia polipeptdica com um
ligando para a citocina e numa sub-unidade de transduo de sinal. O receptor para a
IL-6 impulsiona uma via de sinalizao que activa o factor de transcrio STAT3.
18
20
TNF, IL-1 e IL-6 produzidos durante a resposta imunitria inata a uma infeco
ou leso de tecidos tm efeitos sistmicos que contribuem para a defesa do
hospedeiro e so responsveis por muitos dos sinais de infeco e inflamao.
Podem ter efeitos positivos que ajudam no combate da seleco ou efeitos
patolgicos.
A inflamao aguda pode ainda causar leses nos tecidos devido aos
mecanismos efectores que os fagcitos usam para matar os microrganismos
dado que so altamente txicos para os tecidos hospedeiros. As enzimas
proteolticas e as ROS produzidas pelos fagcitos e que se acumulam nos locais das
infeces podem lesar as clulas do hospedeiro e degradar matriz extracelular se
estiverem em grandes quantidades, especialmente quando h uma resistncia
microbiana e a infeco se prolonga continuando a estimular uma resposta imunitria
inata. De facto, muitas das manifestaes patolgicas associadas a infeces devemse s respostas inflamatrias e no aos efeitos txicos dos microrganismos em si.
Inflamao aguda pode ainda causar leses teciduais que podem desencadear
doenas auto-imunes, caso em que os neutrfilos e macrfagos ficam activados
parte da estimulao do sistema imunitrio pelos antignios do prprio
organismo. Tal como na inflamao induzida por infeco, TNF, IL-1, IL-6 e IL-12
so os indutores-chave da doena auto-imune.
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Inflamao Aguda
Inflamao Crnica
Desenvolve-se aps estado de
inflamao aguda quando infeco no
eliminada - Tardia
Maior perodo de durao
Envolve recrutamento e activao de
moncitos e linfcitos; [neutrfilos]
Sofre remodelao tecidual com
angiognese e fibrose
Reaco Imunolgica Adaptativa
Componentes da
resposta imunolgica
Resposta Inata ou
Natural
Resposta Adaptativa ou
Adquirida
Ocorrncia Temporal
Barreira Fsica e Qumica
Clulas Fagocticas
NK/NKT
Linfcitos T
Linfcitos B
Anticorpos
Complemento
Citocinas
Imediata
+
+
+
- (excepto: T)
- (excepto: B-1)
- (excepto: naturais)
+
+
Especificidade
Largo Espectro
(pouco especfica)
Tardia
+
+
+
+
+
+
+
Restrita
(antignios particulares
para um dado agente
patognico; detalhes
estruturais)
+
+ (clonal)
Memria Imunolgica
Amplificao
+ presente; - ausente
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seus receptores (ou do antignio ao receptor no caso dos linfcitos), o que leva
alterao da conformao do domnio extracelular das integrinas para uma
conformao em que a interaco destas com os seus ligandos mais fcil.
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LEUCCITO-ENDOTLIO
EXTRAVASAO
DOS
27
28
PATOLOGIAS ASSOCIADAS
29
NOTA INTRODUTRIA:
Neste captulo so focados os pontos essenciais sobre os temas homeostasia e
clonalidade, com base na informao contida (e dispersa por vrios captulos) no
Abbas. Para alm disso, encontram-se inseridas algumas informaes adicionais
(tambm espalhadas em diferentes captulos) do Arosa, e, ainda, informaes da aula
terica. Estas ltimas no se encontram na totalidade, visto que algumas partes da
aula incidiram sobre a parte da investigao laboratorial destes temas, que so de
difcil compreenso apenas atravs dos slides.
INTRODUO
Todas as respostas a antignios, tanto humorais como mediadas por clulas, possuem
um conjunto de propriedades fundamentais que refletem as propriedades dos linfcitos
que medeiam essas mesmas respostas. Nesse conjunto de propriedades
fundamentais encontram-se a Homeostasia e a Clonalidade.
HOMEOSTASIA
PERSPECTIVA HISTRICA
Em 1932, Walter Cannon definiu homeostasia como sendo a manuteno do
equilbrio, ou de condies constantes, num sitema biolgico atravs de mecanismos
de feedback que neutralizam perturbaes que tendem a desequilibrar esse mesmo
sistema.
Cannon, para explicar o que acontecia em sistemas biolgicos, utilizou como
modelo/paradigma a manuteno da presso na mquina a vapor.
Por exemplo, quando a presso inferior necessria para manter a funcionalidade
da mquina a vapor, accionam-se uma srie de engenhos que produzem um aumento
da presso at aos valores desejados. Da mesma forma, quando o nmero de
linfcitos insuficiente para dar resposta a um agente patognico, por exemplo,
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Como acabmos de ver, esta ideia de regulao por mecanismos homeostticos pode
ser aplicada na imunidade, mais propriamente, na manuteno de um nmero
constante de linfcitos no organismo.
CLONALIDADE
Numa resposta imune, os linfcitos T naive so activados por um antignio, entram em
diviso e produzem uma descendncia de clulas-filhas ou clones, processo
designado por expanso clonal.
A expanso clonal dos linfcitos especficos de um antignio a multiplicao de
clulas que especificamente reconhecem, se ligam e so activados por um s tipo de
antignio, constituindo uma famlia de clulas morfolgica e funcionalmente idnticas,
aquilo que se designa de clone. Este aumento nas clulas antignio-especficas
confere resposta imune adaptativa a capacidade de acompanhar o nmero de
agentes patognicos infecciosos, que se dividem rapidamente.
Estudos in vitro indicam que a proliferao como resposta a um antignio promovida
pela IL-2 produzida pelos prprios linfcitos T em diviso (aco autcrina), garantido,
assim, que as clulas T antignio-especficas sejam as que mais proliferam.
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32
Qualquer perda de linfcitos leva a uma proliferao compensatria das clulas que
sobrevivem a essa perda, aumentando, assim, a quantidade de linfcitos. Por
exemplo, se clulas naive forem transferidas para um ratinho que possui uma
deficincia linfocitria, os linfcitos que foram transferidos comeam a proliferar e sua
quantidade aumenta at que se atinja, aproximadamente, o nmero de linfcitos que
se encontrariam num ratinho sem linfopnia. Este processo designado de
proliferao homeosttica, uma vez que o objectivo obter o nmero ptimo de
linfcitos de forma a manter a homeostasia do sistema imunitrio.
A proliferao homeosttica parece ser influenciada pelos mesmos sinais que so
necessrios para a manuteno de linfcitos naive, ou seja, o reconhecimento de
alguns autoantignios e citocinas (IL-7, principalmente).
33
COMO ESTUDAR/INVESTIGAR
LINFCITOS T?
OS
MECANISMOS
DE
MANUTENO
DE
34
CONCLUSES
O mecanismo de feedback negativo, essencial para a regulao homeosttica de
linfcitos, depende da densidade/nmero de clulas.
Em que mais picos correspondem a maior nmero de diferentes CDR3, logo, maior
diversidade
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NOTA INTRODUTRIA:
Este captulo tem como objectivo abordar as temticas que, apesar de no terem sido
abordadas nas tericas, foram o foco de muitos dos trabalhos realizados nas aulas
terico-prticas, em particular da 4 aula, sobre o Desenvolvimento e Activao
Linfocitria.
Posto isto, vamos centrar-nos apenas no Desenvolvimento Linfocitrio.
DESENVOLVIMENTO
LINFOCITRIO
O processo que d origem a linfcitos, B e T, capazes de reconhecer antignios
especficos denomina-se de desenvolvimento ou maturao linfocitria. Deste
processo, fazem parte mecanismos que permitem: o desenvolvimento de linhagens
diferentes de linfcitos a partir dos mesmos progenitores; o rearranjo gentico
necessrio expresso de diferentes receptores, especficos para determinados
ligandos e antignios; a proliferao dos linfcitos com os receptores adequados
aco a que esto pr-destinados e a eliminao de outros, com receptores
inadequados.
O resultado final so linfcitos de vrias populaes distintas, com receptores
devidamente funcionais e capazes de dar uma resposta o mais rpido e eficazmente
possvel presena de antignios estranhos ao organismo.
Neste processo de maturao, muitas fases e mecanismos so comuns a todas as
populaes linfocitrias. Portanto, antes de especificar o desenvolvimento para os dois
diferentes tipos de linfcitos que pretendemos abordar (B e T), convm abordar os
aspectos comuns ao desenvolvimento dos linfcitos em geral.
COMMITMENT
O processo que define a linhagem a que pertence cada progenitor linfocitrio
comum depende de diversos receptores superfcie das clulas e de factores de
transcrio. So fundamentais, por um lado, para induzir protenas essenciais
diferenciao e ao rearranjo gentico. Por outro, vo tornar os genes que codificam os
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PROLIFERAO
A proliferao garante, como j foi dito, um pool de clulas precursoras considervel,
para que se possa originar uma quantidade aceitvel de linfcitos funcionais (contando
que haver mutaes, nem todos os linfcitos formados inicialmente so devidamente
eficazes, sendo eliminados).
Para promover a proliferao, so necessrios sinais mediados por citocinas.
Experincias permitiram saber que a IL-7, produzida na medula ssea e no timo,
importante sobretudo na proliferao dos progenitores de linfcitos T. A doena da
imunodeficincia combinada severa ligada ao cromossoma X (X-linked severe
sombined immunodeficiency disease) corresponde a uma mutao numa cadeia da IL7, e resulta em graves bloqueios no desenvolvimento de linfcitos T e NK, mas com
normal desenvolvimento de linfcitos B.
A proliferao cessa quando expressa a primeira cadeia do receptor de antignios
especfico. No caso do BCR B-cell receptor, que corresponde Ig -, expressa-se
inicialmente a cadeia pesada do Ig. No caso do TCR, expressa inicialmente a cadeia
do TCR. Este um passo essencial sobrevivncia, expanso e continuao do
desenvolvimento de um linfcito.
SELECO
Vrios mecanismos no decurso da maturao linfocitria checkpoints - permitem
que apenas linfcitos com os devidos receptores, capazes de reconhecer antignios
estranhos e, alm disso, de no reconhecer antignios self, sobrevivam e proliferem
39
DIFERENCIAO
No final do desenvolvimento, sero obtidas no apenas duas populaes de linfcitos,
B e T, mas vrias subpopulaes dentro de cada uma das duas principais. Assim
sendo, um linfcito B pode desenvolver-se num linfcito B folicular, num linfcito B-1,
ou num linfcito B de zona marginal. Por sua vez, encontramos quatro subtipos de
linfcitos T: CD4+, CD8+, linfcitos T e linfcitos T NK.
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DESENVOLVIMENTO DE LINFCITOS B
O desenvolvimento dos linfcitos B decorre, na maior parte dos casos, totalmente na
medula ssea, sendo que independentemente da provenincia dos progenitores
linfocitrios comuns, l que terminam a sua maturao em clulas B maduras.
Consideram-se vrias fases no desenvolvimento de um linfcito B, consoante os
marcadores de superfcie que apresentam e pelo receptor que os caracterizam. So
elas:
linfcito pr-B
linfcito pr-B
linfcito B imaturo
linfcito B maduro
Vamos agora descrever o que caracteriza cada uma destas fases e que processos
ocorrem, especificamente, em cada uma.
LINFCITO PR-B
So os linfcitos que se seguem imediatamente ao commitment de progenitores
comuns, correspondendo linhagem precursora de linfcitos B. Distinguem-se de
outros linfcitos imaturos por expressarem CD19 e CD10, entre outros marcadores de
superfcie.
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LINFCITO PR-B
Estes linfcitos diferem dos anteriores na medida em que j expressam a protena ,
resultado do rearranjo da cadeia pesada do receptor Ig. Assim, pode-se dizer que
expressam Ig - correspondente cadeia pesada do receptor Ig maduro. Esta
associa-se a outras protenas, como a V pr-B e a 5, produzidas pelo pr e prlinfcitos B e anlogas s cadeias leves do receptor Ig, substituindo-as
temporariamente (denominam-se, por isso, cadeias de aluguer). Fazem tambm parte
deste complexo protenas Ig e Ig, que depois iro constituir parte do receptor BCR
maduro. No conjunto, este novo receptor tambm denominado receptor pr-B, ou
pr-BCR.
No se sabe ao certo quais os ligandos deste receptor, ou o que ele reconhece. No
entanto, sabe-se que a presena de um pr-BCR funciona como checkpoint, emitindo
sinalizaes que permitem o avano para a fase seguinte. Mais propriamente,
produzida uma enzima, a BTK (Brutons tyrosine kinase), que a partir deste ponto se
torna importante para mediar sinais do pr-BCR no sentido de regular a sobrevivncia,
proliferao e maturao dos linfcitos pr-B, seja nesta fase ou em fases seguintes
do desenvolvimento.
Alm disso, o pr-BCR tem um papel na continuidade do rearranjo das cadeias que
faro parte do receptor maduro. Isto faz-se de duas formas:
a presena de uma protena produzida pelo rearranjo num dos
cromossomas inibe o rearranjo dos genes que codificam a cadeia pesada
do Ig no outro cromossoma, permitindo que cada linfcito produza apenas
um receptor BCR, mantendo a especificidade deste. Este fenmeno
denomina-se excluso allica. Isto permite, ainda, que o rearranjo seja
terminado caso o primeiro tenha sido mal sucedido, induzindo o rearranjo
no cromossoma restante, ou que a clula sofra apoptose caso ambos os
cromossomas tenham efectuado rearranjos ineficazes.
o Ig vai ainda induzir o rearranjo da cadeia leve do BCR, e inactivar a
expresso das cadeias anlogas que as substituam e que foram
inicialmente produzidas pelo linfcito pr-B (as cadeias de aluguer).
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Em ambos os casos, estamos perante uma molcula IgM completa. A partir deste
ponto, o linfcito denomina-se linfcito B imaturo.
A molcula de IgM, em associao com as protenas Ig e Ig, vai servir como ponto
de ancoragem do antignio, conferindo a especificidade a este. Se o linfcito, nesta
fase, no for reactivo a antignios self, so emitidos sinais pelo BCR que permitem a
sua sobrevivncia e cessam a expresso das protenas Rag, impedido o posterior
rearranjo de quaisquer genes de Ig.
Nesta fase, no h proliferao ou diferenciao perante o contacto com antignios,
dado que uma reaco intensa com antignios na medula ssea significaria
demasiada reactividade com antignios self, e portanto iria induzir edio do receptor
(veremos melhor mais frente) ou morte celular. Pelo contrrio, se os linfcitos nesta
fase forem pouco reactivos com antignios self, migram para o bao onde vo
completar a sua maturao.
LINFCITO B MADURO
Quando falamos de linfcitos B maduros, consideramos diferentes subpopulaes,
com diferenas na sua origem, diferenciao e mesmo nos locais anatmicos de
maturao. Assim, distinguimos:
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LINFCITOS B FOLICULARES
A maioria dos precursores de linfcitos B do origem a linfcitos maduros deste tipo
os quais expressam no s uma cadeia pesada como outra cadeia pesada ,
sendo esta a sua particularidade. Expressam igualmente duas cadeias leves, sejam
ou , e cada uma delas se associa a uma das duas cadeias pesadas.
O resultado a expresso no s de IgM (contendo a cadeia pesada ), como
tambm de um IgD (que contm a cadeia pesada ). Esta transcrio de dois
receptores diferentes provm do splicing alternativo de um mesmo exo VDJ (como
mostra a figura abaixo).
SELECO DE LINFCITOS B
Alguns dos processos de seleco de linfcitos B tm vindo a ser discutidos at aqui.
O primeiro de todos trata-se, precisamente, da seleco positiva dos linfcitos cujo
rearranjo gentico foi bem-sucedido e que expressaram devidamente o receptor Ig.
Destes so emitidos sinais tnicos BCR no sentido de manter mecanismos de
sobrevivncia da clula e de parar a expresso de protenas RAG, cessando
definitivamente o rearranjo gentico.
Os linfcitos B imaturos que reconhecem antignios self, por outro lado, podem tornarse perigosos (dado o risco de desenvolvimento de doenas auto-imunes). Estes
linfcitos, no entanto, no sofrem imediatamente morte celular: antes disso, so
induzidos a alterar a sua especificidade, por um processo designado edio do
receptor.
Neste processo, o reconhecimento do antignio leva reactivao dos genes RAG e a
novos rearranjos VJ e expresso de uma nova cadeia leve Ig (normalmente,
corresponde cadeia leve ). Isto permite clula expressar um novo receptor, no
sensvel ao antignio self que desencadeou esta alterao.
Por outro lado, se a edio do receptor falhar, induzida a apoptose da clula. Este
processo tambm designado por seleco negativa. Esta induo feita pelos
prprios antignios self, que so abundantes na medula ssea.
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DESENVOLVIMENTO DE LINFCITOS T
De seguida, vamos aprofundar o processo de desenvolvimento e maturao de
linfcitos T, especificamente.
Como j foi referido, o timo o rgo onde se d a maior parte do desenvolvimento
dos precursores de linfcitos T. No timo, estes precursores passam a designar-se
como timcitos. Como sabemos, o timo vai involuindo com a idade: isto traduz-se
num decrscimo de maturao de linfcitos na idade adulta. No entanto, possvel
aos indivduos adultos imunocomprometidos recuperar a funo imunitria atravs do
transplante de medula ssea, o que nos leva a crer que ainda ocorre alguma
maturao linfocitria no timo.
O timo oferece as condies necessrias seja para o transporte entre as diferentes
zonas deste rgo, para a sua proliferao, ou para o prprio desenvolvimento dos
linfcitos T. Este possui clulas dendrticas, macrfagos e clulas epiteliais que
formam redes de prolongamentos citoplasmticos, pelas quais os linfcitos T imaturos
passam e recebem estmulos essenciais maturao. Entre eles, destacamos a
produo de MHCs (Major Histocompatibility Complex), que sabemos serem
essenciais na apresentao de antignios ao receptor TCR. Neste caso, so
importantes no pela apresentao de antignios por si s, mas pelo facto de essa
apresentao precoce no timo ser necessria aos processos de seleco (como
veremos mais adiante). Alm destas, as clulas estromais do timo produzem citocinas
e quimiocinas, responsveis respectivamente pela proliferao de linfcitos e pela
transio do crtex para a medula que estes devem realizar no sentido de completar o
desenvolvimento.
Dentro das citocinas mais importantes, tem-se a IL-7 (que j foi referida
anteriormente). Dentro das quimiocinas, considera-se importante o papel da CCL25,
que se liga ao receptor CCR9 que os progenitores linfocitrios apresentam, permitindo
a migrao destes para o timo. J as CCL19 e CCL21, reconhecidas pelo receptor
CCR7, so importantes na transio do crtex para a medula tmica.
O desenvolvimento dos linfcitos T considera-se dividido em vrias fases, conforme a
expresso dos diferentes componentes que os caracterizam: ou seja, a expresso do
TCR e, se for aplicvel, de CD4 ou CD8. De acordo com este critrio, destacamos
cinco etapas:
46
47
LINFCITO T DUPLO-POSITIVO
Esta fase caracteriza-se pela expresso, simultnea, de CD4 e CD8, pelo que se
afirma que estes linfcitos so duplo-positivos (CD4+/CD8+). De seguida, ocorre
ainda o rearranjo do locus codificante da cadeia do TCR, resultando num linfcito T
que expressa CD4, CD8, CD3, cadeias , Lck e um receptor TCR , ou seja, um
receptor TCR completo. Para o rearranjo e expresso da cadeia do TCR, so
expressas novamente protenas RAG.
Ao contrrio do que acontece na expresso da cadeia , no h excluso allica no
caso das cadeias . Logo, um mesmo receptor TCR pode expressar duas cadeias ,
acontecendo em 30% dos linfcitos T maduros.
Tal como seria de esperar, a no-transcrio bem-sucedida de pelo menos uma
cadeia leva apoptose da clula.
Note-se ainda que o rearranjo e expresso do TCR leva deleo do locus que
codifica o TCR impedindo, portanto, que aquele linfcito se desenvolva num
linfcito T (um dos diferentes linfcitos T maduros, como veremos mais frente).
Assim, um linfcito que expresse a cadeia , ou por outras palavras, um complexo
TCR , est comprometido linhagem de linfcitos T CD4+ ou CD8+. E, tal como
ocorre com os linfcitos B, a expresso de protenas RAG termina a este ponto no
havendo hiptese de outro rearranjo gentico.
48
LINFCITO T IMATURO
Nesta fase, que ocorre na transio do crtex para a medula tmica, cessada a
produo de um dos dois co-receptores que tm vindo a ser expressos pelo linfcito
na fase anterior: ou expresso apenas CD4, ou apenas o CD8 denominam-se
single-positive. Este passo fundamental no desenvolvimento futuro de linfcitos T
maduros CD4+ e CD8+. Os processos que levam expresso de um dos co-receptores
e ao cessar da expresso do outro no esto muito bem estudados; surgem, no
entanto, algumas teorias, que iremos abordar mais frente.
LINFCITO T MADURO
Os linfcitos, logo que se tornam positivos apenas para CD4 ou para CD8, completam
a sua maturao a nvel fenotpico. Estruturalmente, esto completos. Esta maturao
acompanhada de uma maturao a nvel funcional, e portanto logo que os linfcitos
T se tornam single-positive, abandonam o timo para os rgos linfticos perifricos e
tornam-se linfcitos T maduros naive. Nesta fase, resta aos linfcitos aguardar por
activao.
Dentro dos linfcitos T maduros, encontramos vrias subpopulaes. Temos vindo a
descrever o desenvolvimento de linfcitos T CD4+ ou CD8+ (os mais comuns e com
papel mais preponderante na imunidade celular), mas outros existem e apresentam
diferenas ao nvel da sua diferenciao, maturao e funo. Assim sendo,
consideram-se:
Linfcitos T CD4+
Linfcitos T CD8+
Linfcitos T
Linfcitos T NK
49
LINFCITOS T NK
Estes linfcitos no so restritos a MHC, e expressam TCRs restritos a CD1 (molcula
estruturalmente semelhante a uma molcula de MHC classe I) e um marcador de
superfcie encontrado nas clulas NK (da o nome destes linfcitos T. Ateno: no
confundir os 2 tipos de clulas! As clulas NK pertencem imunidade inata). Assim
sendo, estas clulas reconhecem antignios lipdicos apresentados por molculas
CD1. Estes antignios lipdicos podem derivar de micrbios endocitados ou podem ser
antignios self.
No crtex do timo, linfcitos T duplo-positivos cujos TCR reconhecam molculas CD1
so induzidos a diferenciarem-se neste subtipo de linfcito T. Estas clulas so
capazes de secretar citocinas, participar na defesa contra microrganismos e regular
outras respostas imunes.
50
51
52
ACTIVAO DE LINFCITOS T
VISO GERAL
A activao inicial dos linfcitos T ocorre nos gnglios linfticos (rgos linfides
secundrios), onde os linfcitos T nave circulam e encontram clulas dendrticas
maduras.
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54
Activao
Proliferao e
Diferenciao
Contraco
Memria
Aos linfcitos T CD4+ sero, ento, apresentados pptidos que podem ser
provenientes, por exemplo de bactrias fagocitadas (b). Para os linfcitos T CD8+, os
antignios apresentados pelas APCs derivam de protenas presentes no interior das
clulas (a) que l se encontram porque estas foram infectadas por um vrus ou porque
fagocitaram uma clula infectada ou tumoral, processando-a e seleccionando o
antignio, apresentando-o no MHC I (fenmeno a que se chama cross presentation
ou apresentao cruzada (c)).
CO-ESTIMULAO sinal 2
Vimos ento que o sinal de activao primrio dos linfcitos T CD8+ a ligao do
complexo TCR/CD3 com as molculas de MHC I com o antignio sinal 1 que
confere especificidade resposta do linfcito T.
No entanto, d-se ainda co-estimulao atravs de sinais acessrios sinal 2 , entre
os quais se destacam os sinais transmitidos pelos co-receptores (por exemplo, CD28,
CD27, CD40L) que se ligam a co-estimuladores presentes na membrana das clulas
apresentadoras de antignios (por exemplo, glicoprotenas da famlia B7).
56
CITOCINAS sinal 3
As citocinas tm um papel crtico na activao dos linfcitos T. Provm de clulas
dendrticas ou outras clulas apresentadoras de antignios, mas tambm podem ser
originrias de clulas T Helper sua principal fonte.
, portanto, essencial a influncia das clulas CD4+ diferenciadas (T Helpers) na
activao dos linfcitos citotxicos. Estas clulas iro 1) secretar citocinas promotoras
da transcrio (como a IL-2) e, 2) expressar CD40L, que reconhecido pelo CD40 das
clulas apresentadoras de antignios, induzindo nestas clulas alteraes que as
tornaro mais eficazes na activao dos linfcitos T CD8; induzem, nomeadamente,
uma maior expresso de protenas da famlia B7 e uma maior secreo de citocinas
promotoras de diferenciao. Licensing via CD40
57
INTRODUO
Dois grandes tipos de antignios podem provocar uma resposta imunolgica
antignios multivalentes (com vrios eptopos semelhantes) de origem microbiana
que actuam directamente no receptor dos linfcitos B (BCR) e antignios proteicos
apresentados por linfcitos T-helper. Neste ltimo caso, os anticorpos produzidos
ligam-se com maior afinidade ao antignio em causa, do que sem a ajuda de
linfcitos T, da que os anticorpos contra protenas antignicas sejam os melhores
mediadores da imunidade humoral.
Neste captulo so descritos os estmulos que induzem a proliferao e diferenciao
de linfcitos B e como esses estmulos influenciam o tipo de anticorpo produzido.
IMUNIDADE HUMORAL
Como j sabido, linfcitos B maduros so desenvolvidos na medula ssea, da qual
partem para colonizar tecido linfide, maioritariamente o bao, onde lhes so
apresentados antignios, atravs das IgM e IgD de membrana. Isto culmina no
desenvolvimento de linfcitos B de memria e plasmcitos, estes ltimos os
produtores de anticorpos.
Depois do reconhecimento antignico, existem mecanismos que orientam para a maior
eficcia: produo de anticorpos que no IgM nem IgD (troca da cadeia pesada e,
portanto, troca do isotipo) e maturao da afinidade, em que os linfcitos produzem
gradualmente anticorpos com mais afinidade.
59
Respostas T-independentes
As respostas humorais a antignios no-proteicos, como polissacardeos, alguns
lpidos e cidos nucleicos, ou seja polmeros compostos de numerosas unidades
qumicas repetitivas (so geralmente multivalentes), no requerem linfcitos T-helper
e por isso no induzem memria imunolgica.
Linfcitos B da zona marginal do bao e outros tecidos linfides reconhecem
antignios multivalentes e esto, portanto, associados a respostas T-independentes
(=TI).
60
61
RECONHECIMENTO DE
ANTIGNIOS E ACTIVAO DOS
LINFCITOS B
INTRODUO
Para iniciar respostas que envolvem anticorpos, existe:
captura e transporte de antignios para reas dos rgos linfides
activao de linfcitos B, em conjunto com outros sinais gerados pela
imunidade inata.
Resposta funcional dos linfcitos B.
Nos rgos linfides perifricos, os antignios, que chegam pelo sangue ou linfa, so
quase sempre capturados pelas clulas dendrticas e ligam-se aos receptores
antignicos dos linfcitos B. As clulas dendrticas podem internalizar e processar o
antignio mas podem, tambm, aproveitar o antignio para a superfcie da clula,
onde ele fica disponvel para os linfcitos B especficos para o antignio.
63
RECONHECIMENTO
64
66
67
1.TROCA DE ISOTIPO
Como reposta interaco CD40 e s citocinas, alguma da progenia dos linfcitos B,
que produzem IgM e IgD, atravessam pelo processo de troca de isotipo, levando
produo de cadeias pesadas de diferentes classes, como , e . Esta capacidade
dos linfcitos B poderem produzir anticorpos com isotipos diferentes confere uma
plasticidade marcvel em respostas humorais imunes, pelo que os anticorpos tm
diferentes funes efectoras e agentes-alvo.
Deste modo, a resposta a diferentes tipos de microrganismos regulada pelos tipos
de citocinas produzidas pelos linfcitos T, que so activados por aqueles, como fica
resumido na ilustrao em baixo.
68
69
2. MATURAO DA AFINIDADE
71
Diferenciao
em Plasmcitos
Diferenciao
em Clulas B de
Memria
Diminuio de IRF4
Expresso Pax-5
Represso Bcl-6
Expresso IRF4
Expresso Blimp-1
Expresso XBP-1
TIPO DE LINFCITOS
T-INDEPENDENTES
QUE
RESPONDEM
ANTIGNIOS
73
74
IMUNIDADE HUMORAL
CARACTERSTICAS IMPORTANTES DA DEFESA HUMORAL
75
Isotipo
IgG
IgM
IgA
IgE
IgD
hipersensibilidade
76
77
RECEPTORES Fc LEUCOCITRIOS
Os leuccitos expressam receptores Fc que se ligam regio constante dos
anticorpos. Eles entregam sinais que estimulam as actividades microbicidas dos
leuccitos e induzem a inflamao.
Os receptores Fc para a cadeia pesada de cada Ig so expressos em vrias
populaes leucocitrias. Existem vrios tipos de receptores Fc (FcRn - neonatal
expresso na placenta, endotlio, epitlio intestinal; poly-Ig; Fc da IgE), mas o mais
importante neste tema a fagocitose de partculas opsonizadas so os receptores
para a cadeia pesada das IgG: receptores Fc (FcR).
A maioria dos receptores Fc resultam numa activao celular quando activados
(excepto o FcRII, que um receptor inibitrio). Os vrios receptores Fc so:
78
A fagocitose de partculas revestidas por IgG mediada pela ligao das pores Fc
das opsoninas (IgG) aos receptores Fc dos fagcitos. H ento internalizao da
partcula nos fagcitos e a sua activao. As vesculas de endocitose fundem com os
lisossomas, originando fagolisossomas, onde as partculas so destrudas.
Se no houver fagocitose (agente demasiado grande), sero secretadas enzimas
hidrolticas ou intermedirios das espcies reactivas de oxignio para o exterior, o que
pode lesar os tecidos (importante nas doenas de hipersensibilidade).Se no houver
fagocitose (agente demasiado grande), sero secretadas enzimas hidrolticas ou
intermedirios das espcies reactivas de oxignio para o exterior, o que pode lesar os
tecidos (importante nas doenas de hipersensibilidade).
79
CITOTOXICIDADE
(ADCC)
CELULAR
DEPENDENTE
DE
ANTICORPOS
Ilustrao 6 - ADCC
Ilustrao 7 - Helminta
80
SISTEMA COMPLEMENTO
INTRODUO
um dos mecanismos principais da imunidade humoral e tambm da imunidade
inata. Consiste em protenas sricas ou de superfcie, que interagem umas com as
outras ou com outras molculas do sistema imunitrio, de forma altamente regulada e
originam produtos que eliminam micrbios.
Estas protenas esto, normalmente, inactivas; so activadas apenas sob condies
particulares. Para perceber bem as vrias vias de activao necessria a
observao das imagens das seces seguintes.
81
Formao Convertase C3
(3 vias diferentes)
Formao Convertase
C5
VIA ALTERNATIVA
( Ilustrao 8 )
82
Ilustrao 8 - Via de activao do complemento: Alternativa
VIA CLSSICA
(Ilustrao 9)
83
VIA DA LECTINA
(Ilustrao 11)
84
Funo: uma integrina que funciona como receptor para o fragmento iC3b
(que vem da protelise do C3b).
Expresso em neutrfilos, fagcitos mononucleares, mastcitos e clulas NK
Promove a fagocitose de micrbios opsonizados com iC3b. Pode reconhecer
directamente bactrias para a fagocitose.
RECEPTOR DE
CD11c/CD18)
COMPLEMENTO
TIPO
(CR4
OU
p150,95
OU
86
87
A formao do MAC
inibida por uma protena de
membrana: CD59 (Ilustrao
16). Esta incorpora-se nos
MACs que esto a ser
acoplados, mesmo antes da
ligao da ltima pea: C9,
por isso no consegue terminar
o processo de formao do
MAC. O CD59 est presente
nas clulas do hospedeiro, mas
no nos microorganismos.
Se ordenarmos por ordem de
importncia,
as
protenas
inibidoras do complemento,
teremos
algo
como:
CD59>DAF>MCP (o que pode
estar de acordo com a sua
abundncia
na
superfcie
celular).
88
FUNES DO COMPLEMENTO
OPSONIZAO E FAGOCITOSE (Ilustrao 17)
Micrbios sobre os quais o complemento foi activado via clssica ou via alternativa vo
estar revestidos de C3b, iC3b ou C4b e vo ser fagocitados pela ligao destes a
receptores de superfcie especficos dos macrfagos e neutrfilos. O C3b e o C4b
ligam-se ao CR1 e o iC3b liga-se ao CR3 (Mac-1) e ao CR4.
A fagocitose mediada pelo complemento (que pertence ao sistema imunitrio inato
e ao humoral) importante no caso de bactrias com cpsulas ricas em
polissacridos, como o pneumococos ou o meningococos. Aps opsonizao, estas
bactrias so fagocitadas no bao (em caso de esplenectomia, aumenta a
probabilidade de septicmia pneumo/meningoccica).
89
OUTRAS FUNES
90
BLOQUEIO DA
MICROBIANOS
INFLAMAO
PELOS
PRODUTOS
DOS
GENES
91
IMUNIDADE NEONATAL
Os fetos mamferos esto protegidos das infeces por anticorpos produzidos pela
me, que atravessam a placenta (IgG) e entram em circulao fetal, e por anticorpos
ingeridos com o leite materno (IgA e IgG), que atravessam o epitlio intestinal dos
recm-nascidos, num processo chamado Transcitose. Como os recm-nascidos no
tm a capacidade de responder eficazmente contra os micrbios, utilizam a
imunidade passiva como defesa, que se baseia na neutralizao dos organismos
patognicos.
Para as IgA serem transportados para o leite, necessitam do receptor polimrico Ig,
que secretado juntamente com 2 IgA. Para as IgG serem transportadas pela
placenta e pelo intestino do recm-nascido, precisam do receptor Fc especfico para
as IgG: FcRn (neonatal Fc receptor. Este assemelha-se ao MHC I estruturalmente.
Nos adultos tem como funo proteger as IgG do catabolismo. Exemplo clnico da aula
terica: Me com Doena de Graves, onde h anticorpos anti-TSHR; estes so
transferidos pela placenta, e o beb quando nasce tem a mesma doena. Como a
causa no intrnseca, a doena curada atravs da realizao de plasmafrese no
beb).
92
IMUNIDADE CELULAR
Ao contrrio da imunidade humoral, a imunidade celular actua nos agentes invasores
intracelulares, contra os quais os anticorpos no conseguem actuar. Esta imunidade
celular pode ser transferida para outro indivduo no imunizado, atravs da
transferncia de clulas T, e no pela transfuso de anticorpos.
Defeitos neste tipo de imunidade resultam num aumento da susceptibilidade a
infeces por vrus e por bactrias intracelulares, tal como por algumas bactrias e
fungos extracelulares que so fagocitados. As respostas mediadas por clulas T so
tambm importantes na rejeio de enxertos, imunidade anti-tumoral, e doenas
inflamatrias auto-imunes (immune-mediated inflammatory diseases).
no especficas que migraram para aquele local podem morrer no tecido, ou regressar
circulao.
96
Outras citocinas produzidas por clulas TH1 so: TNF, e IL-10 (que
inibidora de clulas dendrticas e macrfagos, e por isso suprime a activao
de clulas TH1, exemplo de um loop de feedback negativo).
ACTIVAO DE MACRFAGOS MEDIADA POR CLULAS TH1 E ELIMINAO DE
MICROORGANISMOS FAGOCITADOS
Em qualquer local de infeco, como parte da resposta imunitria inata, so
recrutados moncitos, desde a corrente sangunea at aos tecidos, por quimiocinas
produzidas por macrfagos e outras clulas residentes. Estes moncitos transformamse em macrfagos, fazem a sua primeira fagocitose, e se o microrganismo tiver
evoludo para resistir eliminao por macrfagos, ele sobrevive no interior dos
fagossomas. Nestas clulas infectadas os pptidos microbianos so processados, e
apresentados como pptidos associados a molculas MHC classe II. Ao mesmo
tempo, clulas TH1 efectoras so geradas numa resposta imunitria adaptativa nos
tecidos linfides secundrios, e so recrutadas ao local de infeco onde reconhecem
pptidos antignicos (os mesmos que iniciaram a resposta imunitria) apresentados
pelos macrfagos que contm o microrganismo. Os macrfagos so expostos a sinais
das clulas TH1 efectoras, que os activam para eliminarem os microrganismos
ingeridos.
98
Esta activao consiste numa expresso aumentada de vrias protenas que conferem
aos macrfagos activados a capacidade de desempenhar funes especializadas,
como por exemplo aces microbicidas mais eficientes.
A activao de macrfagos feita no s por aco do IFN-, mas tambm por sinais
mediados por contacto, baseados em interaces CD40L-CD40. Quando as
clulas TH1 so estimuladas por um antignio, estas expressam CD40L na sua
superfcie e produzem IFN-.
As aces de IFN- nos macrfagos so sinrgicas com as aces do ligando CD40, e
em conjunto so estmulos potentes para a activao de macrfagos. A necessidade
de interaces de contacto entre a molcula de superfcie CD40, presente nos
macrfagos, e o seu ligando, presente nas clulas T, assegura que os macrfagos que
apresentam antignios s clulas T so os mais eficientemente activados por estas
clulas. Os mesmos princpios se aplicam activao de linfcitos B pelas clulas T,
pois as clulas T helper estimulam a proliferao e diferenciao dos linfcitos B, por
sinais mediados por CD40 e citocinas.
Os macrfagos activados eliminam os microrganismos fagocitados principalmente pela
aco de espcies reactivas de oxignio, azoto, e enzimas lisossomais, potentes
agentes microbicidas produzidos dentro de lisossomas de macrfagos, que digerem os
microrganismos aps a fuso do fagossoma com o lisossoma. Estas substncias
txicas podem tambm ser libertadas em tecidos adjacentes, onde podem eliminar
microrganismos extracelulares, e causar dano a tecido saudvel devido sua falta de
especificidade.
Esta via de activao de macrfagos intitulada de via clssica para ser distinguvel
da via de activao alternativa, descrita mais frente.
Os macrfagos activados esto envolvidos em vrias outras reaces de defesa do
hospedeiro. Eles estimulam a inflamao atravs da secreo de citocinas,
principalmente TNF e IL-1, e mediadores lipdicos como as prostaglandinas, os
leucotrienos e factor de activao plaquetria (PAF). Esta aco colectiva leva ao
recrutamento de mais leuccitos, o que melhora a capacidade de destruir agentes
infecciosos. Os macrfagos activados ampliam a resposta imunitria mediada por
clulas ao tornarem-se APCs mais eficientes devido aos maiores nveis de molculas
envolvidas no processamento de antignios e maior expresso de molculas MHC
classe II na sua superfcie, mas tambm pela produo de citocinas (como a IL-2) que
estimulam a diferenciao de linfcitos T em clulas T efectoras.
99
100
Estimular o crescimento e diferenciao de eosinfilos, e activlos Os eosinfilos expressam receptores Fc especficos para IgE e
alguns IgG e por isso so capazes de se ligar a microrganismos, como
os parasitas, que so opsonizados por estes anticorpos, e elimin-los.
102
CLULAS T ( T CELLS)
Estas clulas apresentam como receptores de antignio de clulas T (TCR)
heterodmeros, formados pelas cadeias e , homlogas s cadeias e dos TCR
presentes nas clulas CD8+ e CD4+. Estes TCRs especficos so o que distingue esta
linhagem celular. O heterodmero associa-se s protenas CD3 e da mesma forma
que o heterodmero , e a sinalizao induzida pelo TCR a semelhante
induzida por TCR .
Diferentes populaes de clulas T podem desenvolver-se em alturas distintas da
ontogenia, contendo diferentes regies variveis (V) e residindo em diferentes tecidos.
As clulas T encontradas em orgos linfides expressam TCRs mais diversificados
do que as clulas T epiteliais, e apesar do potencial de diversidade terico dos TCR
ser ainda maior que a diversidade dos TCR , observa-se a expresso de um
nmero restrito de regies V e , e existe pouca ou nenhuma diversidade juncional.
A variedade limitada de TCRs em muitos tecidos sugere que os ligandos para estes
receptores podem ser invariveis e conservados.
As clulas T no reconhecem antignios peptdicos associados ao MHC e no so
restritas ao reconhecimento por esse complexo. Algumas linhagens clonais de clulas
106
107
MHC E APRESENTAO DE
ANTIGNIOS AOS LINFCITOS T
Linfcito T
108
PROPRIEDADES
LINFCITOS T
DOS
ANTIGNIOS
RECONHECIDOS
PELOS
Pptidos de
sequncia curta.
Razo: s os
pptidos se ligam
ao MHC
Antignios de
sequncia linear
Razo: perde-se a
conformao na
gerao de MHC antignio
Antignios
associados ao
MHC
CD4+ liga-se a
antignio-MHC classe
II. Origem extracelular.
CD8+ liga-se a
antignio-MHC classe
I. Origem citoslica.
109
Porta de Entrada
membranares.
Diferenciam-se a partir de precursores da linhagem fagoctica mononuclear
Duas populaes predominantes:
Clulas Dendrticas
Convencionais
110
Clulas Dendrticas
Plasmocitides
NOTA: Sabe-se que as clulas T activadas expressam tambm MHC II, no entanto,
no se conhece a sua funo.
Causa Gentica
No entanto, este locus no continha um nico gene passando a denominarse Complexo Major de Histocompatibilidade. Nos ratinhos referido
como H-2.
GENES MHC
O locus MHC contm
genes polimrficos MHC
classe I e II e outros no
polimrficos.
112
HLA classe I
HLA classe II
RATINHOS
MHC classe I
I-A, I-E
MHC classe II
MHC II
MOLCULAS DE MHC
PROPRIEDADES GERAIS:
As molculas de MHC consistem numa fenda ou sulco que aloja o pptido,
domnios Ig-like transmembranares e cistoplasmticos
As MHC tm resduos polimrficos (regies variveis) que se localizam no
sulco que aloja o pptido. Resulta numa ligao preferencial a antignios com
maior afinidade.
Os domnios Ig-like tm locais de ligao para CD4 e CD8.
A ligao nocovalente.
No MHC I a associao do
pptido implica a presena
de um N-terminal positivo e
um C-terminal negativo.
Os sulcos muitas
vezes apresentam
pockets que se
ligam
preferencialmente a
determinados
aminocidos, os
resduos ncora.
A clulas T
tambm
reconhecem e
interagem com
os resduos
polimrficos do
MHC.
116
PROCESSAMENTO
APRESENTAO
DE
117
Apresentao Cruzada
Extracelulares CD8+
MHC I CD8+.
118
Antignios
Imunodominantes
119
120
4- Imunodeficincia
pode
resultar
de
defeitos
nos
linfcitos
em
desenvolvimento/activao ou de defeitos nos mecanismos efectores da
imunidade inata e adaptativa. Imunodeficincias so clinicamente e
patologicamente heterogneas, em parte porque diferentes doenas
envolvem diferentes componentes do sistema imunolgico do sistema.
DEFEITOS NA FAGOCITOSE
DOENA GRANULOMATOSA CRNICA
SNDROME DE CHDIAK-HIGASHI
123
DEFEITOS EM SINALIZAES
Defeitos na sinalizao TLR (o defeito mais conhecido de MyD88) e na
sinalizao interfero tipo I podem contribuir para infeces recorrentes piognicas,
bem como infeces virais graves.
Defeitos de IL-12 e IFN- so ligados susceptibilidade aos patognicos
intracelulares, em particular infeces por micobactrias.
SCID
Dfice de Anticorpos
Por haver falhas to abrangentes na imunidade, quem sofre desta deficincia est
susceptvel a todo o tipo de agentes
infecciosos intracelulares e extracelulares
logo assim que nasce, pois nem as IgGs
maternas so eficazes para compensar tais
falhas. Assim, comum os bebs com
SCIDs apresentarem infeces respiratrias,
oportunistas, por fungos mucutneos, e
problemas intestinais recorrentes logo aps
o nascimento.
As SCID so normalmente letais, excepto se
124
linfcitos B, T e clulas NK
Alguns pacientes podem ter nmero normal de linfcitos B e T, mas que no
proliferam correctamente na presena de um antignio.
Outro defeito, mais raro, est relacionado com um defeito na enzima PNP (fosforilase
nucleosdica de purinas), que conduz s mesmas consequncias imunitrias.
125
linfcitos B e T
diversidade de receptores
auto-reactividade
clulas NK
DFICE DE ANTICORPOS
Por outro lado, as Imunodeficincias na Imunidade Adquirida podem ser mais restritas
e afectar apenas linfcitos B. E aqui no haveria qualquer interferncia com os T.
Este tipo de defeitos, que resultam numa ineficaz produo de anticorpos, manifestase normalmente apenas a partir dos 6 meses de vida, quando as IgGs maternas j
desapareceram do organismo do beb. Nessa altura, aumenta a susceptibilidade a
126
Esta doena uma das mais comuns, e causada por uma mutao na enzima Btk
(Bruton tirosina cinase), importante na maturao dos linfcitos pr-B, levando
ausncia de -globulina no sangue. Este defeito conduz a:
linfcitos B
Ig sricas
IgM
restantes anticorpos
127
T10: Tolerncia
Data terica de 28 de Outubro de 2011
Captulos do Abbas: 14
TOLERNCIA IMUNOLGICA
Tolerncia imunolgica ou auto-tolerncia: ausncia de resposta imunitria
agressiva a um conjunto de antignios, num sistema imunitrio imunocompetente,
induzida pela exposio prvia a esse antignio.
Tolerognicos
Antignios
Imunognicos
geram imunidade
128
Deficincia de AIRE:
o APECED (autoimmune polyendocrinopathy-candidiasis-ectodermal
dystrophy)
o APS-1 (autoimmune polyendocrine syndrome-type 1): causada por
uma mutao no gene AIRE; caracterizada por uma leso
mediada por anticorpos e linfcitos em mltiplos rgos endcrinos,
incluindo as paratirides, supra-renais e ilhotas pancreticas.
Desenvolvimento de clulas T reguladoras
Algumas clulas T CD4+ auto-reactivas que detectam o antignio do prprio no
timo no so eliminadas, em vez disso podem diferenciar-se em clulas T
reguladoras.
*Deficincia da protena AIRE no parece evitar o desenvolvimento de
clulas T reguladoras.
No se sabe o que determina a escolha entre morte celular e desenvolvimento de
clulas T reguladoras.
Anergia
Deleco
Supresso das clulas T
130
132
133
As clulas T que reconhecem antignios do prprio na ausncia de coestimulao podem activar Bim, resultando em apoptose pela via
mitocondrial.
Estimulao repetida das clulas T resulta na co-expresso de receptores
de morte e os seus ligantes, e o empenho dos receptores de morte
desencadeia morte apopttica. Nas clulas T CD4+, o receptor de morte
relevante chamado Fas (CD95) e o seu ligante o ligando de Fas (FasL).
Fas um membro da famlia de receptores ao factor de necrose tumoral (TNF),
e FasL homlogo citocina TNF. Quando as clulas T so repetidamente
activadas, FasL expresso na superfcie celular e liga-se ao Fas de superfcie
na mesma clula ou em clulas T adjacentes. Isto activa as caspases que
causam apoptose das clulas.
TOLERNCIA PERIFRICA EM LINFCITOS CD8+
Muito pouco se sabe sobre os mecanismos de tolerncia de clulas T CD8+ maduras,
mas possvel que se reconhecerem os pptidos associados ao MHC-II sem coestimulao, imunidade natural ou clulas T auxiliares, estas clulas podero tornar-se
anrgicas. Clulas T CD25+ reguladoras podem inibir directamente a activao das
clulas T CD8+.
Clulas T CD8+ que so expostas a altas concentraes de antignios do prprio
tambm podem sofrer morte celular apopttica.
FACTORES QUE DETERMINAM O GRAU DE TOLERNCIA DOS ANTIGNIOS DO PRPRIO
135
136
Ignorncia
perigo/danger
Privilgio
137
*Hipersensibilidade
Captulos do Abbas: 18, 19
Captulos do Arosa: 17
HIPERSENSIBILIDADE
Hipersensibilidade uma designao abrangente para os distrbios causados pelas
respostas imunitrias. Podem dever-se, por exemplo, a um controlo inadequado, a
adopo de tecidos-alvo errados ou a antignios ambientais que habitualmente seriam
inofensivos.
Na generalidade, so causadas por:
auto-imunidade;
reaces contra micrbios (se a reaco imunitria for excessiva ou o
micrbio persistir, por exemplo), englobando processos de inflamao severa,
deposio de complexos imunes, ligao cruzada de anticorpos destinados a
um antignio non-self, reaco contra microorganismos comensais;
reaces contra antignios ambientais, com produo exagerada de IgE.
Em todas as reaces hipersensveis, os mecanismos responsveis pela leso
tecidual sero aqueles que normalmente funcionariam na eliminao de patognios
infecciosos: imunidade inata, linfcitos T, vrias outras clulas efectoras, mediadores
da inflamao O problema surge quando estes mecanismos so activados ou
mantidos de forma inapropriada.
Este tipo de distrbios torna-se ainda mais complicado se pensarmos que o estmulo
destas respostas imunitrias anormais bastante difcil de ser eliminado (antignios
self, micrbios comensais, antignios ambientais). Ento, como o sistema imunitrio
inclui diversos mecanismos de amplificao (feedback positivo), quando uma resposta
imunitria iniciada, difcil control-la ou faz-la terminar. Por essa razo, este tipo
de doenas tende a ser crnica e progressiva, representando grandes desafios na
prtica clnica.
138
HIPERSENSIBILIDADE TIPO I
Hipersensibilidade imediata. Diz respeito produo de IgE especficos para
antignios ambientais e mastcitos. Tipo de hipersensibilidade mais prevalente. As
alergias so as doenas prottipo deste grupo.
HIPERSENSIBILIDADE TIPO II
Causada por IgM e IgG: ao activarem o sistema complemento, recrutarem clulas
inflamatrias e interferirem com funes celulares normais promovem a leso tecidual.
Estes anticorpos podem ser especficos para antignios em determinado tipo de
clulas ou na matriz extracelular e podem ser encontrados ligados a esses antignios
ou em circulao.
HIPERSENSIBILIDADE TIPO IV
Causada por linfcitos T, que induzem a inflamao atravs da secreo de citocinas
(que, por sua vez, recrutam outros leuccitos, sobretudo neutrfilos e macrfagos) ou
que matam directamente clulas-alvo. Clulas T helper tambm estimulam a produo
de anticorpos que lesionam os tecidos e induzem inflamao. Em algumas doenas,
h envolvimento de CTLs.
Este tipo de classificao, embora seja til para distinguir o tipo de resposta imunitria,
no , na realidade, muito til na prtica clnica. As doenas so complexas e
frequentemente envolvem uma combinao de respostas imunitrias humorais e
celulares, assim como diversos mecanismos efectores ( fcil pensarmos que assim ,
se um nico antignio consegue estimular normalmente respostas humorais e
celulares, produzindo-se vrios tipos de anticorpos e clulas T efectoras). Alm dos
diversos mecanismos envolvidos, a inflamao est muitas vezes associada, pelo
que, frequentemente, estas doenas so apenas agrupadas sobre a designao de
doenas imunitrias inflamatrias (immune-mediated inflammatory diseases).
Considerar este conjunto de doenas num s grupo tem algum valor clnico, j que
muitas delas so tratadas com os mesmos ou semelhantes agentes biolgicos.
As explicaes seguintes so baseadas numa diviso mais abrangente:
Doenas causadas por anticorpos (tipo II, III)
Doenas causadas por anticorpos contra antignios celulares ou teciduais fixos
Doenas causadas por complexos imunes
139
1. OPSONIZAO CELULAR
DOENAS CARACTERSTICAS:
Prpura trombocitopnica
auto-imune
Antigniosalvo
Mecanismos efectores
Protenas da
membrana
eritrocitria
Opsonizao e
fagocitose dos
eritrcitos; lise mediada
pelo complemento
Protenas na
membrana
planetria
Opsonizao e
fagocitose de plaquetas
Manifestaes
clnicopatolgicas
Hemlise
Anemia
Hemorragia
140
DOENA CARACTERSTICA
Glomerulonefrite mediada por anticorpos (activao leucocitria +
inflamao)
Receptor de
TSH
Miastenia gravis
Receptores
colinrgicos
Mecanismos efectores
Estimulao dos
receptores pelos
anticorpos
Anticorpos impedem
ligao de acetilcolina;
down-regulation dos
receptores
Manifestaes
clnicopatolgicas
Hipertiroidismo
Fraqueza muscular
Paralisia
141
Estas doenas afectam geralmente vrios tecidos e rgos, embora alguns possam
ser particularmente vulnerveis, como os rins e as articulaes.
As caractersticas patolgicas das doenas vo reflectir o local de deposio dos
complexos e so independentes do facto de o antignio ser self ou non-self. Ento,
como os complexos tm tendncia para se depositar em artrias pequenas, nos
glomrulos renais ou na sinovial das articulaes, as manifestaes clnico-patolgicas
so frequentemente vasculite, nefrite e artrite.
O prottipo de doena sistmica causada pela deposio de complexos imunes a
doena do soro.
A maioria dos conhecimentos acerca deste tipo de doenas provm de modelos
experimentais de doena do soro, em que animais so imunizados com uma grande
quantidade de antignio estranho. Mas, nestes casos, o quadro clnico vai ser
caracterstico de uma doena do soro aguda os sintomas tm curta durao e as
leses so reparadas a no ser que o antignio seja injectado novamente.
A quantidade de complexos que se deposita nos tecidos depende da natureza dos
complexos e das caractersticas dos vasos sanguneos.
142
Filtrao capilar
Os capilares dos glomrulos renais e das membranas sinoviais so capilares onde o
plasma ultrafiltrado (para a formao de urina e lquido sinovial, respectivamente),
passando pela parede capilar com uma presso hidrosttica muito elevada. Estes so
locais onde a deposio se verifica frequentemente, embora esta possa ocorrer em
virtualmente todo o lado.
Os complexos imunes tambm se podem ligar aos receptores de Fc nos mastcitos e
nos leuccitos e activar a secreo de citocinas e mediadores vasoactivos. Por sua
vez, estes mediadores podem provocar ainda maior deposio ao aumentar a
permeabilidade vascular e o fluxo sanguneo.
complexos
imunes ligam-se
a receptores de
Fc os mastcitos
e leucitos
deposio de
complexos
imnunes
activao da
secreo de
citocinas e
mediadores
vasoactivos
aumento da
permeabilidade
vascular e fluxo
sanguneo
Inflamao
DOENAS CAUSADAS
CITOCINAS
POR
INFLAMAO
MEDIADAS
POR
Na inflamao mediada pelo sistema imunitrio, clulas TH1 e TH17 secretam citocinas
que recrutam e activam leuccitos.
A IL-17, produzida por clulas TH17, promove o recrutamento de neutrfilos.
O interfero- (IFN- ), produzido por clulas TH1 activa os macrfagos.
143
As clulas do endotlio vascular nas zonas lesadas podem depois expressar nveis
aumentados de protenas de superfcie cuja regulao depende de citocinas, por
exemplo, molculas de adeso e molculas MHC II, que agrava o processo de
recrutamento.
A inflamao associada a doenas mediadas por clulas T geralmente crnica, mas
podem verificar-se episdios de inflamao aguda j num contexto de uma inflamao
crnica de fundo. Reaces inflamatrias crnicas geralmente produzem fibrose como
resultado da secreo de citocinas e factores de crescimento pelos macrfagos.
Pensa-se que este seja o principal mecanismo por detrs da artrite reumatide,
esclerose mltipla, diabetes tipo I e psorase.
144
DELAYED-TYPE HYPERSENSITIVITY
A reaco prottipo das reaces inflamatrias mediadas por clulas T a delayedtype hypersensitivity (DTH). As citocinas responsveis pela inflamao resultam da
activao de clula T sobretudo CD4+.
O modelo clssico de uma reaco deste tipo, num modelo animal, envolve vrias
etapas:
Sensitizao o animal imunizado com antignio proteico.
Em humanos esta etapa pode ocorrer atravs de infeco microbial,
sensitizao por contacto com qumicos ou antignios ambientais,
ou injeces intra-drmicas ou subcutneas com antignios
proteicos.
Elicitao Cerca de duas semanas depois, o animal exposto ao mesmo antignio,
subcutaneamente.
Desafio exposio posterior ao antignio; despoleta a reaco.
Por exemplo, a PPD (purified protein derivative), um antignio
proteico da Mycobacterium tuberculosis, despoleta uma reaco
DTH, conhecida reaco da tuberculina, quando injectada em
indivduos que estiveram expostos bactria. Um resultado positivo
um indicador clnico muito utilizado para provar uma infeco de
tuberculose anterior ou presente.
A resposta tpica evolui durante 24 a 48 horas.
o Cerca de 4 horas depois da injeco de antignio, os neutrfilos acumulam-se em
redor das vnulas ps-capilares no local de injeco.
o Cerca de 12 horas depois, o local de injeco infiltrado por clulas T e moncitos
provenientes do sangue, tambm em redor das vnulas adjacentes. As clulas
endoteliais destas vnulas tornam-se inchadas, apresentam organelos
aumentados e tornam-se mais permeveis a macromolculas do sangue. O
fibrinognio sai dos vasos sanguneos para os tecidos, onde convertido a fibrina.
A deposio da fibrina, e a acumulao de clulas T e moncitos no espao
extravascular em redor do local de injeco provocam inchao do tecido. Este
torna-se firme indurao.
o A indurao um factor de diagnstico de uma reaco DTH detectvel cerca
de 18 horas depois da injeco do antignio e mxima cerca de 24 a 48 horas
depois.
145
Na prtica clnica, este tipo de reaces so importantes, pois uma perda de respostas
DTH a antignios universais (por exemplo, antignios de Candida spp.) indicativa de
uma funo deficiente de clulas T condio conhecida como anergia ( diferente
da anergia linfocitria).
Alm disso, os CTL podem contribuir para a leso tecidual em algumas doenas autoimunes causadas sobretudo por clulas T CD4+, como a diabetes tipo I. Tambm
esto envolvidos em algumas formas de miocardite como resultado de infeco viral.
146
TERAPUTICA
As terapias utilizadas no tratamento das doenas de hipersensibilidade podem ser
divididas em alguns grupos principais.
AGENTES ANTI-INFLAMATRIOS
Foram principal recurso durante muitos anos, sobretudo corticosterides. Estes
frmacos reduzem a leso tecidual, particularmente o componente inflamatrio da
resposta imunitria.
TERAPIAS ANTI-CITOCINAS
Em casos de doenas inflamatrias crnicas mediadas por clulas T, um grande
nmero de citocinas envolvidas na inflamao tem sido alvo do desenvolvimento de
antagonistas.
O receptor TNF e anticorpos anti-TNF so exemplos particularmente importantes;
estes ligam-se ao TNF, neutralizando-o. So muito bem sucedidos em pacientes com
artrite reumatide, doena de Crohn e psorase.
Existem inmeros ensaios na rea do desenvolvimento de antagonistas de outras
citocinas pr-inflamatrias (IL-1, IL-12, IL-23, IL-6).
IgG INTRAVENOSA
A administrao de grandes quantidades de IgG intravenosa (IVIG) benfica em
algumas doenas de hipersensibilidade. No se entende completamente como que
este agente suprime a inflamao. Uma possibilidade a de que a IgG se ligue a
receptores de Fc inibidores nos macrfagos e linfcitos B, atenuando a resposta
inflamatria.
147
148
149
150
DOENAS ALRGICAS
Existe um conjunto de doenas que so causadas por antignios ambientais nomicrobianas e que envolvem clulas TH2, IgE, mastcitos e eosinfilos.
Como? Os antignios activam as clulas TH2 CD4+, que por sua vez ajudam as clulas
B a produzir IgEs especficas para os antignios. As IgEs assim produzidas vo ligarse a mastcitos e basfilos. Quando depois se ligam ao antignio, as clulas so
rapidamente activadas e libertam vrios mediadores qumicos. De um modo geral,
estes mediadores vo ser responsveis por:
aumento da permeabilidade vascular;
vasodilatao;
contraco da musculatura lisa visceral e brnquica.
A esta reaco chamamos hipersensibilidade
imediata
(hipersensibilidade
tipo
I).
A
hipersensibilidade imediata o prottipo de
distrbio mediado por clulas TH2 (tal como a DTH
o prottipo de distrbio mediado por clulas TH1).
Aps a resposta imediata, existe uma fase
inflamatria que se desenvolve mais lentamente late-phase reaction. Esta caracteriza-se pela
acumulao de neutrfilos, eosinfilos, macrfagos
e clulas TH2 CD4+ cerca de 2 a 4 horas depois.
Esta reaco despoletada por citocinas
produzidas pelas clulas TH2 e por mastcitos,
juntamente com mediadores lipdicos secretados
por
mastcitos.
Normalmente,
o
termo
hipersensibilidade imediata usado englobando
ambas as fases. A inflamao mxima cerca de
24 horas depois.
Na clnica, estas reaces so designadas como
alergias, atopias ou doenas de hipersensibilidade.
151
PRODUO DE IgE
Os indivduos atpicos produzem elevados nveis de IgE em resposta a alergnios
ambientais, enquanto os indivduos saudveis geralmente produzem outros isotipos,
como IgM e IgG, e apenas pequenas quantidades de IgE.
A regulao da sntese de IgE vai depender da tendncia que um indivduo tem para
formar uma resposta TH2 aos alergnios, porque as citocinas derivadas destas clulas
estimulam a alterao do isotipo da cadeia pesada para IgE nas clulas B. Esta
tendncia influenciada, em cada indivduo, por vrios factores:
genes herdados;
natureza dos antignios;
histria de exposio aos antignios.
AMINAS BIOGNICAS
A principal amina interveniente nos humanos a histamina. Estas tambm chamadas
aminas vasoactivas, so armazenadas nos grnulos citoplasmticos e so
compostos de baixo peso molecular com uma amina.
153
CITOCINAS
As citocinas libertadas por mastcitos activados, basfilos e clulas TH2 esto
sobretudo associadas inflamao da late-phase reaction. A activao dos mastcitos
vai induzir a sua transcrio e sntese, embora pequenas quantidades possam j
existir na clula. TNF, IL-1, IL-4, IL-5, IL-6 so algumas das citocinas envolvidas.
ANAFILAXIA SISTMICA
Trata-se de uma reaco de hipersensibilidade imediata sistmica, caracterizada por
edema em mltiplos tecidos e uma queda da presso arterial, como resultado da
vasodilatao.
Estes efeitos normalmente resultam da presena sistmica de um antignio
introduzido por injeco, uma picada de insecto ou absoro atravs de uma
superfcie epitelial (pele ou mucosa gastro-intestinal). O alergnio activa mastcitos
em vrios tecidos, ocorrendo libertao de mediadores qumicos que atingem os vasos
sanguneos. A diminuio do tnus vascular e a sada de plasma dos vasos
sanguneos pode causar choque pela descida de presso arterial choque anafiltico,
frequentemente fatal.
Os efeitos cardiovasculares surgem juntamente com:
constrio das vias areas superiores e inferiores;
edema da laringe;
hipermotilidade intestinal;
secreo excessiva de muco no tracto respiratrio e leses urticrias na
pele;
O tratamento habitual epinefrina, revertendo os efeitos vasodilatadores e
broncoconstritores. Anti-histamnicos tambm podem ajudar.
155
ASMA
Doena inflamatria causada por repetidas reaces de hipersensibilidade imediata e
late-phase no pulmo. Surge uma trade clnico-patolgica:
obstruo area intermitente e reversvel (devido constrio
brnquica e produo aumentada de muco espesso);
inflamao brnquica crnica com eosinfilos;
hipertrofia e hiperreactividade das clulas musculares lisas
brnquicas a broncoconstritores.
Cerca de 70% dos casos de asma esto associados a hipersensibilidade imediata
mediada por IgE. Nos restantes 30%, a asma poder no estar associada a uma
atopia e pode ser despoletada por estmulos no imunitrios como frmacos, frio e
exerccio.
Na asma atpica, o alergnio activa clulas TH22 e, ligando-se a IgEs, activa
mastcitos. Os mediadores lipdicos e as citocinas produzidas pelos mastcitos e
pelas clulas T recrutam eosinfilos, basfilos e mais clulas T H2. A inflamao crnica
nesta doena pode continuar sem activao de mastcitos.
Mastcitos, basfilos e eosinfilos produzem mediadores que contraem o msculo liso
nas vias areas. Os mediadores broncoconstritores mais importante so LTC4, LTE4,
LTD4 e PAF.
A secreo de muco aumentada resulta da aco de citocinas sobretudo IL-13, nas
clulas epiteliais brnquicas.
TERAPIA
A terapia actual tem dois alvos principais:
- preveno;
- reverso da inflamao e relaxamento do msculo liso das vias areas.
Recentemente, existe uma tendncia para uma maior utilizao de agentes antiinflamatrios como primeiro recurso de tratamento, mas existem diversas classes de
frmacos para o tratamento de asma:
Corticoesterides bloqueiam a produo de citocinas pr-inflamatrias.
Activadores da adenilato ciclase (epinefrina e agentes B2-adrenrgicos
semelhantes). A teofilina enibe enzimas fosfodiesterase (que degradam cAMP) e,
assim, produz semelhante efeito. Apresenta alguns efeitos anti-inflamatrios
independentes do relaxamento muscular.
Inibidores de leucotrienos
Anticorpos anti-IgE monoclonais
Os anti-histamnicos no so particularmente teis, uma vez que a histamina tem
uma fraca participao no processo. Na verdade, como muitos anti-histamnicos so
tambm anticolinrgicos, estes podem agravar a obstruo area ao aumentar a
secreo de muco.
A HIPTESE HIGINICA
De uma maneira geral, a prevalncia de doenas alrgicas tem vindo a aumentar.
Uma das teorias que pretende explicar este facto avana que esta reduo est
relacionada com a reduo de infeces. Respostas de imunidade inata associadas
maioria das infeces promovem respostas TH1 e suprimem respostas TH2. Existem
diversos dados epidemiolgicos que parecem comprovar esta hiptese.
Contudo, no caso da asma, infeces bacterianas e virais so um factor de
predisposio ao desenvolvimento da doena ou exacerbao da doena j existente.
Estima-se que 80% dos ataques de asma nas crianas seja precedido por uma
infeco viral. Esta associao da asma com infeces parece contradizer a hiptese
anterior esperar-se-ia que as infeces estimulassem a imunidade inata e, assim,
suprimissem as respostas TH2. A compreenso actual sobre como os linfcitos T
participam na asma ainda incompleta.
Reaces da pele
Alergias a
alimentos
Renite alrgica
Manifestaes clnico-patolgicas
Teraputica
edema da mucosa
infiltrao leucocitria com abundncia de
eosinfilos
secreo de muco
tosse
espirros
dificuldade em respirar
conjuntivite alrgica com comicho nos
olhos
doentes com episdios repetidos frequentes:
protruses focais na mucosa nasal (plipos
nasais), com edema e eosinfilos
peristaltismo aumentado
secreo de fluido aumentada das clulas
de revestimento do tracto
vmito
diarreia
urticria
choque anafiltico caso extremo
Antihistamnicos
Urticria
- reaco aguda da pele em resposta a contacto directo com o alergnio
ou aps a entrada do alergnio em circulao
mediada por produtos dos mastcitos (sobretudo histamina)
- pode persistir durante umas horas, provavelmente porque o antignio
continua no plasma
Eczema crnico
- tambm dermatite atpica; poder ser causado pela late-phase
reaction a um alergnio na pele
- late-phase reaction cutnea envolve TNF, IL-4 e outras citocinas
provavelmente das clulas Th2 e mastcitos actuam nas clulas
endoteliais das vnulas para promover a inflamao
(tambm utilizada a designao de eczema para sensibilidade por
contacto crnica, que uma reaco DTH mediada por clulas TH1)
Urticria
antihistamnicos
hipersensibilidade
imediata a alimentos
ingeridos libertao
de mediadores dos
mastcitos da mucosa
e submucosa intestinal
Eczema
Corticosterides
(inibem sntese
de citocinas)
157
IMUNOTERAPIA
O objectivo reduzir a quantidade de IgE produzida pelo doente quando exposto ao
antignio.
Uma das abordagens a dessensitizao, em que pequenas quantidades de
antignio so administradas subcutnea e repetidamente. Os nveis de IgE especficos
diminuem e os nveis de IgG normalmente aumentam, provavelmente tambm
contribuindo para uma inibio na produo de IgE, ao neutralizar o antignio.
Como que a dessesintizao funciona? possvel que induza tolerncia especfica
nas clulas T ou altere o fentipo predominante das clulas T especficas para
antignio de TH2 para TH1. No existem provas suficientemente satisfatrias para
corroborar qualquer das teorias.
Os efeitos benficos da dessensitizao podem ocorrer numa questo de horas, ainda
antes das alteraes nos nveis de IgE. Desconhece-se a razo. Esta abordagem
bem sucedida na preveno de respostas anafilticas agudas a antignios proteicos,
por exemplo veneno de um insecto, ou a frmacos essenciais, como a penicilina.
Anticorpos anti-IgE monoclonais so outra abordagem para a diminuio dos nveis de
IgE.
DESENVOLVIMENTO DE VACINAS
A importncia da imunizao profiltica adquire nos nossos dias uma grande
importncia, facto que pode ser mais facilmente compreendido se observamos os
resultados de programas de vacinao a nvel mundial que conduziram completa ou
quase completa erradicao de muitas doenas infecciosas em pases desenvolvidos
estando o sucesso destas aces dependente de vrias propriedades do
microrganismo.
O princpio fundamental da vacinao bastante simples e consiste na administrao
do agente infeccioso da doena morto, atenuado (pouco agressivo) ou ento parte de
um microrganismo que no causa a doena mas que induz uma resposta imunitria
que fornece proteco contra a aco do agente na sua forma mais agressiva
(microrganismo patognico).
O que torna as vacinas eficazes?
159
Esta resposta mais eficazmente induzida nos centros germinativos atravs da ajuda
de clulas T CD4+ produtoras de protenas especficas de antignios.
Vejamos ento algumas caractersticas mais especficas da vacinao passando pelos
tipos de vacinas mais importantes bem como o que estes trazem de bom e algumas
das suas desvantagens.
a sade pblica como o caso da vacina do vrus influenza. Este vrus, que cresce em
ovos de galinha, pode ser utilizado para a criao de dois tipos de vacinas:
VACINAS DE ANTIGNIOS
PURIFICADOS (SUBUNIDADES)
As vacinas de subunidades so compostas por antignios purificados a partir de
microrganismos ou toxinas inactivadas sendo normalmente administrados com um
adjuvante.
Importa por isso saber o que so os adjuvantes e para que servem.
Os adjuvantes so substncias que precisam de ser administradas em conjunto com
antignios proteicos purificados para induzir uma resposta imunitria mxima de
clulas T dependentes, actuando por estimulao da resposta imune inata no local de
exposio ao antignio. Muitos dos adjuvantes que se encontram em fase de
experimentao so produtos microbianos como Mycobacteria morta e os LPS (que se
ligam aos TLRs). O nico que frequentemente utilizado em vacinas humanas o
alum, composto por hidrxido e fosfato de alumnio.
EFEITOS PRINCIPAIS:
Activao de clulas dendrticas para expressarem molculas de
histocompatibilidade mais importantes (parte dos antignios que as
cluas T reconhecem)
Aumentam a expresso de coestimuladores e citocinas necessrias
para a activao de clulas T
Estimulam a migrao de clulas dendrticas para os ndulos linfticos
(local onde se encontram as clulas T)
Uma das importantes utilizaes deste tipo de vacinas prende-se com a preveno de
doenas causadas por toxinas bacterianas uma vez que os toxides injectados
produzem uma forte resposta imunitria, atravs da produo de anticorpos, ainda que
estes no sejam patognicos. Duas das doenas cujas complicaes conseguiram ser
controladas com estas vacinas foram a difteria e o ttano.
161
VACINAS DE ANTIGNIOS
SINTTICOS
A meta da investigao na rea da vacinao tem sido identificar os antignios
microbianos ou estirpes mais imunognicos, a fim de os sintetizar em laboratrio para
posteriormente utilizar os antignios sintticos como vacinas.
possvel deduzir a sequncia de protenas de antignios microbianos a partir de
dados de sequncias nucleotdicas e preparar grandes quantidades de protenas
atravs da tecnologia de DNA recombinante. Algumas vacinas feitas a partir de
antignios derivados da recombinao de DNA esto neste momento em utilizao
para o vrus da hepatite, vrus herpes simplex, vrus da febre aftosa, HPV e rotavrus.
No caso da vacina mais amplamente utilizada contra o HPV, protenas virais
recombinantes provenientes de quatro estirpes (HPV 6, 11, 16 e 18) so produzidas
em leveduras e combinadas com um adjuvante. Os HVP 6 e 11 so causas comuns
de verrugas sendo os HPV 16 e 18 as estirpes mais frequentemente ligadas ao cancro
do colo do tero. Esta vacina anti-viral tambm, portanto, uma vacina que funciona
como preveno para o cancro.
VACINAS DE DNA
Um outro mtodo de vacinao foi desenvolvido com base numa observao feita
inesperadamente. Aps a inoculao de um plasmdeo contendo DNA complementar
(cDNA) que codifica um antignio proteico verificou-se que este leva a uma forte e
duradoura resposta, quer humoral quer mediada por clulas, ao antignio em questo.
provvel que APCs (clulas apresentadoras de antignios), como as clulas
dendrticas, sejam transfectadas pelo plasmdeo e o cDNA seja transcrito e traduzido
numa protena imunognica que provoca respostas especficas.
A caracterstica nica das vacinas de DNA que estas fornecem a nica abordagem,
para alm dos vrus vivos, para provocar fortes respostas de CTL devido s
protenas codificadas pelo DNA serem sintetizadas no citosol de clulas transfectadas.
Para alm disso, os plasmdeos bacterianos so ricos em nucletidos CpG no
metilados sendo reconhecidos por um TLR (TLR9) nomeadamente ao nvel das
clulas dendrticas, induzindo assim uma resposta imune inata que melhora a
imunidade adaptativa. Portanto, vacinas contendo plasmdeos de DNA podem ser
eficazes mesmo quando administradas sem um adjuvante.
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VANTAGENS:
Facilidade de manipulao do cDNA de forma a que este expresse
muitos antignios
Capacidade de armazenar DNA sem necessitar de refrigerao para
uso no terreno
Capacidade de coexpressar outras protenas que podem melhorar a
resposta imune (citocinas e coestimuladores)
Contudo, as vacinas de DNA no foram to eficazes como se esperava em ensaios
clnicos, e os factores que determinam a eficcia destas vacinas, especialmente em
humanos, no esto ainda completamente definidos.
ADJUVANTES E
IMUNOMODULADORES
O incio de uma resposta imune dependente de clulas T contra antignios proteicos
requer que os antignios sejam administrados com adjuvantes. A maioria dos
adjuvantes induz uma resposta imune inata, com aumento de expresso de
coestimuladores e produo de citocinas como a IL-12 que estimula o crescimento e
diferenciao de clulas T.
Bactrias mortas atravs de calor so potentes adjuvantes, sendo frequentemente
utilizados em experincias em animais. Contudo, a forte inflamao local que estes
adjuvantes despoletam impede a sua utilizao em humanos.
Um enorme esforo est neste momento a ser dedicado ao desenvolvimento de
adjuvantes seguros e efectivos para utilizar em humanos. Vrios so utilizados na
prtica clnica, incluindo o gel de hidrxido de alumnio (que promove a resposta de
clulas B) e formulaes lipdicas que so ingeridas por fagcitos.
Uma alternativa aos adjuvantes a administrao de substncias naturais que
estimulam a resposta imune de clulas T. Por exemplo, IL-12 incorporada em vacinas
promove uma forte imunidade mediada por clulas. Como j foi mencionado, os
plasmdeos de DNA tm actividade intrnseca como adjuvantes e possvel incorporar
coestimuladores (ex. molculas B7) ou citocinas em vacinas com plasmdeos de DNA.
Esta ideia apesar de interessante permanece numa fase experimental.
IMUNIZAO PASSIVA
A imunidade protectora pode tambm ser conferida atravs de uma imunizao
passiva, por exemplo, por transferncia de anticorpos especficos. Num contexto
clnico, a imunizao passiva frequentemente utilizada para o tratamento rpido de
doenas potencialmente fatais causadas por toxinas, como o ttano, e para proteco
contra a raiva e hepatite.
Outro caso bastante conhecido no qual se utiliza este tipo de imunizao nos
ataques levados a cabo por cobras. Os anticorpos contra o veneno de cobra podem
ser autnticos salva-vidas quando administrados aps a mordida de cobras
venenosas.
A imunidade passiva de curta durao devido ao facto de os hospedeiros no
responderem imunizao e tambm porque a proteco dura apenas enquanto os
anticorpos injectados persistem no organismo. Alm disso, a imunizao passiva no
induz memria imunitria pelo que um indivduo imunizado no se encontra protegido
contra uma exposio subsequente toxina ou microrganismo.
Tipo de Vacina
Bactrias vivas atenuadas ou
mortas
Vrus vivos em estado
atenuado
Vacinas de subunidades
(antignicas)
Exemplos
Bacillus Calmette-Gurin, clera
Poliomielite, raiva
Toxide do ttano e difteria
Vacinas conjugadas
Vacinas sintticas
Vectores virais
Vacinas de DNA
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INTRODUO
SIDA a doena provocada pelo vrus HIV, vrus descoberto nos anos 80,
caracterizada por uma acentuada imunossupresso associada a doenas
oportunistas, degenerao do sistema nervoso central e tumores malignos .
A distribuio da infeco por HIV bastante assimtrica, tendo um grande impacto
em frica, sobretudo na frica sub-sariana, mas distribuindo-se por todo o planeta. Os
nmeros continuam a ser extremamente elevados e continua a existir uma grande
necessidade de preveno.
Este vrus infecta principalmente clulas CD4+ Th, macrfagos e clulas dendrticas.
CARACTERSTICAS MOLECULARES E
BIOLGICAS DO VRUS
O HIV pertence famlia dos lentivrus dentro dos retrovrus animais, e existem dois
tipos que diferem na estrutura genmica e antignica:
HIV-1: Causador mais comum de SIDA
HIV-2: Causa uma menor progresso da doena
Os genes so:
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ESPECIFICIDADE DO HIV
Existem vrios subtipo do HIV que apresentam diferente tropismo para distintos tipos
de clulas (macrfagos ou clulas T CD4+). Este tropismo est relacionado com a
especificidade das variantes da gp120 para os diferentes receptores de quimiocinas.
Apesar de todos os tipos de HIV poderem infectar clulas T CD4+, os que infectam
primariamente
culturas
de
macrfagos
denominam-se
M-trficos
ou
Macrofagotrficos e apresentam uma gp120 que se ligam ao receptor CCR5 (ou R5)
expresso nos macrfagos. As que infectam linhagens de clulas T e no macrfagos
chamam-se (T-trficos) e as suas gp120 ligam-se ao receptor CXCR4 (ou X4)
expresso nas clulas T CD4+ . Alguns tipos de HIV infectam indiscriminadamente os
dois tipos de clulas e chamam-se duotrficos.
Apesar das variantes T-trficas serem mais virulentas foi relatado que indivduos que
no apresentam o receptor R5 (das M-trficas) so resistentes a infeco pelo HIV.
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Efeito citolgico directo da infeco por HIV: Morte das clulas T CD4+
associada produo de vrus nas clulas infectadas por vrios motivos
processo de produo do vrus e brotamento das partculas virais leva ao
aumento da permeabilidade da membrana e influxo de quantidades letais de
clcio, interferncia da produo viral na sntese celular de protenas e
formao de sinccio (as membranas das clulas infectadas que apresentam
gp120 viral fundem-se com os receptores CD4 das clulas no infectadas
criando clulas gigantes multinucleadas, ou sinccio).
Destruio de clulas T infectadas pelo sistema imunitrio: Tanto as
defesas humorais como as defesas celulares vo provocar a destruio dos
linfcitos T que apresentem protenas membranares que indiquem estar
infectadas.
Defeitos funcionais no sistema imunitrio de portadores de HIV
exacerbam a deficincia imunitria causada pela depleo de clulas T
CD4+: Estes defeitos funcionais incluem uma reduo nas respostas das
clulas T aos antignios e uma resposta humoral fraca que podem ser
resultantes dos efeitos directos da infeco pelo HIV nas clulas T CD4+, como
por exemplo a libertao de gp120 solvel por parte das clulas infectadas que
interage com clulas no infectadas, reduzindo a resposta celular a antignios.
Macrfagos, clulas dendrticas e clulas dendrticas foliculares so infectadas
com o vrus e afectadas por este, e anormalidades nestas clulas tambm
contribuem para a progresso da imunodeficincia. Apesar dos macrfagos
poderem ser infectados pelo vrus (apresentam CD4 e co-receptores CCR5)
normalmente no so facilmente mortos por estes, tornando-se um reservatrio
do HIV. As clulas dendrticas, como os macrfagos tambm se tornam
reservatrios e o seu contacto ntimo com clulas T naive contribui para a
proliferao do vrus. As clulas foliculares dendrticas so reservatrios de
vrus superfcie (uma vez que o vrus tem dificuldade em infecta-las) e por um
MODO DE TRANSMISSO:
Contacto sexual
Transmisso me-filho
Transmisso por inoculao sangunea (sangue-sangue)
RESPOSTA IMUNITRIA
Apesar da resposta imunitria ao vrus ser ineficaz na cura total torna-se necessrio
estud-la por vrias razes:
As respostas imunitrias podem ser prejudiciais ao hospedeiro por estimular,
por exemplo, a captura de vrus opsonizados (processo que facilita a
fagocitose) por clulas no infectadas atravs de endocitose mediada pelo
receptor Fc ou pela erradicao das clulas T CD4+ que expressam antignios
virais pelos CTLs CD8+.
Os anticorpos contra o HIV so marcadores de diagnstico de infeco.
O desenvolvimento de vacinas eficazes na imunizao contra HIV exige o
conhecimento do tipo de respostas imunitrias que tm maior probabilidade de
ser protectoras.
A resposta imunitria inicial caracterizada pela expanso de clulas T CD 8+
especficas para pptidos virais. Estes linfcitos T citotxicos encontram a infeco na
fase aguda mas acabam por ser ineficazes devido ao surgimento de mutantes do
vrus. As clulas CD4+ auxiliam na formao de LTC de memria.
A presena de anticorpos anti-HIV pode ser detectada 6 a 9 semanas aps a infeco
inicial. Os anticorpos mais comuns encontrados so anti-gp120 e anti gp-41 mas
tambm podem ser encontrados anticorpos para produtos da p24, transcriptase
reversa gag e pol.
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TRATAMENTO
Consiste principalmente na administrao de vrias classes de antivirais
(antiretrovirais):
Nuclesidos: Inibem a aco da transcriptase reversa, uma vez
que param a transcrio (AZT, desoxiadenosina).
Inibidores da transcriptase reversa no-nucleosdicos: So
molculas que inibem a transcrio reversa pela ligao directa
molcula e sua inactivao.
Inibidores de protease viral: Bloqueiam o processamento de
precursores proteicos em protenas da cpsula viral e ncleo.
So utilizados juntamente com 2 diferentes inibidores da
transcriptase reversa e formam um medicamento conhecido
como HAART ou ART.
Inibidores de entrada: Impede a entrada do vrus, tendo como
alvo ou as protenas CD4 ou CCR5 da clula hospedeira ou
gp41/gp120 do vrus.
Inibidores da integrase.
VACINA
Ainda no existe uma vacina para o HIV devido a vrias questes que se apresentam,
como por exemplo a elevada taxa de mutao viral. No entanto esto a ser testadas
vrias vacinas que incluem recombinantes hbridos com partes de sequncias virais de
SIV (simian imunodeficiency virus) e HIV que foram atenuadas por delees. Uma vez
que pode haver riscos envolvidos na utilizao de vrus, ainda que atenuados, outra
alternativa ser a utilizao de recombinantes no HIV que sirvam de vectores para os
antignios HIV .
O que define, ao certo, a afinidade de cada TCR e de um linfcito a um tipo de MHC
ainda est por descobrir. A verdade que, no final da seleco positiva, resta apenas
um dos co-receptores que existiam inicialmente, CD4 e CD8.