UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAU - UFPI

CENTRO DE CINCIAS DA SADE CCS

DEPARTAMENTO DE BIOQUMICA E FARMACOLOGIA
DISCIPLINA: BIOQUMICA PARA FARMCIA
PROFESSORA: MARIA DAS GRAAS CASTELO BRANCO SOARES

RELATRIO DA PRTICA DE BIOQUMICA

REAES DE CARACTERIZAO DOS GLICDIOS

COMPONENTES:
FELIPE CARDOSO 09S14272
PLNIO REIS 09S14400
MARCOS VENCIO 09S142370
AMADEUS NETO 09S14213
MATEUS A. C. DE CARVALHO 09S14388

TERESINA, MARO DE 2010

RESUMO
Nos experimentos desenvolvidos, as caractersticas dos carboidratos, foram postas em
evidncia a partir de reaes de caracterizao desses compostos. Utilizou- se reagentes para
identificao de glicdios, tais como, reagente de Molish, reao como iodo e levando em
considerao os carboidratos redutores, foi utilizado o reativo de Benedict para identific-los
A reao de Seliwanoff foi aplicada para diferenciao entre aldoses e cetoses e
finalmente realizou-se a hidrlise de dissacardeos e polissacardeos com cido sulfrico
quente. Os resultados obtidos denotam as diversas propriedades qumicas dos acares.

INTRODUO
Os carboidratos so poliidroxialdedos ou poliidroxicetonas ou substncias que
liberam estes compostos por hidrlise. Eles so as biomolculas mais abundantes na face da
Terra.
Segundo LEHNINGER (2006), os glicdios esto divididos em trs classes principais, de
acordo com o seu tamanho: monossacardios, oligossacardios e polissacardios. Os
monossacardios, ou acares simples, consistem de uma nica unidade de poliidroxialdedo
ou poliidroxicetona. O monossacardio mais abundante na natureza o acar com seis
tomos de carbono na molcula, a D-glicose, tambm chamada de dextrose.
Os oligossacardios so compostos por cadeias curtas de unidades monossacardicas,
ou resduos, unidos entre si por ligaes caractersticas, chamadas ligaes glicosdicas. Os
mais abundantes so os dissacardios, formados por duas unidades de monossacardios. A
sacarose ou acar de cana o representante tpico desta classe. Ela composta por dois
monossacardios, D-glicose e D-frutose (LEHNINGER, 2006).
Os polissacardios so polmeros que contm mais de unidades de monossacardios e
podem ter cadeias contendo centenas ou milhares de unidades monossacardicas. Alguns,
como a celulose, tm cadeias lineares, enquanto outros, como o glicognio, tm cadeias
ramificadas. Glicognio e celulose consistem de unidades repetitivas de D-glicose, mas eles
diferem entre si no tipo de ligao glicosdica e consequentimente tm propriedades e funes
biolgicas diferentes (LEHNINGER, 2006).
O presente trabalho tem por objetivo demonstrar as reaes de caracterizao de
glicdios (tais como teste de Molisch, reao de iodo, reao de Benedict, reao de
Seliwanoff, hidrlise da sacarose, e hidrlise do amido), e comparar os dados adquiridos no
experimento com os da literatura.

METODOLOGIA
Na primeira etapa da prtica realizou-se a identificao de glicdeos. No teste de Molish
foram utilizados quatro tubos de ensaio (A, B, C e D) contendo respectivamente 1 ml de gua
destilada, 1ml de soluo de glicose 1%, 1 ml de soluo de sacarose 1%, 1ml de soluo de
amido 1%. Colocou-se em cada tubo 2 gotas de reagente de Molish,agitou-se bem e
adicionou-se cuidadosamente 1 ml de cido sulfrico concentrado sem agitao. No segundo
experimento para a verificao de carboidratos foi feita a reao com iodo utilizando os
mesmos compostos e medidas da primeira etapa, mas posteriormente fez-se o uso do reagente
de Lugol, misturando duas gotas do reagente em cada tubo de ensaio e observou-se a reao, e
em seguida aqueceu-se ligeiramente em banho-maria o tubo D at mudar a colorao,
posteriormente o tubo foi resfriado em gua corrente observando o retorno da colorao
inicial.
Na segunda etapa foi empregado o reagente de Benedict para identificar acares redutores.
Preparou-se quatro tubos de ensaio nomeados A, B, C e D cada um contendo respectivamente
1 ml de gua destilada, 1 ml de soluo de glicose 1%, 1 ml de frutose 1 % e 1 ml de soluo
de amido, em cada vidraria foi adicionado 1 ml do reativo de Benedict aquecendo
posteriormente em banho-maria por 3 minutos. Neste experimento foram observados quais
acares so redutores a partir da mudana de colorao da soluo.
Na terceira etapa fez-se uso do reagente de Seliwanoff para a diferenciao entre aldoses e
cetoses. Neste procedimento foram utilizadas as mesmas vidrarias das prticas anteriores,
nomeadas A, B, C e D, cada uma contendo 3 ml deste reativo, em seguida foi adicionado
respectivamente em cada tubo de ensaio, 5 gotas de gua destilada, 5 gotas de soluo de
frutose 1%. As misturas foram colocadas em banho-maria e observadas a cada 3 minutos
durante 10 minutos.
Na quarta etapa da prtica foi realizada a hidrlise de dissacardeos e polissacardeos.
Inicialmente foi hidrolisada a sacarose. Neste experimento usou-se dois tubos de ensaio, A e

B, contendo cada um 2 ml de sacarose 1%, colocou-se respectivamente nos tubos 3 gotas de

acido sulfrico concentrado e 3 gotas de gua destilada, submetendo as vidrarias ao banhomaria por 3 minutos e em seguida adicionou-se a cada tubo 3 ml do reativo de Benedict e foi
recolocado no banho-maria, aps 3 minutos foram retirados e colhidos os resultados. Na
hidrlise de amido utilizou-se um erlenmeyer contendo 30 ml de soluo de amido a 1 % e 6
ml de acido clordrico, adicionou-se a 7 tubos de ensaio, nomeadas de A a G, 3ml da mistura
acima. No tubo A foi adicionado uma gota do reativo de Lugol, os tubos restantes foram
colocados em banho-maria. Os tubos de ensaio foram retiradas do banho-maria, a contar do B,
respectivamente em 5,10,15,20,e 25 minutos os tubos contendo os compostos, em 30 minutos
foi retirado o tubo G onde adicionou-se 3 ml do reativo de Benedict e retornou-o ao banhomaria por mais 3 minutos.Neste ltimo experimento foi identificada a presena de amido,
amilodextrina eritrodextrina, acrodextrina e glicose na hidrlise do amido

DISCUSSO
Identificao de Glicdios
A reao de Molish utilizada para pesquisa de carboidratos em geral. O mecanismo
da reao baseia-se na formao de furfural e hidroximetil-furfural pela ao de um cido
forte sobre uma pentose e hexose, respectivamente. Os compostos furfricos reagem com o
-naftol formando um produto de condensao colorido. Foi pipetado o reagente de Molish
em quatro tubos, ocorrendo a formao de um anel, de colorao violeta, na interface dos
lquidos contidos nos tubos B, C e D em ordem de intensidade crescente, respectivamente,
devido a presena de carboidratos diferentes nesses tubos. O tubo B contendo Glicose
garantiu menor colorao devido formao de uma quantidade menor de compostos que
reagem com o -naftol, a sacarose possuiu colorao mediana e o amido colorao mais
intensa devida o motivo contrrio a glicose. No tubo A no houve reao, pois continha
apenas gua destilada.
A reao de Iodo utilizada para a pesquisa do amido, que forma um complexo
colorido com o iodo; a amilose d origem a uma colorao negro-azulada, enquanto a
amilopectina d origem a uma colorao vermelho-violcea. O reagente de Lugol no qual
contm Iodo fora utilizado na reao de identificao de glicdios, especificamente o amido.
Nos tubos A, B e C que continham gua destilada, glicose e sacarose, respectivamente no se
observou formao de colorao diferente da amarela, caracterstica do Lugol (mono e
dissacardeos no produzem colorao com iodo). No tubo D que continha Amido se
constatou formao de um complexo de cor roxo, produto de uma interao entre a colorao
indicativa da presena de amilose e de amilopectina. Com o aquecimento do tubo D o lquido
contido no tudo se tornou incolor, fato ocorrido devido desnaturao reversvel do amido
tornando a interao do iodo com o polissacardio nula. Aps o resfriamento da soluo, em
gua corrente, observou-se que o amido recuperou a propriedade de interagir com o iodo
formando novamente um complexo de cor roxo.

Identificao de Glicdios Redutores

Na identificao de Glicdios que possuem grupamento glicosdico livre (hidroxila
anomrica livre) utilizado amplamente o reativo de Benedict [Cu (OH)2] que consiste,
basicamente, de uma soluo de sulfato cprico em meio alcalino (com muitos ons OH-); e
pode ser preparado atravs do carbonato de sdio, citrato de sdio e sulfato cprico. Esses
glicdios reduzem o Cu++ em meio alcalino, quente. Nos tubos B, C e D devido presena
de Glicdios redutores sendo, respectivamente glicose, frutose e amido; obtemos colorao
vermelha caracterstica da reao. No tubo A contendo gua destilada no ocorre reao, por
isso apresenta uma colorao Azul caracterstica do prprio reativo.
Diferenciao entre aldoses e cetoses
O reagente de Seliwanoff contm resorcinol diludo na presena de HCl, a quente.
Essa reao utilizada para diferenciar aldoses de cetoses, que sobre ao desidratante do
acido clordrico so transformadas em derivados de furfural, que se condensam com o
resorcinol formando com as aldoses colorao laranja mais lentamente e as cetoses mais
rapidamente. No tubo A contendo gua destilada no ocorre reao ficando transparente. No
tubo B contendo frutose, que uma cetose, ocorre formao de colorao laranja que fica
visualmente constante com o passar do aquecimento da reao. No tubo C contendo Glicose,
que uma aldose, na reao forma 5-hidroximetil-furfural e gua com colorao transparente.
No tubo D contendo sacarose, que um dissacardeo composto por glicose e frutose, se obtm
colorao laranja que fica mais intenso com o passar do aquecimento da reao.
Hidrlise de Di e Polissacardeos
Hidrlise da sacarose
A sacarose composta por uma molcula de -D-glicose e uma de -D-frutose, tendo
os tomos de carbono C1 da glicose e C2 da frutose participando na ligao glicosdica. O seu
nome

sistemtico

-D-glucopiranosil-(12)--D-fructofuranose

(abreviado

Glc(12)Fru).
A sacarose um acar no redutor, pois ambos os grupos qumicos de natureza
redutora dos monmeros que a constitui participam na ligao glicosdica. Assim, a sacarose
no pode formar polmeros. A ligao glicosdica pode ser hidrolisada, mas muito estvel:
uma soluo aquosa de sacarose se mantm estvel durante vrios anos.

No tubo A foi reagido sacarose com cido sulfrico concentrado ocorrendo a hidrolise
cida (A hidrlise cida da sacarose octometilada fornece 2,3,4,6-tetra-O-metil-D-glicose e
1,3,4,6-tetra-O-metil-D-frutose) produzindo glicose e frutose que conferiu colorao
vermelho tijolo ao composto. No tubo B foi reagida gua destilada com a sacarose,
produzindo tambm glicose e frutose, mas com colorao vermelho tijolo mais intenso devido
menor quebra da sacarose. A sacarose por no ser acar redutor no reage com o reativo de
Benedict em nenhum dos tubos.
Hidrlise do amido
O amido uma mistura de dois polissacardeos, amilose e amilopectina, polmeros de
glicose formados atravs de sntese por desidratao (a cada ligao de duas glicoses, no caso,
h a "liberao" de uma molcula de gua).
Na reao de hidrlise do amido foi inicialmente reagido o amido com o cido
clordrico, quente de onde foram extradas dextrinas (amilo, eritro e acrodextrinas), maltose
e glicose como produto final. As dextrinas so obtidas a partir do rompimento cido das
ligaes -1,4 da amilopectina. O reagente de Lugol usado posteriormente para classificar
os tipos de dextrinas extradas da reao, atravs das reaes coloridas especificas que
ocorrem na presena de iodo, como representado a seguir:
amido

+ lugol

cor azul

amilodextrina

+ lugol

cor roxa

eritrodextrina

+ lugol

cor vermelha

acrodextrina

+ lugol

incolor

A partir das reaes com Lugol com aquecimento constante 100oC com observaes em
perodos de tempos regulados foram identificados os seguintes resultados:
Com a colocao do reativo de Benedict devido a presena de maltose que redutor ocorre a
reao formando a colorao vermelho tijolo.

RESULTADOS
TABELA 1.0: REGISTRO DOS SINAIS OBSERVADOS NA INTERFACE DAS
SOLUES APS A REAO COM REAGENTE DE MOLISH
CONTEDO

DOS

TUBOS

DE COR COM O REAGENTE DE MOLISH

ENSAIO
(FORMAO DO ANEL)
A- 1 ML GUA DESTILADA
LARANJA CLARO (cor do reagente)
B- 1
ML
SOLUO
DE VIOLETA
GLICOSE 1%
C- 1
ML
SOLUO

DE VIOLETA

SACAROSE 1%
D- 1 ML SOLUO DE AMIDO VIOLETA
1%

TABELA 2.0: REGISTRO DOS SINAIS OBSERVADOS NAS SOLUES APS A

REAO COM IODO.
CONTEDO DOS TUBOS DE ENSAIO

COR APS REAO COM O IODO

A- 1 ML GUA DESTLADA
AMARELO (nenhuma reao observada)
B- 1 ML SOLUO DE GLICOSE 1% AMARELO (nenhuma reao observada)
C- 1 ML SOLUO DE SACAROSE AMARELO (nenhuma reao observada)
1%
DE- 1 ML SOLUO DE AMIDO 1%

AMBIENTE

AQUECIMENTO

RESFRIAMENTO

ROXO

AMARELO-

ROXO

ESVERDEADO

TABELA 3.0: REGISTRO DA OCORRNCIA DE REAES DE IDENTIFICAO DE

GLICDIOS REDUTORES.
CONTEDO DOS TUBOS DE TEMPO

DE COR OBSERVADA

ENSAIO
AQUECIMENTO
A- 1 ML GUA DESTILADA
3
B- 1
ML
SOLUO
DE 3
GLICOSE 1%
C- 1
ML
SOLUO

DE 3

FRUTOSE 1%
D- 1 ML SOLUO DE AMIDO 3
1%

AZUL
VERMELHO TIJOLO
VERMELHO TIJOLO
VERMELHO
TIJOLO(menos intensa)

TABELA 4.0: REGISTRO DE OCORRNCIA DE REES DE DIFERENCIAO

ENTRE ALDOSES E CETOSES
CONTEDO
DOS

COR COM REAGENTE DE SELIWANOFF

TUBOS

3 MINUTOS
ENSAIO
A- 3 ML DE INCOLOR

6 MINUTOS

9 MINUTOS

INCOLOR

INCOLOR

VERMELHO

VERMELHO

SELIWAN
OFF

GOTAS
DE GUA
DESTILAD
A
B- 3 ML DE LARANJA
SELIWAN
OFF

INTENSO

GOTAS
DE
FRUTOSE
1%
C- 3 ML DE LARANJA

VERMELHO

SELIWAN
OFF

VERMELHO
INTENSO

GOTAS
DE
SOLUO
DE
GLICOSE
1%
D- 3 ML DE LARANJA
SELIWAN
OFF

GOTAS
DE
SOLUO

VERMELHO

VERMELHO
INTENSO

DE
SACAROS
E 1%

TABELA 5.0: REGISTRO DA OCORRNCIA DE HIDRLISE DA SACAROSE

CONTEDOS

DOS COR DA SOLUO APS 3 MINUTOS EM BANHO-

TUBOS DE ENSAIO

MARIA + 3 ML DO REATIVO DE BENEDICT

A- 2 ML DE SACAROSE VERMELHO TIJOLO

1% + 3 GOTAS DE CIDO
SULFRICO
COCENTRADO
B- 2 ML DE SACAROSE AZUL
1% + 3 GOTAS DE GUA
DESTILADA

TABELA 6.0: REGISTRO DE OCORRNCIA DE HIDRLISE DO AMIDO

TUBO

TEMPO

REAO (MIN)
0

DE LUGOL
AZUL

IDENTIFICADO
AMIDO

ROXO

AMILODEXTRINA

10

ROXO - AVERMELHADO

AMILODEXTRINA

15

VERMELHO

ERITRODEXTRINA
ERITRODEXTRINA

20

VERMELHO - AMARELO

ERITRODEXTRINA

AMARELO BEM CLARO

E ACRODEXTRINA
ACRODEXTRINA E

25

DE COR COM O REATIVO PRODUTO

ERITRODEXTRINA
COR COM O REATIVO DE BENEDICT
G

30

VERMELHO TIJOLO

FONTE: Laboratrio de Bioqumica da UFPI, Alunos de Farmcia, 2010.2, Teresina.

CONCLUSO
Diante dos aspectos aferidos nos experimentos, puderam ser identificadas algumas
caractersticas qumicas dos carboidratos atravs de testes inespecficos como o de Molish e
por meio de reagentes que interagem com glicdios especficos. Dentre estes reativos que
reagem com carboidratados especficos, o iodo foi utilizado para identificar amido. J para a
caracterizao de glicdios redutores e diferenciao entre aldoses e cetoses fora usados,
respectivamente, reativo de Benedict e reagente de Seliwanoff. O reagente de Benedict foi
novamente empregado, porm na identificao dos produtos da hidrlise da sacarose e do
amido, identificao evidenciada a partir da interao dos produtos de hidrlise destes
acares com o reagente de Benedict gerando cores caractersticas.

REFERNCIAS
NELSON, David L.; COX, Michael M. Princpios de bioqumica. 4 ed. So Paulo: Sarvier,
2006.p. 236.
http://pt.wikipedia.org/wiki/Reagente_de_Benedict Acessado em 28/03/2010 s 8:40
http://pt.wikibooks.org/wiki/Bioquimica/Oligossacarideos Acessado em 28/03/2010 s 8:56