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REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO

GÊNICA EM BACTÉRIAS

Profa Dra Rita de Cássia G. Simão


Centro de Ciências Médicas e Farmacêuticas
UNIOESTE, Cascavel, PR

Biologia Molecular Básica e Genética Bacteriana


Marillis do Valle Marques – SBG
Capítulo 13
Qual é o princípio que
norteia a expressão gênica?
O PRINCÍPIO DA ECONOMIA
A EXPRESSÃO GÊNICA PODE SER
REGULADA EM VÁRIOS NÍVEIS:

ü INÍCIO DA TRANSCRIÇÃO

ü TÉRMINO DA TRANSCRIÇÃO

ü PÓS-TRANSCRIÇÃO
INÍCIO DA TRANSCRIÇÃO

A RNA POLIMERASE É CAPAZ

DE LIGAR-SE AO PROMOTOR E

ESTABELECER A FOMAÇÃO DO

COMPLEXO ABERTO?
QUEM FAZ A REGULAÇÃO DA
TRANSCRIÇÃO?

PROTEÍNAS REGULATÓRIAS:
FATORES DE TRANSCRIÇÃO
PROTEÍNAS REGULATÓRIAS

LIGAM-SE A SEQUÊNCIAS ESPECÍFICAS


NO DNA E ESTIMULA OU INIBE O
A TRANSCRIÇÃO DE UM GENE
ESPECÍFICO
UM FATOR DE TRANSCRIÇÃO
PODE REGULAR UM OU MAIS GENES

CONJUNTO DESTES GENES: REGULON

1 GENE PODE SER REGULADO POR DOIS

FATORES DE TRANSCRIÇÃO DIFERENTES,

PORTANTO PODE PERTENCERA MAIS

DE UM REGULON
ESTÍMULO
FATOR DE TRANSCRIÇAO 1
(REGULON 1)

VÁRIOS GENES
FATOR DE TRANSCRIÇAO 2
(REGULON 2)

VÁRIOS GENES

CONJUNTO DE GENES: ESTIMULON


SISTEMAS REGULATÓRIOS GERAIS
AS CONDIÇÕES QUE DETERMINAM SE
UM GENE SERÁ MAIS OU MENOS
EXPRESSO PASSAM POR 3 TIPOS
DE COMANDOS:

1. INCLUSIVOS
2. EXCLUDENTES
3.ALTERNATIVOS
O GENE A DEVE SER TRANSCRITO
SOMENTE NA PRESENÇA DE CERTA
SUBSTÂNCIA E NA AUSÊNCIA DE OUTRA

O GENE B SERÁ TRANSCRITO SOMENTE


NA PRESENÇA DE CERTO SUBSTRATO EM
DETERMINADA CONDIÇÃO DE CRESCIMENTO

O GENE PODERÁ SER EXPRESSO NA


PRESENÇA DE UM SUBSTRATO OU OUTRO
A UTILIZAÇÃO DE FATORES SIGMA ALTERNATIVOS
COMPETIÇÃO ENTRE FATORES SIGMA
UM GENE PODE TER MAIS DE UM PROMOTOR E PODE
SER REGULADO POR DIFERENTES FATORES SIGMA
OS FATORES SIGMA ALTERNATIVOS

SÃO DIVIDIDOS EM 2 FAMÍLIAS

BASEADO EM SUA ORIGEM

FILOGENÉTICA:

SIGMA 70 E SIGMA 54
FATORES SIGMA ALTERNATIVOS EM E. coli
REGIÕES DE INTERAÇÃO ENTRE OS FATORES SIGMA E
A REGIÃO -10 E -35 DE UM PROMOTOR
A RNA POLIMERASE LIGADA AO SIGMA 54
SE LIGA AO PROMOTOR MAS É INCAPAZ DE
ABRIR AS FITAS DO DNA.

PROTEÍNA ATIVADORA.

OLIGOMERIZAÇÃO
CURVATURA NO DNA

INTERAÇÃO COM A RNA POL


HIDRÓLISE DE ATP
ABERTURA DAS FITAS
MECANISMO DE SEQUESTRO DO SIGMA 70
NA FASE ESTACIONÁRIA E. coli

Rsd
RNA 6S liga core com Sigma70
Inibição da transcrição
SEQUESTRO DO SIGMA 32 POR DnaK
SEUESTRO PELO ANTI-SIGMA RseA
DO FATOR SIGMA ECF (ExtraCytoplasmic Function)
ATIVADORES DA TRANSCRIÇÃO

RECONHECEM SEQ.
A CENTENAS DE BASES
DO PROMOTOR

INTERAGEM COM
A SUB. ALFA OU SIGMA
DA RNA POL

REAJUSTA A DISTÂNCIA
ENTRE O ATIVADOR O PROMOTOR
ASSOCIADO AO CORE DA
RNA POL
REPRESSORES
DA TRANSCRIÇÃO
REPRESSOR SE LIGA
AO PROMOTOR

REPRESSOR LIGADO
AO OPERADOR FORMANDO
UM OLIGOMERO

REPRESSOR PODE BLOQUEAR


A PROTEÍNA ATIVADORA
INTERAÇÃO DO ATIVADOR COM INDUTOR

ENZIMAS QUE DEGRADAM UM SUBSTRATO

PRÓPRIO SUBSTRATO
É O INDUTOR
QUANDO O PRODUTO DA DEGRADAÇÃO DO SUBSTRATO
ESTÁ EM ABUNDÂNCIA, O SUBSTRATO PODE SER CO-REPRESSOR
RESUMINDO

A REPRESSÃO PODE A ATIVAÇÃO PODE


OCORRER QUANDO: OCORRER QUANDO:

ENTRADA DE UM REPRESSOR SAÍDA DE UM REPRESSOR

SAÍDA DE UM ATIVADOR A LIGAÇÃO DE UM ATIVADOR


RESUMINDO

A REPRESSÃO PODE A ATIVAÇÃO PODE


OCORRER QUANDO: OCORRER QUANDO:

ENTRADA DE UM REPRESSOR SAÍDA DE UM REPRESSOR

SAÍDA DE UM ATIVADOR A LIGAÇÃO DE UM ATIVADOR


A REPRESSÃO PODE OCORRER QUANDO
OCORRE A ENTRADA DE UM REPRESSOR
RESUMINDO

A REPRESSÃO PODE A ATIVAÇÃO PODE


OCORRER QUANDO: OCORRER QUANDO:

ENTRADA DE UM REPRESSOR SAÍDA DE UM REPRESSOR

SAÍDA DE UM ATIVADOR A LIGAÇÃO DE UM ATIVADOR


A REPRESSÃO PODE OCORRER QUANDO
OCORRER A SAÍDA DE UM ATIVADOR
RESUMINDO

A REPRESSÃO PODE A ATIVAÇÃO PODE


OCORRER QUANDO: OCORRER QUANDO:

ENTRADA DE UM REPRESSOR SAÍDA DE UM REPRESSOR

SAÍDA DE UM ATIVADOR A LIGAÇÃO DE UM ATIVADOR


A ATIVAÇÃO PODE SER RESULTADO
DA SAÍDA DE UM REPRESSOR
RESUMINDO

A REPRESSÃO PODE A ATIVAÇÃO PODE


OCORRER QUANDO: OCORRER QUANDO:

ENTRADA DE UM REPRESSOR SAÍDA DE UM REPRESSOR

SAÍDA DE UM ATIVADOR A LIGAÇÃO DE UM ATIVADOR


A ATIVAÇÃO PODE SER RESULTADO
DA LIGAÇÃO DE UM ATIVADOR
ALGUMAS FAMÍLIAS DE REGULADORES
A REGULAÇÃO DO OPERON LAC
A ATIVAÇÃO PODE SER RESULTADO
DA SAÍDA DE UM REPRESSOR
A REGULAÇÃO DO OPERON LAC

PERMEASE

TRANSACETILASE

BETA-GALACTOSIDASE
EFEITOS EM CIS E TRANS

Cis: Quando uma mutação ocorre no DNA, alterando


uma seq. reconhecida por uma proteína (ex. sítio
operador do operon lac).

Trans: Genes ou produtos gênicos que operam “em


trans” podem ter atividade mesmo quando não estão
fisicamente ligados uns aos outros (há o envolvimento
de um produto capaz de se difundir). Ex. Gene lacI do
operon lac
OPERON Lac É REGULADO PELO REPRESSOR LacI
(REGULAÇÃO NEGATIVA)
A LACTOSE SE LIGA AO REPRESSOR E ALTERA
A CONFORMAÇÃO DA PROTEÍNA LEVANDO A SUA
DISSOCIAÇÃO.

O REPRESSOR LacI
EXISTEM 3 SÍTIOS OPERADORES NO OPERON Lac, O1, O2
E O3, E O REPRESSOR PODE SE LIGAR A TODOS COM
DIFERENTES AFINIDADES. A LIGAÇÃO EM MAIS DE UM
SÍTIO SIMULTÂNEAMENTE CAUSA UMA DISTORÇÃO DA
HÉLICE DO DNA QUE INIBE A MIGRAÇÃO DA RNA POL
O OPERON Lac É ALTAMENTE EXPRESSO NA AUSÊNCIA DE GLICOSE
(REGULAÇÃO POSITIVA)

ENQUANTO HOUVER GLICOSE A BACTÉRIA VAI


COSUMI-LA E NÃO IRA METABOLIZAR A LACTOSE

REPRESSÃO CATABÓLICA

INIBIÇÃO DA TRANSCRIÇÃO DE VÁRIOS


GENES NA PRESENÇA DE GLICOSE
SINALIZAÇÃO EM RESPOSTA A CARÊNCIA DE GLICOSE

CAP: Catabolite Activator protein


ou
CRP: cAMP receptor protein
SINALIZAÇÃO EM RESPOSTA A CARÊNCIA DE GLICOSE

CAP: Catabolite Activator protein


ou
CRP: cAMP receptor protein
SINALIZAÇÃO EM RESPOSTA A CARÊNCIA DE GLICOSE

CAP: Catabolite Activator protein


ou
CRP: cAMP receptor protein
cAMP-CAP reconhece a região regulatória
de vários genese ativa a RNA Polimerase

Ausência de glicose
Presenca de cAMP
Regulação positiva do
Operon lac
FUNCIONAMENTO DO OPERON Lac EM DIFERENTES
SITUAÇÕES FISIOLÓGICAS

Glicose +
Lactose -

Glicose -
Lactose -
Glicose +
Lactose +

Glicose -
Lactose +
SISTEMAS DE EXPRESSÃO BASEADOS NO OPERON Lac

Indutor sintético
homólogo à lactose
VETOR DE EXPRESSÃO HIPOTÉTICO
O SISTEMA pET
Obrigada!
ritabioq@yahoo.com.br

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