CONTROLE DA EXPRESSÃO

GÊNICA - RNAS REGULADORES

Prof. Dr. Paulo Urbano
 Principais RNAs
¨ Existem três tipos básicos de RNA, que diferem um do outro no peso molecular: o RNA
ribossômico, representado por RNAr (ou rRNA), o RNA mensageiro, representado por RNAm
(ou mRNA) e o RNA transportador, representado por RNAt (ou tRNA).

Ø O RNA mensageiro é o de peso molecular intermediário e atua conjuntamente com os

ribossomos na síntese proteica.
FUNCIONAIS

Ø O RNA ribossômico é o de maior peso molecular e constituinte majoritário do

ribossomo, organoide relacionado à síntese de proteínas na célula.

Ø O RNA transportador é o mais leve dos três e encarregado de transportar os aminoácidos

que serão utilizados na síntese de proteínas.
mRNA (EUCARIOTO VS PROCARIOTO)
Conceitos

¨ Promotores - sequências de DNA específicas

importantes para o início da transcrição -
reconhecidas por algumas proteínas específicas à
Fatores de transcrição

¨ TATABox
Conceitos
¨ Reforçador (enhancer) – também chamados de
acentuadores

¨ Definição: região curta (50-1500 bp) do DNA que pode ser

ligada por proteínas (ativadores/fatores de transcrição)
para aumentar a probabilidade de ocorrer a transcrição
de um determinado gene à Aumentar a afinidade da
transcrição por determinados promotores
Conceitos

¨ Essa sequencia reforçadora (enhancers) não atuam na

própria região promotora, mas são ligados por
proteínas ativadoras.
¨ Essas proteínas ativadoras interagem com o complexo
mediador, que recruta a polimerase II e os fatores
gerais de transcrição que, então, começam a
transcrever os genes.
¨ Enhancers também podem ser encontrados dentro dos
íntrons
Conceitos
¨ Ativador de transcrição

TATABox – mais comum à Proteínas reconhecem

 Conceitos

¨ Proteínas ativadoras de
transcrição – fatores
enzimáticos de reconhecimento
de região

à TFIID (Transcription Factor IID),

que se liga ao TATA box e
recruta o fator TFIIB.
Conceitos
¨ O fator TFIIB serve para
ligação da enzima RNA
Polimerase

¨ Então, a RNA pol ligada ao

TFIIF e TFIIE junta-se ao TFIIH e
aos outros fatores, formando o
complexo de transcrição.
Conceitos
¨ Repressor

à Proteína que liga regiões

repressoras no DNA

à Bloqueio dos ativadores,

bloqueio do mediador,
recrutamento de histona
desacetilase
Níveis de regulação
Níveis de regulação

1 - Regulando quando e como um determinado gene é

transcrito, o que chamamos de controle transcricional.

2 - Controlando como o transcrito de RNA é processado

(controle do processamento de RNA).

3 - Selecionando quais RNAs mensageiros completos

serão exportados do núcleo para o citoplasma e sua
localização
Níveis de regulação

4 - Selecionando quais RNAs mensageiros no

citoplasma serão traduzidos pelos ribossomos
5 - Desestabilizando, de forma seletiva, algumas
moléculas de RNA mensageiro no citoplasma
6 - Ativando, inativando, degradando ou
compartimentalizando moléculas de proteínas
específicas após sua produção
Regulação transcricional

¨ Principal nível de regulação – energeticamente

mais econômico

¨ Remodelamento da cromatina

¨ Ligação de proteínas reguladoras

Remodelamento da cromatina - epigenética

¨ Mudanças no nível de empacotamento do DNA

modificam o acesso do complexo transcricional ao gene

¨ Na prática à A informação genética ou genótipo não só

está composta de instruções para desenvolver o novo ser,
como também incorporará condições de
desenvolvimento das referidas instruções, é o que se
conhece como epigenética
DEFINIÇÃO DE EPIGENÉTICA

REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO GÊNICA

QUE NÃO ENVOLVE MUDANÇAS NA
SEQUÊNCIA DO DNA

à “Marcas” pontuais que marcam ou desmarcam começo ou

fim de genes. Dependendo da pontualidade da marcar, pode
expressar (ativar) ou não expressar (silenciar) o gene
Para entender...

¨ Nem todos os genes são necessariamente expressos em

todas as células de um organismo.

¨ A maioria está programada para permanecer

reprimida

¨ Não se sabe o por que!

PRINCIPAIS MECANISMOS EPIGENÉTICOS
Principal modificação

¨ A Metilação é o principal mecanismo epigenético: um

grupo metil é transferido para algumas bases de
citosina do DNA.

¨ O processo é fundamental para "desligar" os genes

que provocam alterações na transcrição genética
 O que é
¨ Adição de um radical metil (CH3)
no carbono 5 da base
nitrogenada citosina que é
seguida por uma base guanina

¨ DNA metiltransferases em
mamíferos: DNMT1 e DNMT2
(manutenção) além das DNMT3A,
DNMT3B, DNMT3L (novas
¨ Se não houver a atividade da
metilações).
DNMT1, a citosina será desmetilada
O que é
¨ Metilação do DNA leva ao recrutamento de proteínas que causam a
compactação da cromatina, impedindo que a enzima RNA-
polimerase se ligue à molécula.

¨ Dessa forma não ocorre a expressão gênica à não acontece

síntese de RNA a partir da informação contida na fita do DNA.

¨ Regiões da molécula de DNA nas quais não existem genes ativos

(regiões chamadas de heterocromatina) são notadamente
compactadas e metiladas
Resumindo

¨ Resumidamente, a Metilação é quando impede que o

DNA produza proteína?

¨ “A metilação impede a transcrição o que,

consequentemente, inviabiliza a formação de
proteínas”.
Resumindo

¨ A inativação de 85% dos genes de um dos

cromossomos X nas mulheres (processo denominado
de “compensação de dose”, uma vez que mulheres
possuem dois cromossomos X), ocorre através da
metilação e da compactação do DNA
Metilação

• Efeito específico de atenuar a expressão gênica pela inibição da

transcrição.

• Mecanismos de silenciamento gênico

• Os mecanismos que fazem com que o DNA metilado seja

transcricionalmente silencioso não são bem compreendidos
Na prática

¨ Região promotora metilada à

mRNA do gene agouti:

¨ Produzido um pouco durante o

desenvolvimento e permanece
silenciado no restante da vida.
¨ Camundongo saudável, coloração
marrom
Na prática

¨ Região promotora não

metilada à O gene agouti é
transcrito continuamente.

¨ Camundongo com cor amarela,

tumores e obesidade
mRNA

¨ Inicialmente, acreditava-se que todos os RNAms

possuíam tempos similares de permanência no
citoplasma.

¨ Sabemos que não – alguns mais, outros menos... Este

período de duração no citoplasma é também
denominado estabilidade do RNAm
mRNA

¨ Ao chegarem no citoplasma, as moléculas de RNAm

passam a estar expostas à ação das enzimas de
degradação.

¨ O principal processo de degradação do RNAm, é

iniciado pela remoção da cauda poli-A e é
denominado desadenilação - desadenilases
mRNA
¨ Em seguida ao processo de desadenilação, ocorre a
remoção do “capacete”, presente na extremidade 5’ do
RNAm, realizada por um conjunto de proteínas e fatores.

¨ Após a retirada das estruturas de proteção (capacete e

cauda poli-A), o transcrito é rapidamente degradado por
enzimas denominadas exonuclease (nucleases
citoplasmáticas)
Controle da degradação do mRNA

¨ O primeiro passo no processo de degradação é a

redução da cauda Poli-A realizada por enzimas
denominadas desadenilases.
Controle da degradação do mRNA

¨ Após a degradação da cauda Poli-A, a estrutura

capacete 5’ é rapidamente removida e o resto do
RNAm é rapidamente atacado por exonuclease.
Controle da Tradução

¨ Os vários mecanismos de regulação tradicional não

são completamente elucidados

¨ Tradução inicia a partir de um RNAm à “códon de

iniciação da tradução”, localizado na região
próxima à extremidade 5’
Controle da Tradução
¨ A “maquinaria” responsável pela tradução percorre a fita
de RNAm a partir da extremidade 5’ em direção à
extremidade 3’, em busca do “códon de iniciação da
tradução”.

¨ Alguns mRNA contêm regiões codificadoras de pequenos

peptídeos antes da região que codifica para o
polipeptídio principal
Controle da Tradução

¨ Tais regiões afetam a expressão gênica no âmbito

traducional, prejudicando a tradução do
polipeptídio principal.

G
AU AU
G
A A A
U U U
G G G
Controle de atividade proteica

¨ Pós traducional

¨ Algumas proteínas devem ser clivadas proteoliticamente

(cortadas) para se tornarem ativas à insulina

¨ adição ou remoção de grupos químicos pode regular a

atividade proteica ou o tempo que a proteína permanece
na célula antes de ser "reciclada".
Modificações mais comuns pós-tradução

¨Ubiquitinação – marcação para degradação por

um marcador químico chamada ubiquitina
à Quem degrada é o Proteossomo