UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

INFORME DE PRÁCTICA N°3

BIOQUÍMICA Y NUTRIC. HUMANA

Alumno:

Flores Jimenez, Josué Israel

ID: 000251890

Grupo: 02

NRC: 7929

Asignatura: Bioquímica y nutrición

humana practica

Docente de Práctica: Cabos Sanchez, Jeisson

David

Piura – Perú
2022

Fecha de práctica: 6/05/2022

Presentación del Trabajo: 9/05/2022

 SEMANA N° 4
LABORATORIO N° 4

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES

INTRODUCCIÓN
Las proteínas son macromoléculas, cuyas unidades estructurales
son los aminoácidos unidos por enlaces peptídico. Participan en las
estructuras y diversidad de funciones como transporte, hormonal, etc.
Las proteínas séricas totales comprenden la albúmina y las globulinas,
que pueden ser alfa1, alfa 2, beta 1, beta 2 y gammaglobulinas al
separarlas por electroforesis. Son sintetizadas en el hígado
con excepción de las inmunoglobulinas. La albúmina es la principal
proteína sérica. Las proteínas séricas totales pueden disminuir
(hipoproteinemia) generalmente secundarias a hipoalbuminemia
o aumentar (hiperproteinemia) generalmente por aumento de las
globulinas. Las globulinas aumentan en procesos inflamatorios,
infecciosos., en las hepatitis crónicas y cirrosis. En la cirrosis se tiene
la inversión de la relación albúmina/globulina. La inmunoglobulina
IgG. aumenta en la hepatitis autoinmune, la IgM en la cirrosis biliar y
la IgA en la enfermedad hepática alcohólica.
Las gammaglobulinas pueden aumentar en forma policlonal como
en la cirrosis o monoclonal como en el mieloma múltiples.
FUNDAMENTO
Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ión cúprico,
en medio alcalino, para dar un complejo color violeta con máximo de
absorción a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la concentración
de proteínas totales en la muestra.
REACTIVOS
Reactivo A: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l en hidróxido de sodio 875
mmol/l y alquil aril poliéter (AAP).
S. Standard (Suero Patrón): solución de albúmina y globulinas de
origen bovino, con título conocido de proteínas y albúmina.
MUESTRA: Suero
PROCEDIMIENTO
Armar el siguiente sistema:

Mezclar Incubar a 37 °C por 15 min. Leer a 540 nm llevando a cero

con el blanco el D y S

CÁLCULO: D x factor

FACTOR: PT (g/dl )
S

VALORES DE REFERENCIA: 6.1 a 7.9 g/dl

Resultados:
Tubo B: Color celeste, sin presencia de proteínas ya
que únicamente hay agua.
Tubo S: Color celeste.
Tubo A: Color azul.
Resultados tubo con muestra:

DISCUSIÓN:
El resultado de la cantidad de proteínas del paciente 1 es de 7.75,
siendo los rangos normales de 6 a 8, por lo cual se encuentra
dentro de los rangos normales, mientras que el paciente 2
presenta hiperproteinemia. En el caso del paciente 1 puede
presentar una dieta proteica adecuada, mientras que el paciente
2 una dieta hiperproteica. Las enfermedades que puede presentar
el paciente 2 son: amiloidosis, deshidratación, hepatitis B, entre
otras; siendo estas las probables causas también de su estado.
CONCLUSIONES:

CUESTIONARIO
1. ¿En qué se diferencia el suero del plasma? ¿Cómo se obtienen?

A la parte de la sangre que es líquida, no contiene células, y es

obtenida a partir de un proceso de centrifugación en el que se ha
llevado a cabo el uso de anticoagulantes, de tal forma que la
sangre no se coagula, se le denomina plasma, este a su vez
presenta globulinas, lipoproteínas, aminoácidos, hormonas, iones,
glucosa, albúmina, agua, fibrinógeno y factores de coagulación.
Mientras que a la parte líquida de la sangre que es obtenida
mediante extracción después de un proceso de centrifugación sin
usar anticoagulantes, se le llama suero, este tiene la misma
composición que el plasma, a excepción del fibrinógeno y los
factores coagulantes. (1)

2. ¿Cuáles son las proteínas plasmáticas?

Fibrinógeno, albúmina y globulinas (α1-globulina, α2-globulina, β-
globulina y γ-globulina) (2)

3. ¿Qué proteínas son alfa2 globulinas?

▪ Ceruloplasmina: Transporta cobre.
▪ Alfa-2 lipoproteína LDL: Realiza el transporte de triglicéridos y
lípidos.
▪ Alfa-2 macroglobulina: Funcionalidad antiinflamatoria, además de
inhibición de proteasa.
▪ Haptoglobina: Funciona como proteína de unión a la hemoglobina.
(3)

4. ¿Qué proteínas son beta globulinas?

En el grupo de las beta-1 globulinas encontramos a la transferrina,
cuya función es transportar hierro; y hemopexina, la cual
transporta al grupo hemo de la hemoglobina.
 Por otro lado, en las beta-2 globulinas encontramos a la beta-2
lipoproteína, la cual transporta colesterol y lípidos; además a las
proteínas del complemento C3 y C4; y la beta-2
microglobulina.(4)

5. ¿Qué tipo de gammaglobulinas conoce?

En el grupo de las gammaglobulinas existen varios tipos de

proteínas distinguidas por sus funcionalidades, entre las cuales
se puede resaltar a diversos tipos de inmunoglobulinas.
Se presentan 5 clases de inmunoglobulinas: IgG, IgA, IgM, IgD e
IgE. (5)

6. Señale cinco enfermedades pueden causar hipoproteinemia.

✓ La malnutrición:
Un tipo de malnutrición es la desnutrición tipo marasmo, esta es
causada por una deficiencia de ingesta tanto calórica como
proteica, por ello: en primer lugar, se empezarán a utilizar las
reservas de glucógeno con la finalidad de obtener glucosa y
producir energía; una vez consumidas estas, para conseguir más
energía se van a degradar las proteínas endógenas, esto sumado
a la deficiencia de ingesta proteica causa hipoproteinemia. (6)
✓ Síndromes de malabsorción: En esta hay una mala asimilación
de los nutrientes debido a fallas en la digestión, absorción o
transporte. Por ello, si entre estos hay una malabsorción de
proteínas, no solo no se usarán correctamente estos nutrientes,
sino que la producción de proteínas en base a aminoácidos
ingeridos disminuirá; provocando hipoproteinemia. (7)

✓ Pérdidas renales (aminoacidurias): En este tipo de enfermedad

hay una cantidad incrementada anormalmente en la orina.
Entonces, al ser los aminoácidos las unidades monoméricas de
las proteínas, en consecuencia, habrá menor producción de
proteínas, lo que desarrollará hipoproteinemia.
✓ Pérdidas intestinales (Celiaquía): Entre las enfermedades con
pérdidas intestinales se encuentra la celiaquía. En esta se daña
el revestimiento del intestino delgado debido a una reacción con
el gluten, esto ocasiona que el intestino no absorba los nutrientes
aportados por los alimentos. Por lo cual si no se absorben los
aminoácidos después de un proceso metabólico de proteínas,
entonces no se podrán producir gran cantidad de estos
polipéptidos, provocando una hipoproteinemia.

✓ Hepatopatías tipo cirrosis: En la cirrosis hepática se produce

una alteración en la función y estructura del hígado. Este tipo de
enfermedad es el resultado de enfermedades crónicas hepáticas
como obesidad mórbida, enfermedades autoinmunes, etc.
Asimismo, la malnutrición es un signo común en las personas con
cirrosis, aproximadamente el 80% padecen de malnutrición,
siendo la severidad de esta correlacionada con la severidad de
cirrosis hepática. Una de las causas de esto puede ser debido a
que una gran mayoría tiene síntomas gastrointestinales como
anorexia, náuseas, vómitos y saciedad precoz; lo cual va a
disminuir la ingesta de nutrientes. Además, en los pacientes
relacionados a diabetes mellitus e insuficiencia pancreática se
realiza una restricción de carbohidratos. Por lo tanto,
incrementará la glucagonemia lo que provocará una disminución
de glucógeno hepático y muscular.
En consecuencia, el almacenamiento de glucógeno se verá
afectado, de forma que el glucógeno se encontrará disminuido.
De este modo, se desarrollará gluconeogénesis, por lo que se
usarán aminoácidos musculares para producir energía y
contribuir a la síntesis de glucosa, por lo que el catabolismo
proteico se incrementará; y esto sumado a la alteración en el
hígado, que traerá consigo una disminución en la producción de
proteínas, se provocará una hipoproteinemia.
7. Señale cinco enfermedades que pueden causar hipeproteinemia.
• Amiloidosis: Se produce cuando la proteína amiloide, la cuál
es anormal, se acumula en los órganos e interrumpe su
correcto funcionamiento.
• Deshidratación
• Hepatitis B: La hepatitis B aumenta el riesgo de tener
cirrosis hepática.
• Hepatitis C: Infección viral que provoca daños en el hígado
debido a una inflamación de este.
• VIH/sida
• Gammapatía monoclonal de significado incierto
• Mieloma múltiple
 DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA
1. INTRODUCCIÓN
La albúmina es la principal proteína del plasma, mantiene la
presión coloidosmótica del plasma, transporta bilirrubina, calcio,
ácidos grasos y otras sustancias. La hipoalbuminemia puede
deberse a defectos de síntesis (hepatitis crónica, cirrosis), a
menor aporte (desnutrición, kwashiorkor), proteinuria o pérdida
intestinal.
2. FUNDAMENTO
La albúmina reacciona con la forma aniónica del 3,3',5,5' tetra
bromosulfon cresol ftaleína con aumento de la absorbancia a 625
nm
3. REACTIVOS
Reactivo B: solución de 3,3',5,5'-tetrabromo cresolsulfon
ftaleína (en polioxietilén lauril éter S. Standard (Suero Patrón):
solución de albúmina y globulinas de origen bovino, con título
conocido de proteínas y albúmina
4. MUESTRA: SUERO
5. PROCEDIMIENTO
Armar el siguiente sistema:

Mezclar e Incubar a temperatura ambiente (15 a 28 °C) por 15

minutos.Leer a 625 nm llevando a cero con el blanco reactivo.
Leer dentro de los 20 minutos
CÁLCULO: D X F F= Alb (g/dl)S

6. VALORES DE REFERENCIA
3.5-4.8 g/dl
Resultados:
DISCUSIÓN:
En el caso del paciente 1 presenta rangos de albúmina dentro
de lo normal, mientras que el paciente 2 tiene
hipoalbuminemia, esta disminución de albúmina podría
ocasionarle edemas, además de una facie cushingoide. Las
enfermedades probables causantes de este estado son:
Anorexia tipo nerviosa y kwashiorkor.
CUESTIONARIO
1. ¿En qué patologías se produce hipoalbuminemia?
-Anorexia nerviosa tipo restrictivo
-Kwashiorkor
2. ¿En qué casos se produce hiperalbuminemia?

Deshidratación aguda
Nefritis
Enfermedad flomerular

3. ¿Cuál es la relación entre los niveles de albúmina y grados

de
desnutrición?
Un indicador de la proteína visceral es la albúmina, si los niveles de
este marcador disminuyen, es un signo de hipoalbuminemia, lo cual
se observa en pacientes con riesgo de desnutrición, este
diagnóstico permite al individuo tomar las medidas adecuadas para
revertir esta enfermedad.
 DETERMINACIÓN DE TRANSAMINASAS
TRANSAMINASA GLUTÁMICO PIRÚVICA O ALANINA
AMINOTRANSFERASA (GPT)
1. INTRODUCCIÓN
Alanina aminotransferasa (ALT) o Transaminasa Glutámico
Pirúvica o GPT, exclusivamente citoplasmática y es más
específica de daño hepático o renal
También presente en el tejido muscular. Aumento:
- Hepatitis aguda, GPT>GOT, generalmente >500 U/l.
- Hepatitis crónica: GPT>, <300 U/l.
- Hepatitis alcohólica y cirrosis hepática, GOT: GPT >2,
sugestivo.
- Ictericia obstructiva: discreto aumento.
Otras causas: daño muscular la AST aumenta en forma significativa
y la ALT menos, igualmente con la hemólisis. La AST aumenta en
el infarto de miocardio

2. FUNDAMENTO
L-alanina + alfa cetoglutarato L- glutamato + piruvato
El piruvato reacciona con la fenilhidrazina dando compuesto
coloreado en medio alcalino que se lee a 505 nm

3. REACTIVOS
Sustrato ALT (Reactivo A): alanina 200 mM, alfacetoglutarato
mM pH 7.4 2mM, buffer fosfato 100

Reactivo B: difenilhidrazina 1 mmol en HCL 1 M

Reactivo C: NaOH 0.4 M
Estándar de piruvato de sodio 2 mM
4. MUESTRA: suero
5. PROCEDIMIENTO:
Armar el siguiente sistema:

Mezclar, sacar del baño y leer después de 2 minutos a 505 nm

Obtener concentración de curva de calibración
6. VALORES DE REFERENCIA
hasta 12 U/l

TRANSAMINASA GLUTÁMICO OXALACÉTICA O ASPARTATO

AMINOTRANSFERASA (GOT)
1. INTRODUCCIÓN. Aspartato amino transferasa (AST) o
Transaminasa Glutámico Oxalacética o GOT, es una enzima
citoplasmática y mitocondrial presente en los hepatocitos, pero también
en las células de otros tejidos como corazón, músculo esquelético y
riñón. Se emplea en el diagnóstico de hepatitis aguda igual que la
TGP. En hepatitis alcohólica y cirrosis la relación GOT/GPT se invierte
2. FUNDAMENTO
L-aspartato + alfa cetoglutarato---------L- glutamato + oxalacetato
El oxalacetato se convierte en piruvato reacciona con la fenilhidrazina
dando compuesto marrón en medio alcalino que se lee a 505 nm
 3. REACTIVOS
Sustrato AST (Reactivo A): alanina 200 mM, alfacetoglutarato 2mM, buffer fosfato 100 mM
pH 7.4
Reactivo B: difenilhidrazina 1 mmol en HCL 1 M Reactivo C. NaOH 0.4 M
Estándar de piruvato de sodio 2 mM
4. MUESTRA: suero
5. PROCEDIMIENTO

Mezclar, sacar del baño y leer después de 2 minutos a 505 nmObtener concentración de
curva de calibración
6. VALORES DE REFERENCIA: hasta 12 U/l

CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es el rol de la transaminación en el metabolismo nitrogenado?
Los aminoácidos poseen un grupo amino. Cuando los aminoácidos se acumulan,
entonces estos pasarán a un proceso de desaminación, con el cual solo nos quedaremos
con el cuerpo carbonado, el cuál será usado en el ciclo de Krebs, mientras que el amonio
deberá ir hasta el hígado para eliminarse mediante el ciclo de la urea por la orina.
Entonces, este proceso de desaminación se produce en el músculo, por lo que para llevar
el amonio hasta el hígado se usa la transaminación.
En primer lugar, debemos de saber que la diferencia entre aminoácido y alfa cetoácido
radica en que el aminoácido tiene grupo amino, y el alfa cetoácido tiene oxígeno en vez
de este grupo.
La transaminación se basa en pasar el grupo amino de un aminoácido a un alfa cetoácido.
Entonces, primeramente, un alfa cetoácido se una al grupo amino y se vuelve glutamato,
sin embargo, este no se puede llevar al hígado. Por lo que, en la reacción tendremos al
glutamato y piruvato por ejemplo; entonces una enzima alanina aminotransferasa (ALT)
transferirá el grupo amino del glutamato al piruvato, convirtiéndose el piruvato en alanina y
el glutamato en alfa cetoglutarato.
La alanina producida se dirigirá al hígado. En este se produce la reacción reversa: el
grupo amino de la alanina se transfiere al alfa cetoglutarato mediante la ALT, volviéndose
la alanina en piruvato y el alfacetoglutarato en glutamato. Luego, al glutamato se le quita
el grupo amino y se va como alfa cetoglutarato, mientras que el NH3 se irá al ciclo de la
urea.

2. ¿Cuál es el rol del piridoxal fosfato en la transaminación?

La transaminación es llevada a cabo por las enzimas transaminasas. Por teoría sabemos
que algunas enzimas necesitan de un cofactor que ejerzan su función; en este caso, el
cofactor de las transaminasas es el piridoxal fosfato (PLP). El PLP actúa como
transportador del grupo amino entre los sustratos, con lo cual en el proceso alterna su
estructura entre PLP (piridoxal fosfato) y PMP (piridoxamina-5-fosfato).

3. ¿Cuál es la utilidad de las transaminasas en el diagnóstico?

Alanina aminotransferasa: ALT, también llamada GPT, un aumento importante de esta

indica shock o hepatitis; mientras que un aumento moderado indica cirrosis,
mononucleosis o ictericia.
Aspartato aminotransferasa: AST, también llamada GOT, un aumento importante de
esta indica infarto del miocardio, hepatitis o traumatismos; mientras que un aumento
moderado también puede indicar mononucleosis, ictericia, cirrosis o hemólisis.
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