BIOLOGIA MOLECULAR DO CÂNCER E SISTEMA IMUNE

Professora: Dahra Teles

UNINASSAU 2020.1
 INTRODUÇÃO
 Tumor: proliferação celular descontrolada;
 Neoplasia: tumor maligno;
 Maligno: significa que seu crescimento não é mais controlado e
é capaz de invadir tecidos vizinhos ou se espalhar para tecidos
distantes (metástase).
 INTRODUÇÃO
BENIGNO MALIGNO

Perda das
Alterações
Bem Podem ser Perda do controle de
cromossômicas ou
propriedades
divisão e adesivas da
circunscritos encapsulados proliferação celular;
alterações
membrana
epigenética;
Citoplasmática;
Capacidade de
Não fixados a Perda da capacidade
Crescimento de diferenciação e
induzir o Margens
estruturas crescimento de difusamente
lento especialização
adjacentes vasos sanguíneos infiltrativas
celular;
(Angiogênese).

Fixados a estruturas
Crescimento rápido Invasão e metástase
adjacente
 INTRODUÇÃO
 O câncer é uma doença genética, independente de ser
esporádica ou hereditária.

 É causada por mutações em genes que controlam a proliferação

e a morte celular.
 DESENVOLVIMENTO
 Processo gradual por meio de uma série progressiva de alterações;
 Mutações primarias e mutações adicionais ao longo do
desenvolvimento.
CAUSAS:
Agentes químicos
Radiação
Irritação crônica
Infecções
Hereditariedade
Multifatorial
O CÂNCER É UMA DOENÇA GENÉTICA CAUSADA POR ACÚMULO DE
MUTAÇÕES

Ativam genes que estavam silenciados - Proto-oncogenes

Inativam genes que estavam ativos - Genes de supressão tumoral

QUANTO À ORIGEM DA CÉLULA
VAMOS RELEMBRAR O CICLO CELULAR?!
 CICLO CELULAR
 Interfase é o período em que ocorre o crescimento celular e a
duplicação do DNA.
 Mitose é o período em que ocorre a separação do DNA em dois
conjuntos e divisão do citoplasma, formando duas novas células.
G0: Repouso. Estágio inativo, metabolicamente
ativa mas sem proliferação.
G1: Crescimento celular. Intervalo entre a mitose
e o início da replicação do DNA.
S: Replicação do DNA.
G2: Período pré-mitótico. Crescimento celular
continua e síntese protéica
M: Mitose
CICLO CELULAR
 CICLO CELULAR
Sequência ordenada de eventos:

Ligação do
Ativação do Ativação de Ativação de Iniciação e
fator de Transmissão
receptor do proteínas proteínas progressão
crescimento do sinal até
fator do transdutoras regulatórias do ciclo
a receptor o núcleo;
crescimento de sinal; nucleares; celular.
específico;
 REGULAÇÃO DO CICLO CELULAR
 Balanceamento entre o número de células
originadas por mitose e o de morte celular por
apoptose;

 O ciclo celular não progride automaticamente

devido a paradas do ciclo em pontos
estratégicos;

 Progressão só ocorre quando tais pontos são

ultrapassados por estímulos apropriados.
REGULAÇÃO DO CICLO CELULAR
Chekpoint – Pontos de Verificação:
❑ Mecanismo que monitora o ciclo celular;

❑ Controle de qualidade: a correta execução dos eventos;

❑ Impede início de eventos subsequentes até que o anterior seja executado com sucesso;

❑ Reparo ou apoptose;

❑ Se erros: cânceres, anomalias cariotípicas;

❑ No fim de G1, G2 e na Mitose.

 REGULAÇÃO DO CICLO CELULAR
Chekpoint – Pontos de Verificação:

Proteína p53: verificação em G1

❑ É induzida rapidamente em resposta ao DNA danificado.

❑ Mutação no gene codificador de p53 evita o bloqueio em G1 em resposta ao DNA

danificado replicação de DNA danificado que será passado para as células-filhas
aumento na freqüência de mutações e instabilidade do genoma celular

CÂNCER
 REGULAÇÃO DO CICLO CELULAR
Chekpoint – Pontos de Verificação:

Ligação da Fase S para a Fase M

O ponto de verificação em G2 evita a iniciação da mitose antes da conclusão da fase S.

Proteínas MCM (manutenção de micro-cromossomos):

- restrição da replicação do DNA a um evento por ciclo.

- São capazes de se ligar à origem de replicação somente durante a fase G1, permitindo
que a replicação se inicie na fase S.
 REGULAÇÃO DO CICLO CELULAR
Chekpoint – Pontos de Verificação:

Controladores Positivos

❑Ciclinas
- Quantidade varia durante as fases do ciclo;
- Sintetizadas conforme necessidade;
- Ligam-se às CDKs.
❑CDKs (quinases dependentes de ciclina)

- Presentes durante todo o ciclo;

- São ativadas quando ligadas a ciclinas;
- Fosforilação ativa proteínas específicas.
 REGULAÇÃO DO CICLO CELULAR
Chekpoint – Pontos de Verificação:

Ciclinas e Fatores de Crescimento

Síntese da ciclina é induzida em resposta à estimulação dos fatores de crescimento.
Fatores de crescimento presentes através de G1 complexo Cdk4,6/ciclina impele as
células através do ponto de restrição.
Mutações resultantes da contínua expressão irregular da ciclina D1 desenvolvimento
de câncer (linfoma, CA de mama).
 REGULAÇÃO DO CICLO CELULAR
Chekpoint – Pontos de Verificação:

Controladores Negativos

❑CKIs (inibidores de CDKs)

- Específicas: p15, p16, p18, p19 – Cic D-CDK4 e Cic D-CDK6 em G1.
- Inespecíficas: p21, p27, p53, p57 – sobre vários tipos de complexos Ciclina-CDK.

❑Complexo Ubiquitina
- Degrada ciclinas e outras proteínas

❑Fosfatases
- Desfosforila CDKs e ciclina/CDKs, tornando-os inativos.
 REGULAÇÃO DO CICLO CELULAR
Chekpoint – Pontos de Verificação:

Proteína Rb
Proteína substrato chave do complexo Cd4,6/ciclina D

É frequentemente mutada em vários tumores humanos.

A atividade de Rb é regulada por mudanças em suas

fosforilações conforme a célula prossegue através do

ciclo.
Complexos fosforilam pRb, que se desliga de E2F

( proteína de regulação gênica)

pRb ativa (fosforilada) permite progressão do ciclo.

Se gene pRb mutado: perda do controle do ciclo

associação com tumores.

MORTE CELULAR PROGRAMADA - APOPTOSE

 Suicídio de determinadas linhagens celulares ao longo da

embriogênese, ou de algumas células ao longo da vida
 ONCOGENES

Denominação dada aos genes relacionados com o surgimento de

tumores, sejam malignos ou benignos, bem como genes que
quando deixam de funcionar normalmente, transformam uma
célula normal numa célula cancerosa.

Oncogenes: formas irregularmente expressas ou mutadas dos proto-

oncogenes correspondentes.
Proto-oncogenes transformação em oncogenes
desenvolvimento de tumores.
 ONCOGENES
Classes funcionais das oncoproteínas
Fatores de crescimento Fatores de transcrição
✓ PDGF-b (sis) • Reguladores da proliferação
✓ FGF (int-2, hst) ✓ myc, N-myc, L-myc, fos, jun
✓ FGF-5 • Reguladores da diferenciação
✓ erb-a, gli, ski

As oncoproteínas são proteínas Tirosinoquinases

que foram codificadas a partir de ligadas a receptores
genes denominados oncogenes,
que atuam como promotores da
✓ erb-B
proliferação celular ✓ kit
desgovernada. ✓ fms
MECANISMO DE ATIVAÇÃO DOS ONCOGENES
Mutações ponto
 Mutações do oncogene - ras

Rearranjos cromossômicos
 Tumores primitivos neuroectodérmicos

 t(11;22)(q24:q12), t(21;22)(q22;q12), t(7;22)(p22;q12)

 Linfomas

 Burkitt: t(8;14)(q24:q32)- myc/IgH

Amplificação gênica
 N-myc nos neuroblastomas
 VÍRUS DNA

Epidemiologicamente, são mais importantes que os vírus de RNA, relacionando-

se com câncer do colo uterino – HPV, Linfoma de células B e CA nasofaríngeo –
EBV, CA hepatocelular - HBV

Os vírus estudados:
SV40 - vacina Sabin, Polioma vírus, Adenovírus, HPV, EBV
 GENES SUPRESSORES DE TUMOR
❑ Codificam proteínas que possuem importante papel na regulação do ciclo celular e
apoptose, inibindo a formação de tumores.

Gene Rb
 História (Hereditária)

 Comprovação

 Neoplasias relacionadas
 GENES SUPRESSORES DE TUMOR
Gene p53

❑ Associado a vários tipos de câncer (Linfomas, leucemias, etc.)

❑ Responsável por 50% das neoplasias malignas
❑ Outros genes: APC, TBRII, BRCA1, BRCA2, INK4, PTEN
 BIOLOGIA MOLECULAR E CÂNCER
Qual sua aplicabilidade para prevenção e tratamento do câncer?

❑ Melhor prognóstico devido a prevenção e detecção precoce

Taxa de cura Carcinomas em estágio inicial , in situ , é cerca de 90%;
❑ Tratamentos menos invasivos e eficazes (pequenas cirurgias ,radioterapia);

❑ Melhor rastreamento e acompanhamento de pacientes de alto risco;

❑ Pesquisa de herança familiar para alguns tipos de Cânceres .

Ex.: Câncer de cólon , não-poliposo hereditário, incidência de 15% nos CA de cólon .

Alterações em genes supressores BRCA1 e 2 estão envolvidos em 5 a 10 % dos CA de
mama.
❑ Melhor seguimento e redução da mortalidade por CA.
 BIOLOGIA MOLECULAR E CÂNCER
Qual sua aplicabilidade para prevenção e tratamento do câncer?

❑ Diagnóstico molecular: Busca de marcadores celulares

Ex.: Translocação do gene abl , com o bcr, gerando a expressão do oncogene leucemia
mieloide crônica, que pode ser detectado pelo Método de PCR e é usada para monitorar
resposta ao tratamento de pacientes com leucemia
❑ Tratamento:

Drogas atuais , danifica DNA e inibe a replicação de DNA, tóxicas para os indivíduos.
Futuro: Desenvolvimento de drogas que inibem a angiogênese, bloqueando a
proliferação de células endoteliais.
Uso de ácido retinóico , uso direto no combate a proteina oncogenica da leucemia
promielocitica.
SISTEMA IMUNE E CÂNCER
 SISTEMA IMUNE
si E CÂNCER
Imunidade inata x adquirida.

Baseia-se na ideia de que a célula tumoral apresenta alguma diferença

estrutural de sua contraparte normal e que esta ‘anormalidade’ seja
reconhecida pelo sistema imune.

O componente neoexpresso, se for reconhecido pelo sistema imune

como estranho é um antígeno tumoral.
 BIOLOGIA MOLECULAR E CÂNCER
A eficácia do sistema imune em eliminar células neoplásicas está:

❑ Na dependência que estas células sofram alterações

❑ Que deverão ser reconhecidas pelo Sistema Imune

❑ Que colocará em ação componentes eficazes na destruição destas células

Caso haja falha em uma destas três etapas, a célula tumoral escapará ao controle
imunológico.
 si IMUNE POR CÉLULAS
FISCALIZAÇÃO DO SISTEMA

O organismo constantemente produz células neoplásicas que, em indivíduos sadios,

são rapidamente reconhecidas e eliminadas pelo sistema imunológico. Desta forma, o
câncer somente conseguiria progredir se as células tumorais
conseguissem impedir seu reconhecimento pelos linfócitos T/NK.
 si
ANTÍGENOS ASSOCIADOS AO TUMOR

O organismo deve diferenciar as células normais

das células tumorais, para que o sistema imune reaja contra um tumor. Essa
diferença antigênica pode se observar pela perda e ganho de moléculas de
membrana celular. Os linfócitos T/NK do hospedeiro devem reconhecer os
antígenos tumorais.
Variedades de antígenos novos que podem
aparecer na membrana da célula tumoral e
provocar uma resposta imune.
 si E CÂNCER
IMUNIDADE

A apresentação de células diferentes das normais são consideradas estranhas

pelo sistema imune e são atacadas. Esse ataque depende principalmente dos
linfócitos T (células citotóxicas) e das células NK (natural killer), além de
macrófagos ativados e anticorpos.
 LINFÓCITOS

B
T - TIMO MEDULA ÓSSEA
RECEPTOR DE LINFÓCITOS T – TcR IMUNOGLOBULINAS
IMUNIDADE CELULAR
IMUNIDADE HUMORAL

NK
DIFERENCIAÇÃO NÃO
ESTABELECIDA
CITOTOXIDADE NATURAL
LGL
CÉLULAS EXTERMINADORAS NATURAIS
As Células NK compõem cerca de 15% dos linfócitos dos sangue
periférico.

 Tem a capacidade de matar células tumorais e infectadas por vírus.

 Surgem a partir da medula óssea e não precisa do timo para seu

desenvolvimento.

 São encontradas principalmente nos órgãos linfóides secundários.

 si
REGULAÇÃO

• As atividades das células NK é regulada por IL- 2, IL-3, IL-4,IL-12 e IFN-

gama, cada um de um modo diferente.

• IL-2: induz uma diferenciação in vitro, aumentando a atividade citotóxica de

forma a lisar os alvos.

• IL-4: também aumenta a citotoxicidade.

• IL-3: garante a vida da células NK não deixando que morram.

• IL-12 e IFN-gama: ação citotóxica e estimula produção FNT-alfa.

ONTOGÊNESE T
Período intra-medular e
sanguíneo
Geração de diversidade
no TCR

Período intra-tímico
Seleção de repertórios
PROCESSOS DE SELECÇÃO DE LINFÓCITOS T NO TIMO
 ONTOGÊNESE B
❑ 05 genes de cadeia pesada
– Alfa
– Gama
– Delta
– Epsilon
– Mi
❑ 02 genes de cadeia leve
– Kappa
– Lambda
ONTOGÊNESE B
Duas etapas:
❑ Antígeno-independente
● Maturação
● Rearranjo gênico
❑ Antígeno-dependente
● Refinamento
● Resposta Humoral
 RESPOSTA ADQUIRIDA
CARACTERÍSTICAS

Diversidade
Especificidade
Memória
Autotolerância
Regulação homeostática
RESPOSTA IMUNE ANTI TUMOR
 IMUNOTERAPIA
INESPECÍFICA

 Citocinas – Interferon, IL-2, G-CSF

 Terapia celular – LAK

 IMUNOTERAPIA
ESPECÍFICA
 Anticorpos – anti-HER-2, anti- CD20, anti-VEGF, anti-EGFR;

 Vacinas –células tumorais, peptideos, células dendríticas.

OBRIGADA!
dahra.teles@gmail.com