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Constituição celular
Células Eucarióticas
Localização da informação genética na célula
• Existirá alguma relação entre o núcleo e o citoplasma?
Destacam-se:
• Experiências efetuadas por Hammerling e Brachet numa alga
marinha – a Acetabulária (1930-1940).
• Experiências efetuadas por Gurdon em anfíbios, em 1960.
Experiência de transplantação de núcleos em Acetabulária.
Conclusões:
• O núcleo é responsável pela vida e regeneração das porções
perdidas da Acetabulária (experiência 1).
• A regeneração das porções perdidas é comandada pelo núcleo
através de substâncias que este envia para o citoplasma
(experiência 2).
• É o núcleo que determina a forma do chapéu regenerado
(experiência 3).
Experiências efetuadas por Gurdon em anfíbios, em 1960
• Os animais usados foram sapos normais e girinos de sapos albinos. Estes
animais são ovíparos e a fecundação externa. As fêmeas põem óvulos e, sobre
eles, os machos lançam o esperma que os irá fecundar.
• Óvulos, postos por sapos normais, ou seja, com pele pigmentada, foram sujeitos
a radiações ultravioletas que lhes destruíram os núcleos. Em seguida, foram
transplantados, para esses óvulos anucleados, núcleos de células intestinais de
girinos descendentes de sapos albinos.
Essa informação
deveria ser
transmitida por uma
substância química
que ficou conhecida
por PRINCÍPIO
TRANSFORMANTE.
Crescimento, Renovação e Diferenciação Celular
Cabeça
do fago
cauda
DNA
100 nm
Parede celular
Localização do Material Genético
- Procariontes
Localização do Material Genético
- Eucariontes
Ácidos Nucleicos: Composição química
- DNA - RNA
(Ácido Desoxirribonucleico) (Ácido Ribonucleico)
Ácidos Nucleicos: Composição Química
Base azotada
Nucleósido
Grupo fosfato
(Ácido fosfórico)
Pentose
(um glícido com 5 carbonos)
Nucleótido
Ácidos Nucleicos: Composição Química
O Nucleótido:
Grupo Fosfato
Nucleótido
Bases
Adenina (A)
Timina (T)
Pentose
Guanina (G)
Citosina (C)
Ribose
Uracilo (U)
Desoxirribose
Ácidos Nucleicos: Composição Química
As Bases Azotadas
-Bases Azotadas:
- Bases Pirimídicas: São bases de anel simples timina, uracilo e
citosina;
- Bases Púricas: São bases de anel duplo: Adenina e Guanina.
Ácidos Nucleicos
Ligações no nucleótido:
DNA RNA
-As bases azotadas presentes nos nucleótidos do RNA são URACILO, ADENINA,
CITOSINA E GUANINA;
-As bases azotadas presentes nos nucleótidos do DNA são TIMINA, ADENINA,
CITOSINA E GUANINA;
Ácidos Nucleicos
O–
O 1’
N N
Timina (T)
4’ H H H
H H
2´ O
3´
H
O
H H
O P O CH2 N
O N
O– H H N H
H H N
Adenina (A)
N
H
H
O H H
O P O CH2 H N
H
O Citosina (C)
O– H H N N
H H
O
H
O
5´
O P O CH2 H N
O 1´ O
O– H H N
4´
H H
Fosfato 3´ 2´ N
N
H
OH
H Nucleótido de DNA
N
Desoxirribose H
H
Extremidade 3’
Guanina (G)
Estrutura do DNA
Analise com atenção a tabela que se segue e que se refere a análises químicas, realizadas
por Chargaff em diversas espécies de seres vivos:
CONCLUSÕES:
% de adenina = % de timina
% de citosina = % de guanina
% de C + G não é necessariamente igual à % de A + T
A+G/T+C~1
Watson e Crick deduziram que o DNA possuía uma estrutura em dupla hélice
através de observações de imagens cristalográficas de raios X
Estrutura do DNA
Modelo da Dupla Hélice de Watson e Crick
A
C
T
Em 1953, James Watson e
T A Francis Crick propuseram o
1 nm
G C
modelo de dupla hélice para o
C G
3.4 nm
DNA;
A T
C G
T A
-Segundo este modelo, a
T A molécula de DNA é composta
A T
A T
por duas cadeias
polinucleotídicas que se
A
G
T
C
0.34 nm dispõem em sentidos inversos:
(a) Estrutura do DNA (b) Modelo 3D antiparalelas.
Estrutura do DNA
CADEIAS
ANTIPARALELS
Estrutura do DNA
H
N N H O CH3
N N H N
pentose N N
O pentose
Adenina (A) Timina (T)
COMPLEMENTARIDADE DE BASES
H
N O H N
N N H N
pentose N N
N H O pentose
H
Guanina (G) Citosina (C)
Estrutura do DNA
RESUMO:
- Cada cadeia de nucleótidos apresenta nas extremidades uma ponta livre, uma
designada 3’ e a outra 5’. Cada cadeia desenvolve-se em sentidos opostos,
inicando-se na extremidade 5’ e terminando na extremidade 3’.
À extremidade 5’ de uma cadeia irá corresponder a extremidade 3’ da outra
cadeia: CADEIAS ANTIPARALELAS.
Citosina Guanina
Adenina Timina
Pentose: desoxirribose
Estrutura do DNA
Estrutura do RNA
38
Estrutura do RNA
RESUMO:
A molécula de RNA é uma cadeia simples, de dimensões muito
inferiores às da molécula do DNA.
Ribose
Base
Bases azotadas: A, G, C e U
(adenina, guanina, citosina e uracilo) Ligações
fosfodiéster
Grupo fosfato
Pentose: ribose
• RNA ribossómico
RNA (rRNA)
• RNA de transferência
não-codificantes (tRNA)
(ncRNA)
. Ribozimas
• RNA de interferência
(iRNA)
Estrutura e funções do RNA
Estrutura do RNA
Replicação – duplicação da
molécula de DNA, em que as
moléculas replicadas são iguais
à molécula original
RESULTADOS
Menos
3 Amostra de DNA 4 Amostra de DNA denso
centrifugada após 20 min centrifugada
(após a 1.ª replicação) após 40 min
(após a 2.ª
Mais
replicação)
denso
As bandas dos dois tubos de centrífuga representam os resultados da centrifugação das duas amostras de
DNA, uma retirada após 20 minutos e outra após 40 minutos.
Replicação do DNA
Que Hipótese é apoiada pelos resultados obtidos por Meselson e
Stahl?
MODELO CONSERVATIVO
MODELO DISPERSIVO
MODELO SEMICONSERVATIVO
Modelo
conservativo
Modelo
semiconservativo
Modelo
dispersivo
Replicação do DNA
Processo através do qual se obtêm cópias de DNA
Replicação do DNA
Mecanismo de replicação do DNA
• A replicação é
semiconservativa.
• Semiconservativa
• Bidirecional
• Semidescontínua
Síntese Proteica
Como é que a informação (as instruções) presente no DNA se
expressa, tornando-se efetiva?
- Procariontes - Eucariontes
NOTA: Entre a transcrição e a tradução, nos seres eucariontes, ocorre uma etapa
importante – processamento do RNA.
Transcrição: Visão global
A informação genética contida na molécula de DNA é copiada para
uma molécula de RNA: Transcrição
Exemplo:
3’ ATCCCAATGTG 5’ – DNA
Transcrição
5’ UAGGGUUACAC 3’ - mRNA
Tradução: Visão global
A informação do mRNA é utilizada para sintetizar proteínas:
TRADUÇÃO (com intervenção do tRNA e dos ribossomas).
Tradução
DNA
TRANSCRIÇÃO
mRNA
Ribossoma
TRADUÇÃO
Polipéptido
Síntese Proteica em Eucariontes
Membrana
nuclear
- A transcrição ocorre no
núcleo e a tradução ocorre TRANSCRIÇÃO DNA
no citoplasma. PROCESSAMENTO
Pré-mRNA
- O RNA transcrito é
mRNA
modificado antes de se
tornar mRNA funcional –
Ribossoma
processamento. TRADUÇÃO
Polipéptido
Síntese Proteica
Sabendo que...
Os Monómeros dos Ácidos Os Monómeros das
Nucleicos são os Proteínas são os
nucleótidos aminoácidos
O código genético
assenta numa
sequência de três
nucleótidos
consecutivos, os quais
formam um tripleto.
Código Genético
Gene 1
Gene 3
Cadeia de DNA 3’
5’
(molde) A C C T
A A A C C G A G
TRANSCRIÇÃO Codogene
U G G U U U G G C U C A
mRNA 5’ 3’
Codão
TRADUÇÃO
Aminoácido
70
• Um codão é um tripleto de mRNA que codifica um aminoácido
ou um sinal de iniciação ou de finalização.
RNA
polimerase
T C C A A
A
3’
3’
U
A U C C A
5’
T A G G T T
5’ Direcção da transcrição
Cadeia de
DNA molde
Cadeia de RNA 75
formada
Transcrição (continuação):
85
Tradução - intervenientes
Cada molécula de RNA de Transferência (tRNA) apresenta:
– Iniciação
– Alongamento
– Finalização
Etapas da Tradução: iniciação
Subunidade
maior do
Guanosina ribossoma
3’ 5’
UA C trifosfato
5’ A U G 3’
tRNA iniciador
GDP
GTP
mRNA
5’ 3’ 5’ 3’
Codão de iniciação
Subunidade
Local de ligação do mRNA
menor do
ribossoma
Etapas da Tradução: iniciação
GTP
Guanina
fosfatos Ribose
Etapas da Tradução: iniciação
INICIAÇÃO:
E
mRNA 3’
Ribossoma pronto para P A
o próximo aminoacil tRNA 5’
2 GTP
2 GDP
E E
P A P A
GDP
GTP
91 P A
Etapas da Tradução: alongamento
Alongamento:
Cadeia polipeptídica
5’
3’ 3’
3’
5’ 5’
Codão Stop
(UAG, UAA, ou UGA)
Etapas da Tradução: finalização
Finalização:
- O péptido é libertado.
Visão geral da tradução:
TRANSCRIÇÃO DNA
mRNA
Ribossoma
TRADUÇÃO
Polipéptido
Aminoácidos
Polipéptido
tRNA com um
aminoácido
Ribossoma
Gli
tRNA
Anticodão
A A A
U G G U U U G G C
5’ Codões 3’
mRNA
Características da Síntese Proteica
Cadeias
polipeptídicas
•Complexo
•Rápido
Ribossomas •Amplificado
mRNA
(Económico)
0.1 µm
Ribossoma
mRNA
Membrana do RE
Partícula de Proteína
reconhecimento
CITOSOL
LÚMEN
do RE
Alterações do material genético: Mutações
Mutações: São alterações no material genético da célula.
Mutações
Génicas Cromossómicas
Estruturais Numéricas
Alterações do material genético: Mutações
EFEITOS DAS MUTAÇÕES NA SÍNTESE PROTEICA
Mutação
génica é
uma alteração
na sequência
de nucleótidos
do DNA.
Alterações do material genético: Mutações
Mutação
Somática Germinativa
Afeta células
Afeta células somáticas
reprodutoras
Não é hereditária É hereditária
Sem efeitos evolutivos Com efeitos evolutivos
Alterações do material genético: Mutações
Alterações do material genético: Mutações
Exemplos:
mRNA A U G A A G U U U G G C U A A
5’ 3’
Proteína Met Lis Fen Gli
Stop
A U G A A G U U U G G U U A A
A U G A A G U U U A G U U A A
Sem sentido
substituição de A por U
A U G U A G U U U G G C U A A
Met
Stop
Alterações do material genético: Mutações
105
Alterações do material genético: Mutações
• A mudança de um nucleótido do DNA conduz à produção de
uma proteína anormal.
DNA DNA mutante
3’ 5’ 3’ 5’
C T T C A T
mRNA mRNA
G A A G U A
5’ 3’ 5’ 3’