Hematologia Clínico-Laboratorial – Prática

Bibliografia:
- Barbara J. Bain -> Células sanguíneas um guia prático

- Dacie and Lewis ; Barbara J. Bain -> Pratical Hematology (pdf)

- Isabel Silva Ribeiro -> Hematologia da prática clínica à teórica

- Hemoglobina 1/3 de Hematócrito

Ex. 15 hemoglobina; 45 hematócrito

- Aglotinados de células contam só como 1 no aparelho

- Se ↓ Glóbulos Vermelhos, ↓ hematócrito

- Processar a quente desaglotina as células e assim o aparelho já conta certo

- Se o tamanho dos Glóbulos Vermelhos é diferente  anemia por falta de ferro  >16

↓Ferro  ↓Heme

Novos -> micro… Anemia

Macro…

Dador de Sangue – não é falta de Fe

Azul -> acumulação de ferro

- Todos aumentados exceto linfócitos -> Leucemia Mieloide

- Grandes e complexos não é normal -> aglotinação de neutrófilos -> infeção viral

- Neutrófilos máximo mesmo -> 1.0 (1000)

- Basófilos é raro aparecer

T -> Orelhas de Mickey (prolongamentos)

Prolifocincatria ??

T CD8+ citotóxico -> mononucleose infeciosa -> infeção viral -> rebordo azul

(sopa e descanso; probemas hepáticos)

Prolinfócito B -> não pergunta

LCB -> >5000 linfócitos monoclonais -> leucemia linfocítica crónica

MBL -> <5000 linfócitos monoclonais -> monocitose clonal linfocítica não determinada ??

- Hematócrito
- Microhematócrito (é como tiramos o sangue para fazer o esfregasso)

- Azul -> nada ; Vermelho -> com heparina (anticoagulante natural) – sangue diretamente da pessoa

- Trombocitopenia -> ↓ plaquetas (< 150 000)

- Trombocitose -> ↑ plaquetas

- Trombocitémia ->

- Pseudotrombocitopenia de aglutinados de plaquetas (ex. induxida por EDTA, ex. má homogeneização)

-> Plaquetas aglutinadas – só acontece in vitro

-> Consegue-se desaglutinar, mas não desagregar (é diferente)

Plaquetas aglotinadas -> vê-se bem num esfregasso (morfologia)

- O aspirado de medula depois é colocado num frasco com EDTA

EDTA -> anticoagulante tri/di-potássico -> eleição para hemograma
-> Capacidade de manter a morfologia celular
Avaliação quantitativa (automático; dá
- ao contrário dos citritos e heparina valores) e qualitativa (esfregaço de
Sangue Periférico) dos elementos
fibrados do sangue (plaquetas, GV, GB)
Na coloração vê-se
um background

Citrato de Sódio e EDTA funcionam com o mesmo princípio – quelante de iões cálcio (quelante ≈ agarra)
– inibe a ação do cálcio – coagulação não ocorre

Chás – quelantes de Ferro (ex. Ice Tea, Chá preto, …)

Para ver a coagulação – adicionar fatores de coagulação – ex. Cálcio

Soro – não tem fatores de coagulação – porque não tem anticoagulante – ocorreu coagulação

Plasma – tem fatores de coagulação – porque tem anticoagulante

Sobrenadante

Se fizermos um “shake” – hemolisa

Hemoglobina glicada

Hemoglobina S

Anemia falciforme

Drepanocitose SC (hemoglobina)

SS

Esferocitose hereditária -> banda 3 - parece um cogumelo

Pincered Red Cells

 Hemograma:
- Colocamos as raquetes (que quando passam levantam a patilha)

- Colocamos uma raquete de stop – patilha para cima

 Só é hemograma quando validado

-> Ver sempre o caso dos aglotinados – ver nos gráficos e na morfologia

PCtest

- Vê-se aglotinados de plaquetas num esfregaço de sangue periférico quando feito a fresco (antes
de deixar secar) (vê-se as plaquetas a mover)

- Dadores temos que passar para um programa diferente / específico

Validações:
- Esfregaço:

1ª regra – 1/3 (hemoglobina/hematócrito) – Regra de Fátima

- Valor plaquetas:

Se plaquetas ↓, só podemos validar se pusermos alguma observação (sobre os aglotinados)

Quando é 0 - e ainda não tem fenótipo, temos que fazer “Weak D1” (D1 fraco) -> para ter a
certeza que é negativo

Objetiva 40 -> também é de emersão – vê-se melhor a amostra (em hematologia)

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Processo de Coloração Na aula -> 6/12min, porque

os corantes já estavam há 1
dia fora/ao ar
- Metanol puro (99,9%), nada de água senão não fixa -> 10 minutos

- May-Grunwald’s eosin -> 5 minutos

Sempre o
- Giemsan azul -> 10 minutos dobro do
tempo
No livro:

- Anticoagulantes
- Cap 2 – valores referência
- Técnicas Básicas: pág. 58 colorações – pág. 61 a coloração que vimos

Para diluir as células -> isotónico -> soro fisiológico -> Diluente

Corantes:

- Mostra estruturas citoplasmáticas e nucleares

-> Estruturas basófilas, acidófilas, neutras coram de diferente forma

- Vai dar folhas em português sobre coloração

Diluente

- Tem que ser como o soro fisiológico – [NaCl]=0,9% - isotónico -> senão as células rebentavam

Hipo – entra água na célula – fica túrgida [NaCl] ex. 0,45%

Hiper – sai água da célula – fica plasmolisada (encolhe)

Aparelho Hemograma
1º Contagem de GV e plaquetas

2º Destrói/Faz a lise dos GV completamente e o seu conteúdo é transformado num composto

estável que vai ser lido por espectofotometria

-> Absorvância desse composto é proporcional à hemoglobina

-> Hematócrito

-> Volume médio GV

-> Volume médio plaquetas

-> Plaquetócrito

Lise dos GV:

Ferrocianeto de potássio + cianeto de potássio -> Solução de Draping (cianetos letais, não CN free)
- Lisava GV e o feeocianeto potássio transformava hemoglobina em meta-hemoglobina (tratamento é com
o corante azul metileno que usamos na coloração)
- Meta-hemoglobina não é estável para lêr a absorvância, daí se juntar o cianeto de potássio
- Ciano-meta-hemoglobina
- Absorvância α Hemoglobina
3º Leucócitos – citometria de fluxo

↓ complexidade ↓ tamanho – linfócitos

↑ complexidade ± tamanho – neutrófilos, eosinófilos

± complexidade ↑ tamanho – monócitos

GV não lisados – são depois também contados como leucócitos (parecidos com linfócitos na
contagem) – basta um pouco que faz MUITA diferença porque os leucócitos são MUITO POUCOS

As células mais resistentes à lise são:

- GV alvo (target red cells) – porque praticamente só têm membrana e têm um reforço lipídico

- Células falciformes (/drepanócitos)

- Eritroblastos – o mais comum acontecer na rotina – geralmente acontece em pessoas que retiraram o baço

No Hemograma
NRBC – valor absoluto dos GV nucleados (eritroblastos)

NR/W – nº de eritroblastos / 100 leucócitos

WBC – nº total de leucócitos

Fórmula de Rodak -> quando o NR/W for >10, o valor de leucócitos corrigidos é

nº Leucócitos contados ( WBC ) ×100

100+ NR/W

Ex. (17,5 x 100) / (100 + 142) = 7,3 -> em vez de serem 17,5 leucócitos são apenas 7,3 (7300) – normal

-> Isto é por causa dos eritroblastos

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LNW-B manto / LLC / Tricoleucemia / Linfoma B difuso de grandes células -> saber dizer estas 3