Protdeos

A determinao de protdeos baseia-se na determinao de nitrognio, geralmente

feita pelo processo de digesto Kjeldahl. Este mtodo, idealizado em 1883, tem sofrido
numerosas modificaes e adaptaes, porem sempre se baseia em trs etapas: digesto,
destilao e titulao. A matria orgnica e decomposta e o nitrognio existente e
finalmente
transformado em amnia. Sendo o contedo de nitrognio das diferentes protenas
aproximadamente
16%, introduz-se o fator emprico 6,25 para transformar o numero de g de
nitrognio encontrado em numero de g de protdeos. Em alguns casos, emprega-se um
fator
diferenciado de 6,25, conforme descrito na Tabela 6. Amostras contendo nitratos
podem
perde-los durante a digesto. Nestes casos, deve-se adicionar acido saliclico ou fenol
(cerca de 1 g), os quais retm os nitratos, como nitroderivados. Procede-se ento a
digesto.
Digesto A matria orgnica existente na amostra e decomposta com acido sulfrico e
um
catalisador, onde o nitrognio e transformado em sal amoniacal.
Destilao A amnia e liberada do sal amoniacal pela reao com hidrxido e
recebida
numa soluo acida de volume e concentrao conhecidos.
Titulao Determina-se a quantidade de nitrognio presente na amostra titulando-se o
excesso do acido utilizado na destilao com hidrxido.


036/IV Protdeos Mtodo de Kjeldahl clssico
Material
Balana analtica, frascos de Kjeldahl de 500 a 800 ml, chapa eltrica ou manta
aquecedora,
Balo de destilao, frasco Erlenmeyer de 500 ml, bureta de 25 ml, esptula, papel de
seda, dedal e pipeta graduada de 25 ml ou pipetador automtico.
Reagentes
Acido sulfrico
Acido sulfrico 0,05 M
Sulfato de cobre
Sulfato de potssio
Dixido de titnio
Soluo fenolftalena
Vermelho de metila a 1% m/v
Zinco em p
Hidrxido de sdio a 30% m/v
Hidrxido de sdio 0,1 M
Mistura cataltico Dixido de titnio anidro, sulfato de cobre anidro e sulfato de
potssio.
Anidro, na proporo 0,3: 0,3: 6.
Procedimento Pese 1 g da amostra em papel de seda. Transfira para o balo de
Kjeldahl
(papel+amostra). Adicione 25 ml de acido sulfrico e cerca de 6 g da mistura cataltica.
Leve ao aquecimento em chapa eltrica, na capela, ate a soluo se tornar azul-
esverdeada e livre de material no digerido (pontos pretos). Aquea por mais uma hora.
Deixe esfriar.
Caso o laboratrio no disponha de sistema automtico de destilao, transfira
quantitativamente o material do balo para o frasco de destilao. Adicione 10 gotas do
indicador
Fenolftalena e 1 g de zinco em p (para ajudar a clivagem das molculas grandes de
protdeos).
Ligue imediatamente o balo ao conjunto de destilao. Mergulhe a extremidade afilada
do refrigerante em 25 ml de acido sulfrico 0,05 M, contido em frasco Erlenmeyer de
500 ml com 3 gotas do indicador vermelho de metila. Adicione ao frasco que contem a
amostra digerida, por meio de um funil com torneira, soluo de hidrxido de sdio a
30% ate garantir um ligeiro excesso de base. Aquea a ebulio e destile ate obter cerca
de
(250-300) ml do destilado. Titule o excesso de acido sulfrico 0,05 M com soluo de
hidrxido de sdio 0,1 M, usando vermelho de metila.
Clculo
Vx0,14xf/p=protdeos por cento m/m

V = diferena entre o no de ml de acido sulfrico 0,05 M e o no de ml de hidrxido de
sdio 0,1 M gastos na titulao
P = no de g da amostra
f = fator de converso (conforme Tabela 6)



037/IV Protdeos Mtodo de Kjeldahl modificado
Material
Balana analtica, frasco de Kjeldahl de 500 a 800 ml, chapa eltrica ou manta
aquecedora,
balo de destilao, frasco Erlenmeyer de 500 ml, buretas de 25 ml, esptula, papel de
seda, pipeta graduada de 25 ml ou pipetador automtico.
Reagentes
Acido sulfrico
Acido sulfrico 0,05 M
Acido brico 0,033 M
Sulfato de cobre
Sulfato de potssio
Dixido de titnio
Soluo de fenolftalena
Vermelho de metila a 1% m/v
Hidrxido de sdio a 30% m/v
IAL - 125
Procedimento Para a digesto da amostra, proceda conforme descrito em
036/IV. Na destilao, proceda tambm como em 036/IV, substituindo o acido sulfrico
0,05 M no frasco Erlenmeyer onde ser recolhida a amnia formada, por acido brico
0,033 M, que no reage diretamente, servindo apenas como suporte para adsoro da
amnia.
Titule diretamente a soluo de hidrxido de amnio com a soluo de acido sulfrico
0,05 M, utilizando o mesmo indicador do mtodo 036/IV.
Nota: alternativamente, poder ser utilizada uma soluo de acido clordrico 0,1 M em
substituio ao acido sulfrico 0,05 M.
Clculo
Vx0,14xf/p=protdeos por cento m/m

V = diferena entre o no de ml de acido sulfrico 0,05 M e o no de ml de hidrxido de
sdio 0,1 M gastos na titulao
P = no de g da amostra
f = fator de converso (conforme Tabela 6)