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A Atividade Enzimática da Amilase Salivar

e os fatores intervenientes

- Fundamentos Teóricos:
A amilase tem a função de degradar carboidratos e é produzida pleas glândulas parótidas e pelo pâncreas. A
α-amilase salivar ligada ao cálcio hidrolisa as ligações (1-4) das cadeias do amido, produzindo glicose,
maltose e oligossacarídeos. A quantidade dessa enzima é influencida por outros fatores, tais como estado de
hidratação, nível de estresse psicossocial e hábitos alimentares de curto prazo. A secreção da α-amilase
salivar é influenciada pela regulação adrenérgica do sistema nervoso simpático e pelo eixo hipotálamo-
pituitária-adrenal.
Ela també pode ter sua ação catalítica alterada por pH, temperatura e concentrações diferentes de substrato.

- Material e Metódo:
Os materais usados para a prática foram: um béquer, 4mL de saliva, 10mL de tampão fosfato 0,1M,
10 tubos de ensaio, amido 0,5%, 1 gota de lugol nos tubos, amido 2%, amido 5%, enzima, HCL
6M, NaOh 6M, acetona, detergente e bico de gás para ferver.
O método consistiu se em adicionar os materiais nos tubos de ensaio, agitando bem a solução no
tubo após adicionar algum reagente, esperar 5 minutos de reação para que a enzima se estabilizasse.
O lugol só era colocado por último na reação.

- Resultados Observados:
- Tubo 1: amido 0,5% e 1 gota de lugol e o resultado observado foi da cor verde.
- Tubo 2: amido 2% e 1 gota de lugol e o resultado observado quando colocou o lugol a cor amarela
e depois preto com fundo roxo.
- Tubo 3: amido 5% e 1 gota de lugol e o resultado observado foi a cor azulada/preta.
- Tubo 4: amido 0,5%, 1mL de enzima e 1 gota de lugol e o resultado observado foi amarelo com
um precipitado no fundo de cor marrom/avermelhada (-).
- Tubo 5: amido 2%, 1mL de HCL 6M, 1mL de enzima e 1 gota de lugol e o resultado observado foi
na cor preta, positivo e com a presença de amido.
- Tubo 6: amido 2%, 1mL de NaOH 6M, 1mL de enzima e 1 gota de lugol e ficou transparente e
com resultado negativo pois o NaOH desolubilizou o lugol.
- Tubo 7: amido 2%, 1mL de enzima fervida e 1 gota de lugol, o resultado foi negativo e a cor foi
branca com fundo vermelho/marrom.
- Tubo 8: amido 2%, acetona, 1mL de enzima e 1 gota de lugol, o resultado foi positivo e ficou
marrom/esverdeado.
- Tubo 9: amido 2%, detergente, 1mL de enzima e 1 gota de lugol, o resultado foi positivo e ficou
na cor preta.
- Tubo 10: 1mL de enzima e 1 gota de lugol, o resultado foi negativo e a cor observada foi
marrom/vermelha.
- Discussão e Interpretação dos Resultados:
A atividade da amilase pode ser medida pela quantidade de amido restante ou pela quantidade do
produto formado. A comprovação da presença de amido é feita utilizando-se lugol, que contém
iôdo. Pela mistura do amido com lugol, desenvolve-se uma coloração azul/preta que é devida a um
complexo instável constituído por amido, iôdo e água. As dextrinas dão coloração de roxa a
vermelha, dependendo da estrutura e da extensão molecular. Portanto, a coloração azul/preta indica
presença de amido, isto é, que a enzima não atuou. O lugol visa remediar as disfunções da tireoide
pois o iodo é importante para a sintese dos hormonios tireoidianos T3 e T4.
A enzima atua em pH entre 6,8 e 7,2.

- Conclusão:
Como a comprovação do amido é feita pela utilização do lugol que desenvolve uma cor
azulada/preta, os tubos que permaneceram dessa cor ainda contém o amido, o que significa que a
amilase salivar não atuou de modo efetivo nesses tubos. Isso pode ter acontecido por fatores como
alteração de pH já que é acostumada a trabalhar em pH 6,8 a 7,2, temperatura e pelo próprio
substrato. Pode ser também que não tivesse quantidade suficiente dela pois sua quantidade é
influenciada pela hidratação, nível de estresse psicossocial e habitos alimentares de curto prazo, por
exemplo.

- Referências:

http://sgcd.foa.unesp.br/home/departamentos/ciencias_basicas/2019--fatores-que-afetam-a-
atividade-enzimatica_alunos.pdf
http://sgcd.foa.unesp.br/home/departamentos/ciencias_basicas/2019-determinacao-da-atividade-da-
amilase-salivar.pdf

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