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Fungos e sua

importância ambiental
Dra. Lívia de Carvalho Fontes
Características gerais dos fungos

• Aeróbios ou anaeróbios dependendo das condições;


• PH ótimo para se desenvolver: próximo de 6.0;
• Possuem glicogênio como reserva energética;
• Possuem células especializadas (hifas) que formam uma
estrutura maior (micélio) ou se apresentam como
unicelulares;
• Não possuem tecidos verdadeiros.
Porque os fungos são importantes?
IMPORTÂNCIA ECOLÓGICA: Os fungos são degradadores da
natureza e sua principal importância está no fato de contribuírem
para a (re)ciclagem de nutrientes para o ambiente.

• Ciclos biogeoquímicos (ciclagem de C e nutrientes: sustentabilidade da vida na Terra);

• Seqüestro de carbono (imobilização no solo);

• Interações planta-microrganismos (simbioses);

• Fonte de recurso para a engenharia genética

• Degradação de substâncias xenobiontes;

• Controle biológico;

• Biorremediação.
Porque os fungos são importantes?

● Produção de metabólitos primários e secundários de importância industrial;

● Produção muitas vezes ocorre quando os nutrientes são limitados, mas há excesso de
carbono disponível. ex: penicilina, cefalosporinas, griseofulvina, ciclosporina,
alcalóides;

● Facilmente cultivadas em cultura de massa (indústria de bebidas alcoólicas);

● Fácil crescimento (produzir mutante, cruzamentos genéticos);

● Biologia molecular bem desenvolvida(transformação, substituição de genes, expressão


regulada, análise do genoma total de expressão, seqüências do genoma inteiro se
tornando disponíveis);

● Saccharomyces cerevisiae foi o primeira eucarioto a ter o genoma completo sequenciado


(1996), Neurospora crassa (2001), vários outros a partir daí.
Características importantes dos fungos
empregados em processos biotecnológicos:
• Crescer in vitro

• Crescer em larga escala

• Não ser fastidioso

• Crescer mesmo em condições sub-ótimas

• Ser de fácil manutenção

• Não ser patogênico

• Ser facilmente manipulável

• Ser geneticamente estável


Biologia

Biotecnologia

Engenharia Química
Fungos como elementos-chave nos
processos biotecnológicos

• Micologia Industrial: otimização de certas reações


para produção de compostos de interesse

• Biotecnologia: fungos normalmente geneticamente


modificados visando a produção de produtos que
normalmente não são capazes de produzir
Biotecnologia é
apenas transformação
genética ?
Biocombustíveis
Transformação
Alimentos genética
Tratamento
de efluentes Produção de compostos:
enzimas, antibióticos,
hormônios, vacinas, etc.
Alimentos, Bebidas, Suplementos e aditivos alimentares

1. Produtos derivados do leite por fermentação mediante bactérias lácticas (queijo, iogurte)
2. Bebidas alcoólicas (vinho, cerveja) e produtos de destilação de bebidas alcoólicas (brandy, whisky, vodka)
3. Pão e derivados
4. Vitaminas: ácido ascórbico (vitamina C), riboflavina, vitamina B12
5. Aminoácidos: ácido glutâmico, lisina, triptófano, glicina
6. Proteínas celulares (SCP, “single cell protein” como suplemento alimentar)
Produtos medicinais

1. Antibióticos
2. Proteínas reguladoras do metabolismo (hormona de crescimento, insulina)
3. Fatores de coagulação sanguínea
4. Proteínas e enzimas
5. Enzimas de restrição
6. Esteróis
7. Vacinas
Enzimas industriais

1. Enzimas hidrolíticas: proteases, lipases e celulases para detergentes. Amilases,


xilanases.
2. Glucose isomerase
Produtos químicos industriais

1. Alcoóis: Etanol e metanol


2. Acetona
3. Polissacarídeos
4. Combustíveis: etanol, metano, hidrogénio, propano, butano.
5. Matérias-primas para o fabrico de plásticos
Organização celular de fungos em Biotecnologia 

leveduras x fungos filamentosos

Produtos produzidos por Fungos


Produtos produzidos por
Filamentosos:
Leveduras:
- Antibióticos
- Cerveja
- Ácido cítrico
- Pão
-Acido fumárico
-Vinho (enologia)
- Vitaminas
- Saccharomyces bulardii
- Queijos
-Yakult
- Controle Biológico de pragas
- Bebidas destiladas (cachaça, wisky,
conhaque, saque, licor, etc..) -Enzimas:
- Etanol combustível - celulases
- Os modernos OGM - proteases
(organismos geneticamente modificados) - amilases
Metabólitos primários X Metabólitos secundários

• Comum a todos os organismos • Restrito a alguns organismos


• Metabólitos essenciais • Metabólitos não-essenciais
• Ocorre continuamente • Ocorre em fases específicas
• Funções vitais • Defesa e atração
• Não influenciado por fatores
externos
• Influenciado por fatores externos

• Baixa atividade biológica • Alta atividade biológica

• Bioquímica • Química de produtos naturais


Metabólitos primários X Metabólitos secundários
Produtos para a industria de
alimentos
• Leveduras como alimento e suplemento alimentar

• A grande maioria Saccharomyces cerevisiae

• Produzidas em tanques de fermentação (40 a 200 mil Litros)

• Levedura ativa desidratada: fermentos

• Levedura nutricional morta e seca: rica em vitamina B e


proteínas
Produtos para a indústria de
alimentos

• Fungos na produção de vinhos;

• Leveduras selvagens e cultivadas;

• Fermentadores de até 200 mil Litros;

• Vinho branco, tinto e rose.


Produtos para a indústria de
alimentos
• Fungos na produção de cervejas

• A partir de grãos maltados: grãos de cevada germinados (enzimas que digerem o amido convertendo-o em açúcar)

• Maceração dos grãos

• Cozimento (desativar enzimas, proteínas e aa

• Adição de lúpulo (aromatizante e antimicrobiano)

• Fervura para liberar ação do lúpulo e término da coagulação de proteínas

• Filtragem

• Resfriamento

• Fermentação: alta fermentação - levedura em todo o mosto (ales) - S. cerevisiae

• Fermentação: baixa fermentação - no fundo do tanque (cervejas claras - S. carlsbergensis

• Filtragem
Saccharomyces cerevisiae

Anaeróbio facultativo
Anaerobic respiration: produces alcohol
C6H12O6 --------------> 2C2H5OH + 2CO2 + 2 ATP

Aerobic respiration: major product is CO2


C6H12O6 --------------> 6 CO2 + 6 H2 + 38 ATP

•Um dos primeiros organismos explorados para biotecnologia


Produtos para a indústria de
alimentos
• Fungos na produção de bebidas alcoólicas destiladas

• Aquecimento do líquido fermentado com volatilização do álcool=álcool condensado via destilação

• Qualquer produto pode ser destilado gerando produtos distintos:

• Uísque: destilado de bebidas maltadas

• Conhaque: destilado de vinho

• Rum: destilado de melaço

• Vodca: destilado de grãos ou batata

• Gim:

• destilado de grãos de junípero

• Envelhecimento remove certos compostos da fermentação (sabeores indesejados) e confere coloração aos destilados
Produtos para a indústria de
alimentos

• Cogumelos comestíveis:

• Produção em locais de umidade e temperatura


controlados

• substratos orgânicos ricos


Produtos para a indústria
• Fungos na produção de etanol

• 50 bilhões de litros produzidos anualmente

• milho, cana de açúcar, trigo, beterraba, etc

• Saccharomyces, Kluyveromyces, Candida, etc

• Solvente industrial e suplemento de gasolina

• Composto energeticamente caro: necessita-se de 25% a mais de E


para produzir um litro de etanol do que a energia contida no
próprio etanol
Fermentadores industriais
• Fermentações em larga escala

• Tamanhos variados: poucos litros até 3 milhões de litros

• Divididos em:

• Aeróbios : mais complexos, com equipamentos que garantam a homogeinizaçao e aeração adequadas

• Necessidade de Difusão do oxigênio no liquido

• Necessidade de controle de pH, controle de O2, temperatura, massa celular, níveis de nutriente e
concentração do produto

• Automação do proceso

• Anaeróbios: mais simples, equipamentos para dissipação do calor produzido


Produtos para a indústria
farmaceutica
• Antibióticos

• 1941 - nenhuma indústria de antibióticos

• 1951 - 344 milhões de dólares por ano

• 1980 - 100.000 toneladas com vendas superiores a 1 bilhão de dólares por ano só nos EUA

• 2011 - 20 bilhões de dólares por ano

• Custo de produção de um antibiótico: 1,2 bilhões de dólares e cerca de 15 anos até a


comercialização
Produtos para a industria
farmacêutica
• Isolamento das cepas

• Testes de eficácia e ausência de toxicidade

• Seleção das linhagens mais produtivas

• Modificações genéticas (se necessário)

• Produção em grande escala (fermentadores)

• Extração dos compostos antimicrobianos

• Purificação
Alguns antimicrobianos
produzidos comercialmente
Produtos para a indústria
• Enzimas:

• catalisadores: aceleram atividades bioquímicas

• utilizadas como suplementos nutricionais

• amilases: adesivos, sucos, detergentes

• invertases (glicose a frutose): cremes, xaropes (refrigerantes)

• proteases: couro, seda, detergentes

• pectinases: sucos
Produtos para a industria
farmacêutica
• Vitaminas:

• A maioria é produzida quimicamente, mas muitas são tão


complexas e portanto produzidas apenas por microrganismos:

• B12: essencial a todos os animais

• essencial no sangue (hemácias)

• não é produzida por plantas

• Riboflavina: bactérias e fungos


Engenharia genética
• Produtos produzidos por células geneticamente modificadas *área da
biotecnologia de maior crescimento

• Insulina humana: primeiro biofarmacêutica produzido pela engenharia genética

• 1982 - produção nos EUA. E. coli com o gene humano para a produção de
insulina

• 1982 - Vacina contra Hepatite B

• Virus nao cultivável em laboratório - S. cerevisiae com o gene para a proteína


viral (antígeno)

• 1982 - Hormônio do crescimento humano - somatotropina - E. coli recombinate


Transformação genética de Saccharomyces cerevisiae

Desenho dos iniciadores específicos

Eletrodiluição
Preparo de Escherichia coli competentes (E. coli RR1)
Transformação de E.coli competentes
Extração dos vetores de E.coli por Mini-Prep
Digestão do plasmídeo de E.coli
Extração de pDNA de bactéria – Triton – prep
Transformação de leveduras

• Vetores YIp351 e YCp22


Transformação de Trichoderma sp. por Agrobacterium tumefasciens

Teste de sensibilidade das cepas de Trichoderma sp. frente à higromicina B


Cepas de A.tumefasciense vetor de transformação
Transformação genética de T. por A. tumefasciens
Controle biológico

Metarhizium anisopliae atacando Beauveria bassiana atacando


o inseto no estágio larval o inseto no estágio larval
Biomineraçao
• Redução das reservas mundiais;

• Exploração de minérios de baixa qualidade;

• Poluiçao causada pelos métodos tradicionais de extração;

• uso de microrganismos mineradores;

• ácidos oxidação do minério precipitação


Biorremediação

● Atenuação Natural In situ ou Ex situ


● Landfarming
● Lodo Ativado
● Bioaumentação
● Bioaeração

Remover poluentes antes


de atingir o ambiente
Remover ou reduzir resíduos
poluentes presentes no ambiente
Água e efluentes industriais
Microrganismos nas estações de tratamento de
esgoto e de efluentes industriais removem a
maior parte dos poluentes antes destes serem
lançados no mar.

Aumento da atividade industrial


aumentou necessidade de eliminar especificamente
poluentes como: compostos de fósforo, nitrogênio,
metais pesados e compostos a base de cloro

Biomassa produzida
pode servir para
outras aplicações
custos

Microrganismos produzidos são re-


utilizados como insumos de outras
industrias
(Ex: biomassa do Penicillium na produção
do antibiotico)
Obrigada

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