EXPERIMENTO 04: PRODUÇÃO DE ETANOL EM ESCALA LABORATORIAL

INTRODUÇÃO

A via fermentativa de produção de etanol a partir de cana-de-açúcar está baseada na atividade

metabólica das leveduras sobre uma matéria-prima rica em carboidratos fermentescíveis. As leveduras
fermentam na ausência de oxigênio (anaerobiose), degradando parcialmente a glicose em etanol e dióxido
de carbono. Frutas, cana-de-açúcar e melaços são as principais matérias-primas utilizadas na via
fermentativa para produção de etanol. No Brasil, o etanol é obtido principalmente por meio da
fermentação de açúcares e cereais (por isso, é chamado muitas vezes de “álcool de cereais”).
Majoritariamente sendo produzido somente pela fermentação da cana-de-açúcar, onde a taxa de
produção para cerca de 1 tonelada de cana é de 70 litros de etanol. Obs: o teor sacarose do caldo de cana
é de 14,5% a 23%.

OBJETIVOS

 Produzir etanol em escala laboratorial a partir da fermentação com a levedura Sacharomyces

cerevisiae.
 Quantificar e avaliar o etanol produzido e o consumo da sacarose do caldo de cana.
 Avaliar a importância da concentração de açúcar (sacarose) na fermentação alcoólica.

MATERIAIS E REAGENTES

 Água mineral autoclavada • Caldo de cana • Provetas de 50 e 100 mL

• Balança analítica • Chapa de aquecimento • Refratômetro
• Balão de fundo redondo • Espátula • Sacarose (açúcar cristal)
(fermentadores) • Leverdura (fermento) • Suporte de madeira para
• Béqueres de 100 e 600 mL • Incubadora o balão
• Bexigas • pHmetro calibrado • Turbidímetro calibrado

PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL

1° dia: Montar o experimento como indicado na tabela a seguir.

Tabela 1. Design experimental da produção de etanol com variação da concentração de açúcar.

FERMENTADOR ÁGUA (mL) GARAPA (mL) SACAROSE FERMENTO (g)

1 0 100
2 20
3 30
4 40
5 50
6 60
7 70
8 80
9 90
10 100
0 0,5
80 0 0,5
70 0 0,5
60 0 0,5
50 0 0,5
40 0 0,5
30 0 0,5
20 0 0,5
10 0 0,5
0 100 g 0,5
1. Pesar a sacarose e diluir no volume adequado de água mineral autoclavada em um béquer. Equipes
que trabalharão com garapa, fazer a diluição direto no béquer.
2. Aquecer a diluição até fervura (100 °C) e resfriar a 25º/30ºC. Medir pH e anotar. pH =
______________
3. Medir a turbidez da diluição em frasco limpo e desinfetado com álcool e anotar: ____________ NTU
4. Transferir o volume para o balão de fundo redondo limpo e desinfetado e acrescentar
cuidadosamente a massa de fermento (levedura).
5. Homogeneizar e pesar os fermentadores. Anotar Massa inicial do fermentador: Mi = _________ g
6. Colocar a bexiga (COM CUIDADO PARA NÃO RASGAR) receptora de gás na boca da garrafa.
7. Observar e anotar o aspecto geral do material no interior do fermentador (cor, partículas, aspecto,
etc).
8. Incubar no Laboratório de Fermentação à 30ºC por 24 horas.

2° dia: Avaliação dos fermentadores e coleta de alíquota para análises

9. Após o período de incubação, observar a formação de gás na bexiga e se há ocorrência de qualquer

alteração no fermentador (turbidez, bolhas, grumos, cor, aspecto etc). Comparar com as anotações
do dia anterior.
10. Pesar novamente e calcular a relação entre a massa final do fermentador (Mf) e a Massa inicial do
mesmo (Mi). Esta relação representa a diminuição relativa da massa do fermentador ao longo do
experimento e se expressa como:
Mf Mi ( g )
( % )=( ) x 100
Mi Mf (g)
11. Homogeneizar o fermentador, retirar a bexiga e proceder análises do etanol produzido.
12. Medir do fermentado: pH, turbidez, índice de refração e grau Brix.
13. Observar leveduras ao microscópio e fazer comparação qualitativa do crescimento.

RELATÓRIO – INSTRUÇÕES

 Entregar 1 por dupla após 1 semana de término do experimento

Introdução: explicar a fermentação alcóolica (inclusive reação bioquímica) e condições ambientais
necessárias para que ocorra a produção de etanol.
Objetivos – colocar conforme roteiro
Materiais – colocar apenas qual tipo de matéria prima utilizada pelo grupo) e alguma modificação
eventual do roteiro NÃO precisa copiar o roteiro de aula.
Resultados: - colocar de forma organizada e clara os resultados de toda a turma, NÃO SOMENTE O SEU! Se
colocar fotos, selecionar apenas as boas fotos, que mostrem algo relevante e colocar legenda e autor da
foto.
Discussão: explicar os resultados, foram os esperados? Se algo deu diferente do esperado, explicar
também.
Referências bibliográficas: LIVROS e ARTIGOS e não apenas da internet
Entregar via Teams: canal DPPS, pasta Relatórios – Fermentação.