UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ

DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E BIOLOGIA MOLECULAR

INTRODUÇÃO A BIOQUÍMICA

PROTEÍNAS

Profa. Daniele Sousa

 PLANO DE AULA
Contéudo
Ligação peptídica
Níveis estruturais da proteínas
Desnaturação e renaturação de proteínas
Funções biológicas das proteínas
Proteínas alostéricas - Hemoglobina
 PROTEÍNAS
•Diversidade de formas e funções
LIGAÇÃO PEPTÍDICA
PROTEÍNAS
LIGAÇÃO PEPTÍDICA
PROTEÍNAS
LIGAÇÃO PEPTÍDICA
PROTEÍNAS
 PEPTÍDEOS
PROTEÍNAS
São compostos formados pela união de poucos
aminoácidos através de ligações peptídicas.
 PROTEÍNAS
São formadas pela união de muitos aminoácidos
através de ligações peptídicas.
PROTEÍNAS
 PROTEÍNAS
Podem conter outros grupos químicos além dos
aminoácidos – Proteínas conjugadas

• Lipoproteínas
• Glicoproteínas
• Fosfoproteínas
Grupo
prostético
• Hemoproteínas
• Metaloproteínas
PROTEÍNAS
 ESTRUTURA
TRIDIMENSIONAL
•Proteínas globulares

•Proteínas fibrosas

Fibrosas Globulares
 ESTRUTURA
TRIDIMENSIONAL
•Proteínas integrais de membrana
NÍVEIS ESTRUTURAIS DAS
PROTEÍNAS
 NÍVEL PRIMÁRIO

Descreve a sequência de aminoácidos ao longo da

cadeia polipeptídica.

Depende das ligações peptídicas

 NÍVEL PRIMÁRIO

Composição  Sequencia

Leu – Gly – Thr – Val – Arg – Asp – His

Val – His – Asp – Leu – Gly – Arg – Thr

 NÍVEL PRIMÁRIO

A estrutura primária de uma

proteína determina sua
estrutura tridimensional
 NÍVEL PRIMÁRIO
Substituição de um aminoácido por
Substituição conservativa
outro de polaridade semelhante.

Substituição não-conservativa Substituição de um aminoácido por

outro de polaridade diferente.

Aminoácidos que são regularmente

Aminoácidos invariantes encontrados na mesma posição.
Possuem papel essencial na estrutura
ou função da proteína.
 NÍVEL SECUNDÁRIO

Descreve as estruturas regulares tridimensionais formadas

por segmentos da cadeia polipeptídica.
NÍVEL SECUNDÁRIO
α-hélice
NÍVEL SECUNDÁRIO
 NÍVEL SECUNDÁRIO

• Ligações de hidrogênio
ocorrem entre os grupamentos
das unidades peptídicas.

• As cadeias laterais não

participam das ligações de H

• Nem todas as seqüências de

aminoácidos podem formar α-
hélice

α-hélice
 NÍVEL SECUNDÁRIO

Restrições que influenciam a estabilidade

de uma -hélice:
•Tendência intrínseca de um resíduo de aminoácido de
formar -hélice;

•Resíduos de prolina e glicina;

•Interações entre os grupos R adjacentes;

•Volume dos grupos R adjacentes (Asn, Ser, Thr, Cys);

•Interações entre os resíduos de aminoácidos das

extremidades do segmento helicoidal e o dipolo elétrico
da -hélice.
 NÍVEL SECUNDÁRIO

Folha-β • Também mantidas por

ligações de H entre
unidades peptídicas

• Ligações entre unidades

peptídicas próximas ou
distantes. Também podem
estar em cadeias diferentes.

• Cadeias com conformação

mais distendida
NÍVEL SECUNDÁRIO
 NÍVEL SECUNDÁRIO

O que pode limitar a formação de folhas ?

• Grupos R dos resíduos de aminoácidos muito volumosos.

Normalmente as estruturas em folha beta são ricas em aminoácidos
com grupos R pouco volumosos como Gly e Ala.
NÍVEL SECUNDÁRIO
NÍVEL SECUNDÁRIO
 NÍVEL TERCIÁRIO

Descreve o dobramento final da cadeia polipeptídica por

interação de regiões com estrutura regular ou de regiões
sem estrutura definida.

OBS - A estrutura primária de uma proteína determina a sua estrutura

terciária
 NÍVEL TERCIÁRIO

Nesse nível de organização, as cadeias laterais dos

aminoácidos irão interagir através de ligações fracas (não-
covalentes) permitindo que segmentos distantes da
estrutura primária aproximem-se.

• Ligações de H
•Interações hidrofóbicas
•Ligações iônicas

Interação covalente por ponte dissulfeto (-S-S-)

também pode ocorrer em algumas proteínas
NÍVEL TERCIÁRIO
 NÍVEL QUATERNÁRIO

Quaternária – descreve a estrutura protéica que ocorre

quando a proteína possui mais de duas subunidades.

trímero tetrâmero hexâmero

 NÍVEL QUATERNÁRIO
Estabilização da estrutura quaternária
 NÍVEL QUATERNÁRIO

Exemplos de proteínas com estrutura quaternária

 NÍVEL QUATERNÁRIO

Exemplos de proteínas com estrutura quaternária

CONFORMAÇÃO NATIVA DAS
PROTEÍNAS

É o arranjo espacial FINAL dos

átomos em uma proteína.

Geralmente uma proteína apresenta poucas alterações

de sua conformação sob condições biológicas.
CONFORMAÇÃO NATIVA DAS
PROTEÍNAS

Quando a proteína encontra-se em

qualquer das suas conformações
funcionais (biológicas)
CONFORMAÇÃO NATIVA DAS
PROTEÍNAS
O que contribui para a manutenção
da estabilidade da conformação
nativa da proteína?

Interações fracas (principalmente) e

ligações dissulfeto (existentes
apenas em algumas proteínas)
DESNATURAÇÃO DAS PROTEÍNAS

• Proteína nativa - conformação mais estável que a

molécula pode assumir

• Proteína desnaturada - Qdo sua conformação

nativa é destruída devido a quebra de ligações não-
covalentes e/ou ligações dissulfeto.
DESNATURAÇÃO DAS PROTEÍNAS
DESNATURAÇÃO DAS PROTEÍNAS

Agentes desnaturantes

• Calor
• Ácidos e álcalis fortes
• Adição de solventes orgânicos polares
•Adição de detergentes
 FUNÇÕES DAS PROTEÍNAS

A estrutura tridimensional está

relacionada à função da proteína.
 FUNÇÕES DAS PROTEÍNAS

• Função enzimática (catalisadores biológicos)

Ex – Lipases, tripsina,
quimotripsina

• Função hormonal

Ex – Insulina
 FUNÇÕES DAS PROTEÍNAS

• Função estrutural - sustentação dos tecidos

conjuntivo e muscular, da pele, dos cabelos e das
unhas

Ex – colágeno, queratina
 FUNÇÕES DAS PROTEÍNAS

• Função de defesa

Anticorpos - Imunoglobulinas
 FUNÇÕES DAS PROTEÍNAS

• Função de defesa

Defesa de plantas contra fungos, bactérias, insetos,

nematóides, etc.
 FUNÇÕES DAS PROTEÍNAS

• Função motora - Proteínas

responsáveis pelo transporte intracelular
e pela motilidade do sistema contrátil
muscular.

• Actina
• Miosina
• Tubulina
• Cinesina
 FUNÇÕES DAS PROTEÍNAS

• Função de transporte – Carreiam substâncias através

de membranas ou através do sangue.

Proteínas de membrana
 HEMOGLOBINA

Proteínas que se ligam ao oxigênio

• MIOGLOBINA – Tem a função principal de

armazenar oxigênio nos músculos de mamíferos.

• HEMOGLOBINA – Tem a função de

transportar oxigênio do sangue para os tecidos.
 HEMOGLOBINA
PROTEÍNAS

HEMOGLOBINA MIOGLOBINA
4 cadeias (2α e 2β) 1 cadeia
Liga-se a 4 moléculas de O Liga-se a 1 molécula de O
HEMOGLOBINA
 HEMOGLOBINA
PROTEÍNAS
A hemoglobina é uma proteína alostérica

Proteínas alostéricas são aquelas na qual a

interação com um ligante em um sítio da
proteína afeta as propriedades de ligação de
outro sítio na mesma proteína.

Moduladores – Inibidores ou ativadores

HEMOGLOBINA

Grupo Heme
HEMOGLOBINA

Grupo Heme
HEMOGLOBINA
 HEMOGLOBINA

Estado T Estado R

Menor afinidade Maior afinidade

pelo O2 pelo O2
HEMOGLOBINA
PROTEÍNAS
 HEMOGLOBINA
Efeito do H+ e CO2

•Produtos da respiração celular (CO2 + H2O);

•Afetam a afinidade da Hb pelo O2

•Efeito Bohr

OBS: O O2 e H+ não são ligados nos mesmos

sítios na Hb.
HEMOGLOBINA
Efeito do H+
Trabalhando com
Proteínas
 Trabalhando com proteínas

•Isolamento e purificação de proteínas:

– Etapa 1 – Extração

– Etapa 2 – Fracionamento

– Etapa 3 - Caracterização
 Trabalhando com proteínas

•Isolamento e purificação de proteínas:

– Etapa 1 – Extração Tecidos ou células

– Etapa 2 – Fracionamento

– Etapa 3 - Caracterização
 Trabalhando com proteínas

•Isolamento e purificação de proteínas:

– Etapa 1 – Extração
Técnicas baseadas nas
diferenças de:
– Etapa 2 – Fracionamento
Carga
– Etapa 3 - Caracterização
Solubilidade (pH,
temperatura, concentração
de sal etc)

Tamanho
 Trabalhando com proteínas

•Isolamento e purificação de proteínas:

– Etapa 1 – Extração
Determinação de:

– Etapa 2 – Fracionamento pI

– Etapa 3 - Caracterização Massa molecular

Modificações pós-
traducionais

Estrutura primária,
secundária, terciária etc
 Trabalhando com proteínas

•Cromatografia
 Cromatografia de Troca Iônica

•Separação baseada nas

diferenças de cargas
 Cromatografia de Troca Iônica

•Cromatograma
 Cromatografia de exclusão molecular

•Separação baseada nas

diferenças de massas
moleculares (tamanhos)
 Cromatografia de afinidade

•Separação baseada nas

especificidades de
interação existente entre
algumas biomoléculas
Eletroforese
Eletroforese
 Focalização Isoelétrica

•Determinação do pI
 Eletroforese Bidimensional

•Primeiramente uma separação

baseada nas diferenças de pI

•Posteriormente uma separação

baseada nas diferenças de
massa molecular (tamanho)
Proteínas como biofármacos
Proteínas como biofármacos
Proteínas como biofármacos
Proteínas como biofármacos