UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ

CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE

DEPARTAMENTO DE NUTRIÇÃO
DISCIPLINA: ESTÁGIO SUPERVISIONADO
EM CIÊNCIA DOS ALIMENTOS

ANÁLISE
MICROBIOLOGICA -
CAJUÍNA
Larissa Prado Leal

TERESINA - 2021
PARÂMETROS
‐ Coliformes a 31º C – Coliformes
totais

‐ Coliformes a 41ºC – Coliformes

termotolerantes

‐ Fungos e Leveduras
Análise realizada no dia:
27/10/2021
Cálculos e pesagem para
inicio das análises
CÁLCULOS PARA INICIO DAS ANÁLISES
Diluições:
225 ml de água peptonada – 25g de amostra
10 tubos falcon de 9 ml de água peptonada – 90 ml de água
peptonada.
225 ml + 90 ml = 315 ml de água peptonada
1g ---- 1000 ml água destilada
X ---- 315 ml
X = 0,13 g de água peptonada

Imagem ilustrativa
CÁLCULOS PARA INICIO DAS ANÁLISES
Lauril:
9 tubos – 10 ml = 90 ml  120ml de lauril
35,6 ---- 1000 ml de água destilada
X ------ 120 ml
X = 4,27 g de Lauril
DRBC:
150 ml  6 placas (25 ml – 1 placa)
31,5 ---- 1000 ml água destilada
Imagem ilustrativa
X ------- 150 ml X = 4, 73 g de DRBC
PESAGEM PARA INICIO DAS ANÁLISES
Água peptonada:
0,13 g + 315 ml de água destilada
Lauril:
4,27 g + 120 ml de água destilada
DRBC:
Imagens ilustrativas
4, 73 g + 150 ml de água destilada
Preparação dos meios
PREPARAÇÃO DOS MEIOS 10-¹ 10-² 10-³

Água peptonada

Depois de misturada por

completo foi distribuída nos
tubos falcon e no frasco de
vidro.

Em seguida foi embrulhado a 225 ml 9 ml em cada

tampa do frasco e amarrado
com fita. Depois foi etiquetado
e nomeado para ir para
autoclave.
 PREPARAÇÃO DOS MEIOS
10-¹ 10-² 10-³

Lauril
Depois de misturar bem o
lauril foi distribuído nos 9
tubos de ensaio, e foi
adicionado o tubo de
durhan para em seguida
retirar o ar dele.

Tampados com algodão e

colocados no balde junto com
os tubos falcon. Em seguida o
10 ml em cada
balde foi tampado, amarrado
com fita, etiquetado e nomeado
para ir para autoclave.
 PREPARAÇÃO DOS MEIOS

DRBC

Depois de adicionado o DRBC

no balão e misturado bem, foi
levado ao microondas ate ferver.
E esperado esfriar um pouco
para poder tampar, embrulhar,
amarrar com a fita, etiquetar e
nomear para ir a autoclave.

Imagem ilustrativa
Realização das análises
REALIZAÇÃO DAS ANÁLISES
10-² 10-³

Antes de começar as análises os

tubos falcon, tubos de ensaio,
frasco e placas de petri foram
nomeados.
REALIZAÇÃO DAS ANÁLISES
As mãos foram higienizadas com
álcool antes de começar as analises.
Primeiramente foi medido 25 ml da
cajuína com a ajuda de uma pipeta
de 10 ml e um pipetador para ser
adicionado ao frasco com 225 ml de
água peptonada para fazer a diluição
inicial de 10-¹ .
25 ml
Depois de feita a diluição 10-¹,
usando uma pipeta e uma ponteira
foi tirado 1 ml para adicionar a 3
tubos de ensaio contendo lauril com
a numeração de 1 a 3 e também foi
adicionado 1 ml ao tubo falcon para
fazer a diluição 10-².
1 ml
 REALIZAÇÃO DAS ANÁLISES

Com a diluição 10-², foi tirado 1 ml

para adicionar aos 3 tubos de
ensaio com a numeração de 4 a 6
e também ao tubo falcon
correspondente a diluição 10-³.

1 ml
 REALIZAÇÃO DAS ANÁLISES
Com a diluição 10-³, foi tirado 1 ml
para adicionar aos 3 tubos de
ensaio com a numeração de 7 a 9.
Por fim, foi colocado o lauril com a
amostra na estufa de 35ºC por 24-
48h.

1 ml
 REALIZAÇÃO DAS ANÁLISES

No meio de cultura DRBC foi

adicionado 6 ml de um inibidor
(antibiótico) para ter apenas o
crescimento de fungos e
leveduras.

6 ml
Em seguida, foi adicionado
aproximadamente 25 ml do meio
de cultura nas 6 placas de petri +
2 placas para o controle.
 REALIZAÇÃO DAS ANÁLISES

Após o meio solidificar, foi adicionado

0,1 ml das diluições 10-¹, 10-² e 10-³
nas placas, para fazer o
plaqueamento de superfice.

Iniciou-se pela diluição 10-³ por ser a

menos contaminada, em seguida a
10-² e por fim a 10-¹.

Imagem ilustrativa
 REALIZAÇÃO DAS ANÁLISES

Após as amostras serem adicionadas

ao meio de cultura nas placas de
petri, foi feito o plaqueamento de
superfice com o auxilio da alça de
Drigalski.

Primeiro a alça foi passada no álcool

e em seguida foi esterelizada no bico
de busen. Esse processo foi repetido
durante o plaqueamento das demais
placas.
 REALIZAÇÃO DAS ANÁLISES
Foi esperado a alça esfriar para
depois ela ser levemente arrastada
por todo o meio de cultura espalhando
bem a amostra. Com movimentos de
vai e vem e girando a placa para a
alça passar por onde ainda não tinha
alcançado.

Por fim, as 6 placas foram embaladas

com papel filme e levadas a estufa de
25ºC. Os 2 controles foram
embalados isoladamente e também
levados a estufa de 25ºC.
Resultados
RESULTADOS

Parâmetros Resultados Padrão

Col. à 35ºC <3,0 10,00 NMP/g

Col. à 45ºC <3,0 500 NMP/g

Fungos e leveduras --------------------------------- 5x10³ UFC/g

OBRIGADA PELA ATENÇÃO!
 ANÁLISE
MICROBIOLOGICA -
CAJUÍNA

Larissa Prado Leal