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FORMAÇÃO CONTINUADA
NO LABORATÓRIO CLÍNICO
Clínica Ed Cont Lab; 28:112-135

CITOLOGIA E BIOQUÍMICA DE LÍQUIDOS


BIOLÓGICOS.
Ana Merino.

Serviço de Bioquímica Clínica e Genética Molecular. Centro de Diagnóstico Biomédico. Hospital Clínico
de Barcelona.

José Luis Marín.

Serviço de Bioquímica Clínica e Genética Molecular. Centro de Diagnóstico Biomédico. Hospital Clínico
de Barcelona.

INTRODUÇÃO

Os fluidos serosos são fluidos corporais derivados do plasma e são encontrados nas cavidades pleural, pericárdica
e peritoneal. Essas cavidades corporais são delimitadas por uma membrana serosa parietal e visceral, que são
formadas por uma camada de tecido conjuntivo com numerosos capilares, vasos linfáticos e uma camada
superficial de células mesoteliais. Os fluidos serosos são ultrafiltrados do plasma e se formam na rica rede capilar
da membrana serosa. Sua formação é semelhante à do líquido extravascular em qualquer outra parte do corpo e
envolve pressão hidrostática, pressão coloidosmótica e permeabilidade capilar. Em condições normais existe uma
pequena quantidade de líquido em cada uma dessas cavidades corporais que permite o movimento das vísceras em
cada um desses espaços potenciais. Um complexo sistema de dinâmica de fluidos regula o volume do líquido.
Quando os mecanismos fisiológicos responsáveis pela formação ou absorção do líquido seroso estão alterados,
ocorre um aumento excessivo do mesmo. Dessa forma, o líquido se acumula quando a permeabilidade capilar
aumenta, quando a pressão hidrostática aumenta, quando a pressão coloidosmótica diminui ou quando a drenagem
linfática é obstruída (Figura 1).

Classicamente, com base em seu conteúdo protéico, os fluidos serosos são diferenciados em transuídicos e
exsudados. Essa distinção é fundamental para sua classificação etiopatogênica e para a seleção
de grandezas bioquímicas, cujo estudo proporcionará maior eficiência diagnóstica.
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Citologia e bioquímica de fluidos biológicos A. Merino, JL Marin

Figura 1: Hidrostática, pressão coloidosmótica e permeabilidade capilar.

Os transudatos são líquidos não inflamatórios que se originam da alteração de fatores sistêmicos que afetam o
formação ou reabsorção de fluido (pressão hidrostática ou coloidosmótica). Exsudatos são fluidos inflamatórios

cuja formação depende do aumento da permeabilidade capilar devido a alterações que afetam diretamente
as estruturas superficiais de certas cavidades corporais: mesotélio, vasos linfáticos e capilares.

A diferenciação entre transudatos e exsudatos é baseada em níveis arbitrários de quantidades bioquímicas que foram
determinado empiricamente. Nos últimos anos, a medição de outras grandezas foi introduzida, além do

concentração de proteína, para avaliar a etiopatogenia do aumento de fluidos em diferentes espaços “virtuais”.

O estudo dos fluidos biológicos serosos fornece informações importantes sobre a fisiopatologia dos órgãos e

tecidos a partir dos quais são gerados e a seleção e proposta de grandezas devidamente validadas é uma função
do laboratório, com boa capacidade de discriminação cidadã, pelo que este estudo fornece informações
decisivo sobre sua prática
consultório.

Devido às características da amostra, o estudo inicial de fluidos serosos deve ser feito imediatamente, para

que estudará as magnitudes cuja medição deve ser realizada com urgência. Posteriormente, o estudo do líquido

Pode ser completado com aquelas magnitudes que fornecem novos dados que explicam a etiologia do

ralo.

LÍQUIDO PLEURAL
Em condições normais, o espaço pleural contém de 1 a 10 ml de líquido. Um volume de líquido pleural que

pode ser detectado radiologicamente (aproximadamente 100 mL) é considerado patológico. O derrame pleural é definido
como o acúmulo patológico de líquido no espaço pleural e é o resultado de um desequilíbrio entre a massa e

reabsorção de líquido neste nível. Na maioria das vezes é produzido por

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doença pleural ou pulmonar, mas é uma manifestação comum da doença


sistêmico

A amostra para estudo é obtida por toracocentese. Usando esta técnica, o fluido é obtido para estudo
ou evacuação para fins terapêuticos.
Uma vez obtida a amostra, esta deve ser imediatamente separada em diferentes tubos para
contagem de células, estudo bioquímico, microbiológico e patológico, sendo obrigatório recolher a
alíquota para estudo microbiológico em recipiente estéril. Para medição do pH, a amostra deve ser
mantida em condições anaeróbias e levada ao laboratório no mesmo frasco de extração. O estudo do
líquido deve ser feito o mais rápido possível, sendo aconselhável analisá-lo nas primeiras duas horas
após sua obtenção.

O principal objetivo no estudo do líquido pleural é diferenciar entre transudato e exsudato.

O primeiro critério seguido para a diferenciação foi o teor de menos ou mais de 3 gr/
dl de proteínas em líquido. Com esse critério, 90% dos derrames pleurais foram bem classificados.
Para melhorar a classificação em 1972, o Dr. Light, usando as concentrações de lactato
desidrogenase (LDH) e proteínas, observou que poderia classificar corretamente 99% de todos os
derrames como exsudatos ou transudatos e postulou o que é conhecido como critério de Light.
Se atender a esses critérios, o derramamento é
considerado como um exsudato:

1) Razão proteína de derrame pleural/proteína plasmática > 0,5 2) Razão


derrame pleural LDH/LDH plasmática > 0,6 3) LDH derrame pleural > 2/3 do
LDH plasmático.

Existem outras substâncias que foram investigadas mais profundamente para tentar uma separação
mais exata. Entre eles estão as magnitudes que aparecem na Tabela 1.

Tabela 1: Critérios bioquímicos para diferenciar exsudato e transudato no líquido pleural.

traduzido exsudado

LDH LDH / Plasma LDH <0,6 > 0,6

< 2/3 valor acima da faixa > 2/3 valor acima do


LDH líquido pleural
de referência em dinheiro intervalo de referência no soro

Proteínas Líquidas / Proteínas Plasmáticas <0,5 > 0,5

Bilirrubina líquida / bilirrubina plasmática <0,6 > 0,6

Colesterol líquido / colesterol plasmático <0,3 > 0,3

Albumina líquida - albumina plasmática > 12g/L < 12g/L

Se o derrame pleural for transudado, não são necessários mais estudos bioquímicos. Se, por outro
lado, o derrame pleural for um exsudato, sua etiologia deve ser investigada (Tabelas 2 e 3). Para isso,
serão estudadas as seguintes grandezas: aparência do líquido, concentração de

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eritrócitos e leucócitos, percentual diferencial de leucócitos, concentração de glicose,


atividade catalítica da ÿ-amilase e pH.

• Aspecto macroscópico do líquido: é sempre aconselhável informar sobre a cor e


turbidez da amostra (Tabela 2). A maioria dos transudatos e muitos exsudatos são claros ou
de cor pálida, não são viscosos ou inodoros, e qualquer desvio deve ser investigado. Se o
fluido for hemorrágico, um hematócrito deve ser realizado para descartar a existência de um
hemotórax. Se a presença de sangue for decorrente de toracocentese, o grau de coloração
durante a aspiração não será uniforme, observando-se aumento progressivo durante a coleta
de fluido.

Tabela 2: Características macroscópicas dos fluidos serosos.

turbidez Cor

amarelo claro
claro ou transparente

turbina
amarelo alaranjado

purulento verde amarelo

Hemático
opalescente ou leitoso

quiloso hemorrágico

• Contagem de hemácias: pode ser realizada em câmara hematocitométrica (Neubauer,


Burker ou Thoma) ou em um contador automático de hematologia, dependendo
da concentração de eritrócitos e do limite de detecção do instrumento. Se o fluido for
hemorrágico (concentração de glóbulos vermelhos maior que 100.000 células/mm3), seu
hematócrito deve ser medido. Se for superior a 50% do hematócrito do sangue periférico, é
diagnóstico de hemotórax. O líquido hemorrágico sugere a presença de neoplasia, trauma
ou embolização pulmonar.

• Contagem de leucócitos: a maioria dos exsudatos tem concentração inferior a 1.000 leucócitos/
mm3, enquanto a maioria dos exsudatos é superior a 1.000 leucócitos/mm3. Nos derrames
parapneumônicos são comuns concentrações acima de 10.000 leucócitos/mm3. Se o número
de leucócitos for superior a 50.000/mm3
pense em pancreatite ou embolia pulmonar.

• Porcentagem diferencial de leucócitos: deve ser realizada quando a concentração é


superior a 250 leucócitos/mm3 por exame microscópico de esfregaços celulares corados
com May Grünwald-Giemsa. A Tabela 3 contém a predominância da cepa leucocitária de
acordo com a fisiopatologia do AVC.

• A concentração de glicose no líquido pleural é decisiva no diagnóstico


diferencial de derrames pleurais exsudativos (Tabela 4). Uma concentração de glicose inferior
a 60 mg/dL resulta em uma das seguintes etiologias: tuberculose, neoplasia, artrite reumatoide
ou derrame parapneumônico. Se a concentração de glicose fosse inferior a 40 mg/dl em um
acidente vascular cerebral parapneumônico, minha evacuação torácica seria indicada.
Nas neoplasias, a glicose baixa indica um grande número de células neoplásicas.

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físico e maior probabilidade de obter citologia positiva. Na artrite reumatoide, a baixa


glicose ocorre devido a um bloqueio da própria passagem do sangue para o espaço pleural.

Tabela 3: Causas de derrame pleural com:

neutrofilia eosinofilia linfocitose

parapneumônico hemotórax tuberculose


abscesso subfrênico pneumotórax quilotórax
tromboembolismo infarto pulmonar Neoplasias
pancreatite toracocentese prévia linfomas
tuberculose em estágio inicial Parasitoses (doença hidática, áscaris, amebas) sarcoidose

Lúpus eritematoso sistêmico Infecções fúngicas (histoplasmose) pleurisia reumatóide crônica

derrame pleural de amianto drogas


derrame pleural maligno pleurisia do amianto

linfoma de Hodgkin
Doenças do colágeno (síndrome de Churg
Strauss)
idiopático

Tabela 4: Causas de derrame pleural com baixas concentrações de glicose no fluido


Artrite reumatóide

parapneumônico complicado
empiema
derrame pleural maligno
pleurisia tuberculosa

ruptura esofágica

• Uma concentração de ÿ-amilase no líquido pleural superior ao limite superior do intervalo


de referência em sua amostra sugere doença pancreática, neoplasia ou ruptura esofágica.

• A medida do pH do líquido pleural é útil no diagnóstico diferencial de exsudatos (Tabela 5). No


caso de derrame parapneumônico, um pH menor que 7,10 é uma indicação de drenagem. Nos
derrames pleurais transudativos, o pH geralmente é maior que o pH arterial. O pH baixo nas
neoplasias está relacionado ao número de células e ao prognóstico. No hemotórax também é
baixa devido ao consumo de glicose pelas hemácias com a consequente produção de lactato
e diminuição do pH. Os urinotoráceos também podem ter um pH baixo. Nos transudatos, o pH
do líquido pleural pode ser maior que o do sangue devido ao transporte ativo de CO3H- do
sangue para o espaço pleural.

Tabela 5: Causas de derrame pleural com pH menor que 7,30.

parapneumônico complicado
empiema
tuberculose

Neoplasias
ruptura esofágica
Artrite reumatóide
acidose sistêmica
hemotórax

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• Para completar o diagnóstico etiológico dos derrames pleurais, além da coloração de


Gram, realiza-se cultura microbiológica e estudo anatomopatológico, sendo úteis outros
exames que podem ser realizados posteriormente, pois é necessário preservar uma
quantidade adequada de líquido para sua realização. entre eles sim
achar:

• A concentração de adenosina desaminase (ADA): esta enzima é necessária para a


diferenciação das células linfóides e está envolvida na maturação dos monócitos.

macrófagos A determinação de ADA é útil no diagnóstico de tuberculose.


Observou-se que valores maiores que 45 U/L apresentam sensibilidade de 97%.
Também foi encontrado elevado em empiemas, linfomas, leucemias, mesoteliomas e acidentes.
cerebrovascular maligno.

• A concentração de triglicerídeos: sua determinação é útil para o diagnóstico de quilotórax,


quando estiver acima de 110 mg/dl ou presença de quilomícrons.

• A concentração de colesterol é usada para classificar exsudatos e transudatos (em


exsudados é superior a 60 mg/dl).

• Outros: marcadores tumorais, complemento, fator reumatóide, estudo


análise imunocitométrica de linfócitos, anticorpos antinucleares, etc.

As patologias mais frequentes que causam derrames, transudatos e exsudatos encontram-se nas
Tabelas 6 e 7.
Tabela 6: Causas de transudatos.

freqüente pouco frequente

Insuficiência cardíaca congestiva Obstrução da Veia Cava Superior

cirrose urinotórax

síndrome nefrótica
embolia pulmonar

sarcoidose
diálise peritoneal

glomerulonefrite hipoalbuminemia

Tabela 7: Causas de exsudatos.

derrame pleural induzido por derrame pleural após


Doença Neoplásica Doenças do Colágeno
drogas: da cirurgia
metastático Artrite reumatóide Nitrofurantoína abscesso subfrênico

mesotelioma dantrolene
Lúpus eritematoso sistêmico Cirurgia abdominal
doenças infecciosas febre familiar mediterrânea síndrome de lesão
metisergida
Infecções bacterianas
Síndrome de Churg-Strauss bromocriptina cartão postal
tuberculose amiodarona
síndrome de Sjogren Transplante de fígado

Infecções fúngicas, parasitas sarcoidose de Wegener granulomatose procarbazina transplante de pulmão


metotrexato
e vírus Yatrogen
amiloidose
embolia pulmonar Drogas que induzem doença pericárdica
doença uremia
síndrome de meigs lúpus eritematoso
sistêmico
gastrointestinal Radioterapia exposição ao amianto

doença pancreática fígado, abscesso


esclerose varicosa
esplênico

perfuração esofágica

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líquido pericárdico
O pericárdio é um saco fibrosseroso que envolve completamente o coração, separando-o de órgãos e estruturas vizinhas. O

interesse pelas pericardiopatias justifica-se exclusiva e fundamentalmente pelo grave comprometimento hemodinâmico de

algumas afecções pericárdicas (bloqueio cardíaco, feridas

pericárdicas, etc.) e, secundariamente, pelos problemas de diagnóstico diferencial dessas pericardiopatias com outras

condições comumente tratadas em médio prazo (infarto agudo do miocárdio (IAM), tromboembolismo pulmonar (TEP),

insuficiência cardíaca crônica (ICC). ), etc).

O pericárdio é formado por duas camadas, uma visceral (também chamada de epicárdio) intimamente ligada

à superfície do coração, e um parietal separado do anterior por uma seção de espaço capilar que contém entre 15 e 50 ml

de líquido pericárdico. Este contém 138 ± 4 mmol/L de Sódio, 4,5 ± 1 mmol/


L de Potássio, 109 ± 5 mmol/L de Cloro, 25 ± 6 mmol/L de Bicarbonato, 3,1 ± 0,6 gr/dL de proteínas e

um pH de 7,57 ± 0,11. O espécime para estudo é obtido por pericardiocentese, com aspiração do líquido por seringa

heparinizada e separação imediata em diferentes tubos, conforme descrito anteriormente para o líquido pleural, desde que o

volume do derrame o permita.

O estudo do líquido pericárdico inclui:

• Aspecto macroscópico do líquido (Tabela 2): O líquido pericárdico normal é transparente e de

cor amarelo claro. Uma aparência hemorrágica sugere qualquer uma das seguintes etiologias:

Pericardite hemorrágica idiopática, síndrome de Dressler, síndrome pós-pericardiectomia, pericardite

tuberculosa, artrite reumatoide, lúpus eritematoso sistêmico, carcinoma metastático,

pericardite bacteriana, pericardite urêmica e aneurisma roto.

• Contagem de leucócitos: sua medição é realizada de forma semelhante à descrita para o

líquido pleural.

• Diferenciação de leucócitos: deve ser realizada quando a concentração for superior a


250 leucócitos/mm3.

• A concentração de glicose inferior a 40 mg/dL pode estar associada à pericardite bacteriana,

tuberculose, artrite reumatoide e neoplasias.

• Contagem de glóbulos vermelhos, concentração de proteínas e pH não fornecem informações


de interesse.

líquido ascítico
O peritônio é uma camada lisa formada por células mesoteliais, com superfície semelhante à superfície da pele (1,7 m2). Ele

procura a cavidade abdominal e se dobra sobre si mesmo para cobrir as vísceras abdominais.

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Em condições normais, contém menos de 50 ml. de líquido: estéril, amarelo pálido, com

as seguintes características:

• Densidade inferior a 1016; proteínas menores que 25 gr/L (principalmente albumina) e células menores que
250 células/mm3 , principalmente macrófagos e linfócitos, alguns eosinófilos

e células mesoteliais.

O peritônio comporta-se como uma barreira passiva, semipermeável à difusão da água e da maioria dos solutos, com
superfície de troca de 1 m2. O líquido peritoneal é produzido pela ultrafiltração do plasma na cavidade peritoneal. Quando
ultrapassa 25 mL e aumenta

É progressivamente denominada ascite, que se define como o acúmulo de líquido na cavidade abdominal e é uma
complicação muito comum em pacientes com cirrose hepática avançada. O seu aparecimento implica uma melhoria do
prognóstico, com diminuição da probabilidade de sobrevivência
por ano de 90% em pacientes cirróticos compensados, até 50-70% em pacientes cirróticos
com ascite.

A obtenção do espécime para estudo é feita por paracentese abdominal, sendo as condições de coleta e
transporte as citadas acima para o líquido pleural.

Até poucos anos atrás, o líquido ascítico era classificado como exsudato se a concentração de proteína fosse

maior que 25 g/L. Numerosos estudos mostraram que o concepto transferido para o exsudato é de pouca utilidade.

A relação entre a concentração de albumina no soro e a de albumina no líquido ascítico fornece uma melhor
classificação diagnóstica de ascite do que a concentração de proteína, razão pela qual alguns especialistas consideram
que os termos "dado transudato" e "exsudato" devem ser substituídos. na descrição da ascite, por “alto gradiente de
albumina” e “baixo gradiente de albumina” respectivamente.

Para obter uma boa relação custo-benefício no estudo do líquido ascítico, este deve ser realizado em duas

etapas: 1) estudo inicial e 2) estudo complementar, baseado nos resultados do estudo inicial. Como a maioria das amostras
provém de pacientes com ascite cirrótica não complicada, estudos adicionais geralmente não são necessários.

O estudo inicial deve incluir: a) aparência, b) concentração de eritrócitos, c) concentração e porcentagem diferencial de
leucócitos, d) concentração de albumina no líquido ascítico e no soro ey) cultura.
Dependendo dos resultados obtidos e/ou da orientação diagnóstica, este estudo inicial também pode incluir: f) concentração
de proteínas, g) concentração de glicose em ascite e soro, h) atividade da lactato desidrogenase em ascite e soro, i) atividade
de ÿ-amilase em ascite e soro e j) coloração de Gram.

a) Aspecto macroscópico do líquido. A aparência normal é transparente, amarela e de cor clara. Uma aparência
turva ou purulenta indica a presença de leucócitos abundantes.
Concentrações superiores a 50.000 leucócitos/mm3 conferem ao líquido uma aparência purulenta.

Uma concentração de triglicerídeos maior que 100 mg/dL dá ao fluido uma aparência opalescente, com concentrações
maiores que 200 mg/dL confiam nisso.

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Eles têm uma aparência leitosa. A aparência hemorrágica pode ser decorrente de punção
traumática, carcinoma hepatocelular ou carcinomatose peritoneal. A coloração esverdeada pode ser
observada em casos de patologias que envolvem contaminação do fluido por bile.

b) Contagem de glóbulos vermelhos. Concentração de glóbulos vermelhos maior que 20.000/mm3 com
aspecto hemorrágico do líquido.

c) Contagem e percentual diferencial de leucócitos. Na ascite cirrótica não complicada, a concentração de


leucócitos é inferior a 250 leucócitos/mm3. Quando a concentração

se for maior, a diferenciação celular deve ser realizada por exame microscópico.
A causa mais comum de aumento de neutrófilos (>250 neutrófilos/mm3) é a peritonite bacteriana
espontânea.

d) Gradiente de albumina: é a diferença entre a concentração de albumina no líquido ascítico e a


concentração de albumina no soro. As amostras devem ser obtidas simultaneamente. A utilidade do
gradiente de albumina é baseada no conceito de equilíbrio oncótico-hidrostático. A diferença entre a
albumina no suor e no líquido ascítico é muito grande em pacientes com hipertensão portal. Se for superior
a 11 g/L sugere a presença de hipertensão portal com 90% de probabilidade. Quanto maior esse gradiente,
maior a hipertensão portal. Se, por outro lado, esse gradiente for menor que 11 g/L, o paciente não tem
hipertensão portal com 90% de probabilidade.

O gradiente de albumina permite classificar, com eficiência de 95%, a ascite associada ou


não à hipertensão portal.

e) Cultivo. 10% das ascites cirróticas têm maior concentração de neutrófilos


a 250 células/mm3. É devido ao estabelecimento de peritonite bacteriana espontânea que requer tratamento
com antibióticos.

f) Concentração de proteínas. É utilizado para o diagnóstico diferencial entre peritonite


perfuração bacteriana e intestinal espontânea. Uma concentração de proteína superior a 100 g/L aponta
para o diagnóstico de perfuração intestinal na ascite.

g) Concentração de glicose. No líquido ascítico da cirrose não complicada, o


concentração de glicose é semelhante à do suor. A concentração de glicose diminuiu
moderadamente na peritonite bacteriana espontânea e mais acentuadamente na perfuração intestinal.

h) Razão de lactato desidrogenase (LDH). Na ascite cirrótica não complicada, o


coeficiente entre a medida da concentração catalítica de lactato desidrogenase no líquido ascítico e no
soro é de 0,40 ± 0,20. Na peritonite bacteriana espontânea esse coeficiente aumenta para 0,85 ± 0,29. Um
coeficiente maior que 1 indica produção ou liberação de enzimas na cavidade peritoneal, geralmente devido
a infecção ou neoplasia. Uma concentração catalítica de lactato desidrogenase no líquido ascítico maior que
o limite superior da faixa de referência no suor é outro critério diagnóstico para perfuração intestinal.

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i) Proporção de amilase. A relação entre medir a concentração de ÿ-amilase no fluido


ascite e sangue na cirrose não complicada é de 0,44 ± 0,33. Quando a origem da ascite é pancreática,
esse coeficiente aumenta para 5,59 ± 0,02.

Outros testes que podem ser realizados de forma diferente são úteis para completar o diagnóstico etiológico
do líquido ascítico, incluindo: coloração e cultura de micobactérias, concentração de triglicerídeos, concentração
de bilirrubina no líquido ascítico e no soro e marcadores tumorais.

LÍQUIDO ESPINHAL CEREBRAL (LCR)

O líquido cefalorraquidiano "banha" o cérebro e a medula espinhal e suas principais funções são
seguintes funções:

• Fornecer suporte físico e proteção ao Sistema Nervoso Central (SNC).

• Amortecer as mudanças de aceleração do cérebro em relação às estruturas


ossos.

• Controlar o ambiente químico do SNC: pH, íons, proteínas, carboidratos, etc.

• Atuar como veículo de excreção de produtos da atividade metabólica dos cereais.


bral.

• Efectuar o transporte de algumas hormonas e neurotransmissores.

A análise do LCR é essencial para o diagnóstico de processos patológicos relacionados a


cérebro, medula espinhal e meninges, bem como os processos hemorrágicos produzidos nas cavidades
que eles contêm.

As meninges são três membranas que recobrem o Sistema Nervoso Central (Figura 2) e são divididas em
dois grupos:

• Paquimeninges: espessas, duras e fibrosas ÿ DURA MADRE, a camada mais externa.

• Leptomeninges: meninges moles ÿ ARACNOIDES e PIAMAR, as mais internas.

Figura 2: Membranas que recobrem o Sistema Nervoso Central.

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O LCR é produzido pelo plexo coróide e reabsorvido pelos véus aracnóideos.


qualquer desequilíbrio entre essas duas funções causa patologias graves no paciente que as sofre.

O volume do LCR em adultos é de aproximadamente 150 mL; um de 20 ml fica nos ventrículos, outro de 60 ml nas cisternas
subaracnóideas e os 70 ml restantes no canal vertebral. Em recém-nascidos, o volume total de LCR varia de 10 a 60 ml. A
taxa de treinamento em adultos é de 500 ml/dia ou 20 ml/hora. A secreção de LCR pelo plexo coróide depende
principalmente do transporte ativo de íons sódio através das células epiteliais de revestimento. Os íons de sódio, por sua
vez, carregam os íons de cloro devido às suas cargas opostas; esses dois íons aumentam a quantidade de substância
osmótica cloreto de sódio no LCR, o que determina a passagem quase imediata de água pela membrana, constituindo a
secreção do líquido.

Outras substâncias como glicose, íon potássio, íon bicarbonato, proteínas, etc. (Tabela 8) eles se difundem para o
LCR atingindo concentrações semelhantes às do plasma, embora seus mecanismos de transporte (difusão passiva e
ativa, gradiente de concentração, etc.) requeiram várias horas para encontrar o equilíbrio. Drogas lipossolúveis, incluindo
anestésicos e álcool etílico, difundem-se do plasma para o LCR com base em sua lipossolubilidade.

A reabsorção do LCR ocorre nas vilosidades aracnóideas. Estas são "projeções" microscópicas semelhantes a
dedos da membrana aracnóide que se enterram nas paredes dos seios venosos. Os conglomerados dessas
vilosidades formam estruturas macroscópicas denominadas granulações aracnoides, que se desprendem dentro dos seios
venosos.

O LCR é submetido a uma pressão média de 130 mm H2O (equivalente a 10 mmHg), embora possa variar entre 50 e
180 em uma pessoa saudável. A pressão sobe para tossir, sentar, chorar, fazer esforços, etc.

Punção lombar (PL):

A técnica de extração do LCR para posterior análise é a punção lombar. É realizada no nível das vértebras L4-L5 ou

abaixo para evitar lesões na medula espinhal, pois termina entre D12 e L1. As indicações mais frequentes para a
realização de PL são:

1.- Suspeita de meningite, encefalite, abscesso cerebral, hemorragia subaracnóidea, leucemia com envolvimento do
SNC, esclerose múltipla, síndrome de Guillén-Barré e tumores medulares.

2.- Diagnóstico diferencial de infarto cerebral com hemorragia intracerebral, onde o LCR é xantocrômico em 80%
dos casos.

3.- Introdução de anestésicos, meios de contraste radiográficos ou certas drogas.

A LP de emergência deve ser indicada em pacientes com suspeita de meningite, hemorragia subaracnóidea ou
leucemia com envolvimento do SNC. Na maioria das outras situações, a LP é um procedimento eletivo.

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A realização da LP não está isenta de problemas e complicações, sendo as mais frequentes:


1) emaranhamento do cerebelo ou tonsilas cerebelares em pacientes com hipertensão
intracraniana; 2) hematoma extradural ou subdural; 3) a perfuração das meninges pode
favorecer o desenvolvimento de meningite e 4) a morte por sufocamento pode ocorrer em
recém-nascidos.

Tabela 8: Concentrações no LCR e no soro de seus principais constituintes.

líquido cefalorraquidiano SÉRUM

Proteínas:
15-45mg/dl 2-7 60-80g/L
pré-albumina % 56-76 % 2-7 ÿÿÿÿ

Albumina % 8-18 % 3-12 52-67

% 2-5
globulina ÿ
8-16
globulina ÿ
10-22
globulina ÿ

eletrólitos:
Sódio 135-145
135-145 mEq/l
Potássio 3,5-5
2,6-3 mEq/l
cloretos 96-104
118-130 mEq/l
Bicarbonato de sódio 21-26
20-25 mEq/l
cálcio 4.6-5-4
2,1-2,7 mEq/l

Magnésio 2,4-3 mEq/l 10-22 1,5-2,4


lactato 3-7
mg/dl 280-295 mosm/
osmolalidade l 280-295

pH e gases:
pH 7.28-7.32 7.35-7.40
36-40
pCO2 44-50mmHg
95-100
pO2 40-44mmHg

Outros constituintes:
amônia 100-200
50-100 µg/dl
creatinina 0,5-1,2
0,5-1,2 µg/dl
glicose 70-110
50-80 mg/dl 1-2
irmão 50-150
µg/dl 1,2-2 mg/
Combine 3-4,5
dl 6-16 mg/dl
ureia 8-20
0,5-3 mg/dl
Ácido úrico 2-8

EXAME DO LCR:
Exame macroscópico (Tabela 9): O LCR normal é cristalino, transparente, incolor, inodoro e
com uma viscosidade comparável à da água (descrita como água de rocha). Também pode se
manifestar em processos crônicos e em processos agudos com baixo conteúdo celular:
poliomielite, encefalite, meningite viral e muitos casos de meningite tuberculosa ou sifilítica.

Porém, o LCR, em decorrência de diversas patologias, pode apresentar outros aspectos


quando o observamos no recipiente coletor. Esses aspectos podemos

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troncos como: turvos, fumados, endurecidos, xantocrómicos, opalescentes, hemáticos, hemorrágicos,


etc.

LCR nublado pode ser causado pela presença de:

-Leucócitos: é necessário um mínimo de 200 células/mm3 para causar uma ligeira turbulência
bidé.

-Glóbulos vermelhos: pelo menos 400 células/mm3 são necessárias para produzir turbidez.

- Microrganismos (bactérias, fungos, etc.).

- Meios de contraste radiológico.

Tabela 9: Características macroscópicas do LCR.

turbidez Cor

cristalino/transparente Incolor (água de rocha)

Nublado / defumado / empanado Xantocrômico (laranja/amarelo)

purulento
Avermelhado (hemático)

opalescente ou leitoso hemorrágico

Líquido hemático/hemorrágico: A presença de sangue levanta o problema de distinguir entre uma punção traumática e
sangramento patológico de hemorragia subaracnoide espontânea, hemorragia intracerebral ou trauma. Este diagnóstico
diferencial deve ser baseado no seguinte:

a) Observações na cabeça do paciente; supõe-se que uma punção traumática apresenta


liberação gradual à medida que várias amostras são coletadas. Prova dos três tubos: consiste na coleta
do LCR extraído entre três tubos sucessivos; se o sangramento for causado por punção, a coloração diminui
ou desaparece da primeira vez para zero; se for propriamente hemorrágico, a coloração se mantém com a
mesma intensidade nos três tubos.

b) Coagulação: um líquido muito sanguinolento (mais de 200.000 glóbulos vermelhos/mm3) devido a uma
a punção traumática coagulará em repouso, enquanto o sangue de uma hemorragia subaracnóidea
não coagulará "in vitro".

c) Xantocromia: Xantocromia refere-se a uma cor rosa pálido, laranja ou amarelo do


sobrenadante de LCR centrifugado. Em amostras de trauma, o sobrenadante é claro, enquanto na hemorragia
subaracnóidea eu digo que o sobrenadante é geralmente xantocrômico se os glóbulos vermelhos estiverem
presentes no LCR por tempo suficiente para causar sulise. A lise dos eritrócitos no LCR começa de 1 a 4 horas
de permanência nele. Essa lise de eritrócitos no LCR não é causada por uma diferença osmótica entre o plasma
e o LCR, porque a osmolaridade de ambos os fluidos é essencialmente a mesma. A lise de eritrócitos no LCR
provavelmente se deve à ausência

de proteínas plasmáticas e lipídios necessários para estabilizar a membrana eritrocitária. por


todo o mundo

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O teste de xantocromia requer centrifugação do LCR pelo menos uma hora após a coleta para
evitar resultados falsos positivos.
Resumindo, podemos dizer que a xantocromia surge entre 2 e 4 horas após uma
hemorragia subaracnóidea, com predominância de tons rosa pálido ou laranja pálido; então,
12 horas após a hemorragia, aparece uma coloração amarela que atinge sua intensidade
máxima entre 24 e 36 horas e desaparece gradualmente entre 4 e 8 dias, embora possa estar
presente por até 4 semanas. Em algumas ocasiões, pode-se observar "falsa xantocromia"
produzida pela bilirrubina plasmática (bilirrubinorraquia) quando a concentração nela excede 5
mg/dl, e muito excepcionalmente devido à contaminação do LCR pelo mertiolato usado para
desinfetar a pele ou pela presença de carotenóides no LCR por hipercarotenemia sistêmica,
melanina por melanossarcoma nas meninges, etc.

A xantocromia em prematuros saudáveis pode ocorrer como resultado dos efeitos combinados de
uma barreira hematoencefálica imatura e concentrações fisiologicamente altas de bilirrubina e
proteína no sangue.

EXAME BIOQUÍMICO:
Glicose: A glicose entra no LCR a partir do plasma por dois mecanismos diferentes: difusão passiva
e transporte ativo. A concentração de glicose no LCR de adultos saudáveis é de aproximadamente
60-70% da concentração sérica, o que equivale a 50-80 mg/dl.
Devido a esta estreita correlação com a glicemia, é conveniente medir ambas as concentrações
simultaneamente.

A elevação da glicose no LCR (hiperglicorraquia) constitui risco de hiperglicemia entre duas e


quatro horas antes da PL e está relacionada ao diabetes melito e outras condições do paciente
que dela padece.

A diminuição da concentração de glicose no LCR pode ser decorrente de deficiência no


mecanismo de transporte ativo, aumento da utilização de glicose pelo SNC, tecidos, leucócitos,
eritrócitos, microorganismos ou existência de hipoglicemia prolongada.
A diminuição da glicose em pacientes com meningite bacteriana é de aproximadamente 50%.

Proteínas: As proteínas normalmente se difundem do plasma para o LCR através da barreira


hematoencefálica e como a maioria das proteínas séricas também estão presentes no LCR, incluindo
fibrinogênio e lipoproteínas em baixas concentrações, a proteína com maior presença no LCR é a
albumina A concentração de as proteínas no LCR variam ligeiramente com a idade, embora durante o
período neonatal a concentração seja muito maior (30-140 mg/dl), em adultos jovens sua concentração
cai para 15-45 mg/dl.

O aumento da concentração de proteína no LCR pode ser consequência de:

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a) aumento da permeabilidade da barreira hematoencefálica devido à inflamação: menina


gitis, etc.

b) Obstrução da circulação liquórica: traumas, tumores, etc.

c) aumento da síntese de proteínas no SNC: tumores, etc.

d) degeneração tecidual: esclerose múltipla, síndrome de Guillén-Barré, etc.

e) acidentes vasculares: hemorragia, trombose, embolia cerebral, etc.

f) punção traumática.

A diminuição da concentração de proteína no LCR abaixo de 15 mg/dL pode ser devida a:

a) Vazamento de LCR devido a ruptura dural causada por trauma ou pré PL


via, ou uma rinorréia ou otorréia do LCR.

b) aumento da pressão intracraniana que pode levar ao aumento da filtração do LCR


através das microvilosidades aracnóideas.

Enzimas: Muitas enzimas diferentes foram medidas no LCR, embora atualmente apenas LDH e ADA sejam clinicamente
úteis.

• Lactato desidrogenase (LDH): a concentração de LDH no LCR tem pelo menos três origens: a) difusão passiva da
LDH plasmática através da barreira hematoencefálica; b) difusão do
SNC através da barreira cérebro-líquor, pois o tecido cerebral é muito rico em LDH e uma lesão neste nível
liberaria grande quantidade da enzima e c) a terceira fonte de LDH no LCR provém dos elementos Células que
são afetados no isto: leucócitos, bactérias e células tumorais. o
O valor clínico fundamental da determinação do LDH no LCR reside no estabelecimento do diagnóstico diferencial
entre meningite bacteriana e viral, já que na primeira está elevado em quase 90% dos casos. No entanto, níveis
elevados de LDH na meningite viral parecem ser
relacionados a um quadro de encefalite e têm prognóstico ruim.

• Adenosina deaminase (ADA): Como mencionado acima, esta enzima é essencial

A cesariana devido à diferenciação de macrófagos e ao aumento de sua concentração no LCR em mais de 10 U/


L, está relacionada ao diagnóstico de meningite tuberculosa.

REGISTRO CELULAR E INDICAÇÕES PARA ANÁLISE CITOLÓGICA


EM UM LÍQUIDO BIOLÓGICO:

A contagem de glóbulos vermelhos e células nucleadas em fluidos biológicos, e quando sua concentração é
estiver abaixo dos limites de detecção do autoanalisador, é realizada em uma câmara com células sanguíneas
(hemocitômetro). O modelo mais utilizado é o de Neubauer com uma grade composta por 9 grandes quadrados de 1
mm2 cada.
uma.

A realização de uma citocentrífuga para análise citológica de fluidos biológicos é

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indicado quando a contagem de células em ascite ou líquido pleural excede a figura de 250 células/mm3. No CSF é

indicará a citocentrífuga quando o número de células for igual

ou superior a 10/µL. A Tabela 10 mostra os intervalos de referência dos registros diferenciais de leucócitos.
normais no LCR.

Tabela 10: Intervalos de referência para contagem de células e diferencial de leucócitos no LCR
(Instituto de Padrões Clínicos e Laboratoriais, 2006).

CÉLULAS BENIGNAS EM FLUIDOS BIOLÓGICOS


Na contagem diferencial de células em um fluido biológico, elas devem ser consideradas por centavos de todas as células

nucleados observados. Se você der pouca informação, terá apenas uma contagem pós-percentual de células

mononucleados e polinucleados. É preferível considerar todos os tipos de células em vez de apenas contar

porcentagens de diferentes tipos de leucócitos. Assim, as porcentagens de neutrófilos, linfócitos, eosinófilos, células

células mesoteliais, macrófagos e outros tipos de células, como células plasmáticas ou células atípicas, serão incluídos no

contagem diferencial até 100 elementos.

Para exame citológico ao microscópio, as etapas são as seguintes:

• Inicie a observação com aumento de 100 para analisar se estamos lidando com uma amostra ruim ou com

riqueza celular, e a possível existência de aglomerados de células, cuja morfologia é descrita mais adiante.

Este aumento também permite avaliar se existe uma densidade celular homogénea (maioria de

células de tamanho e morfologia semelhantes), ou uma densidade celular muito heterogênea (células de diferentes

tipos e tamanhos) na amostra.

• Continue com a observação em 500 de aumento para uma melhor observação do personagem.

características morfológicas celulares.

• Termine a análise de células com ampliação de 1000x se a amostra contiver células

células atípicas ou células de morfologia duvidosa.

A seguir estão descritas as características morfológicas das células normais que podem ser observadas quando

analisar fluidos serosos.

1.- CÉLULAS MESOTELIAIS: são apresentadas na Figura 3 e suas características morfológicas são as seguintes:

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• Forma de círculo.

• Tamanho variável entre 10 e 30 ÿ com relação núcleo-citoplasma moderada a baixa, núcleo


central ou ligeiramente excêntrico com contorno arredondado e cromatina pouco condensada.

• O citoplasma é grande e basofílico.

• Geralmente apresentam pouca coesão e algumas vezes podem ser observadas algumas figuras
míticas, sem que sua presença signifique malignidade. A mitose é mais frequente acompanhando
as células mesoteliais com aspecto reativo.

• A presença de vacúolos no citoplasma é sinal de degeneração precoce.


Nestes casos, às vezes pode ser difícil diferenciar com um macrófago.

As células mesoteliais podem ser vistas nos fluidos pleural, ascítico e pericárdico, e sua morfologia mostra
alguma heterogeneidade. Eles podem estar isolados ou formar um agregado. Costumam liberar fluidos
serosos sem que sua presença indique algum tipo de patologia. Como veremos mais adiante nos processos
reativos, sua morfologia é diferente em relação às células mesoteliais normais, podendo ser fagocíticas.

2.-MACROFAGOS: células mostradas na Figura 4. Suas características morfológicas são descritas


abaixo.

• Tamanho médio-grande.

• Núcleo excêntrico de cromatina pouco condensada e contorno arredondado.

• Citoplasma pálido, com aspecto espumoso , por conter vacúolos, e contornos mal definidos.
Ocasionalmente, apresenta um único vacúolo que se move em direção ao núcleo. Pode
mostrar restos de partículas fagocitadas.
• Tendem a ver elementos isolados.

O chamado sistema fagocítico mononuclear (SMF) é formado por células precursoras


monocíticas da medula óssea, monócitos circulantes no sangue periférico e histiócitos teciduais.
Sua principal tarefa é a eliminação, por fagocitose, das substâncias estranhas ao corpo. Além disso,
eles intervêm em outras funções de defesa por meio de uma modulação da resposta imune ou
citotoxicidade mediada por anticorpos.
Monócitos, no nível do tecido , Eles se diferenciam em macrófagos e histiócitos.

Assim, nos líquidos veremos macrófagos e nos monócitos do sangue periférico. A presença de monócitos
em um fluido sugere que seja hemorrágico, o que confirmaremos observando a presença de hematita e
outras células sanguíneas. Ocasionalmente, o citoplasma do macrófago apresenta um único vacúolo que
se desloca até o núcleo. Mais frequentemente, o macrófago ocorre no citoplasma de restos de partículas
fagocitadas.

Macrófagos teciduais derivados de monócitos, dependendo de sua localização, recebem nomes diferentes:
células de Küpffer no fígado, osteoclastos no fígado, células da microglia no sistema nervoso, macrófagos
serosos na pleura e no peritônio, macrófagos

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fagos alveolares no pulmão, macrófagos das cordas e seios esplênicos no baço, células sinusoidais nos
gânglios linfáticos e histiócitos no tecido conjuntivo

CARACTERÍSTICAS CITOLÓGICAS ESPECÍFICAS DE ENFERMAGEM


DES NO NEOPLASIAS EM FLUIDOS SEROSOS:

1.-PROCESSOS INFLAMATÓRIOS:

Diferentes processos inflamatórios agudos ou crônicos podem acometer as cavidades serosas e causar
derrame, freqüentemente exsudato e, portanto, com alto conteúdo celular.

As células que predominam nos processos inflamatórios agudos, geralmente causados por bactérias
piogênicas, são os neutrófilos polimorfonucleares (>50%), como ocorre nos acidentes vasculares cerebrais
associados à pneumonia bacteriana. Os linfócitos predominam nos processos inflamatórios crônicos .

A presença de eosinófilos maior que 10% no líquido pleural pode sugerir a presença de pneumotórax,
outras patologias como embolia pulmonar, hemotórax traumático ou infecções parasitárias.

Macrófagos e células mesoteliais também podem ser observados em menor extensão.


Algumas das células mesoteliais podem ter um aspecto reativo, dizem apresentar, conforme detalhado a
seguir, um tamanho maior e um núcleo de cromatina frouxo e imaturo com a presença de nucléolos.

As células que predominam nos derrames tuberculosos são os linfócitos (> 50%)
juntamente com algumas células mesoteliais.

Figura 3: Células mesoteliais normais em um fluido seroso.

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Figura 4: Macrófago próximo a um linfócito.

2.- PROCESSOS REATIVOS. CÉLULAS MESOTELIAIS REATIVAS:


Alguns processos de etiologia variada podem originar alterações citológicas reativas,
principalmente nas células mesoteliais. As características morfológicas das células mesoteliais
reativas (Figura 5) são detalhadas a seguir:
• Células grandes
• Relação núcleo/citoplasma moderada
• O núcleo apresenta cromatina frouxa e imatura com presença de nucléolos visíveis. •
Algumas células podem ser binucleadas ou multinucleadas. • O citoplasma pode conter
vacuolização. • Tendência de células mesoteliais reativas a se agruparem

• A celularidade acompanhante forma-se por macrófagos. •


Possibilidade de observar algumas mitoses

Figura 5: Grande célula mesotelial reativa com quatro núcleos em um líquido ascítico.

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CÉLULAS NEOPLÁSTICAS EM FLUIDOS BIOLÓGICOS


a) Neoplasias não hematológicas

A observação de células neoplásicas nos diferentes tipos de derrames é muito útil

diagnóstico. A observação de células malignas no estudo citológico permite em muitas ocasiões orientar o diagnóstico

rapidamente, facilitando o manejo posterior do paciente.

Tumores metastáticos são uma causa comum de acidente vascular cerebral. O mecanismo de ligação

É devido à obstrução dos vasos linfáticos de drenagem causada pela metástase gliar.

Nos derrames pleurais, as células neoplásicas mais frequentes que podem ser observadas no pulmão

e mãe. Nos derrames peritoneais, as células tumorais predominantes são aquelas que correspondem

a neoplasias do trato gastrointestinal e ovário.

Características morfológicas das células neoplásicas:

As células tumorais apresentam características típicas de malignidade (Figuras 6 e 7), que estão listadas a seguir:

• Tendência a se agrupar e formar “clusters de células”.

• O citoplasma das células neoplásicas tende a convergir, é o que se chama “elas tendem a

do citoplasma da célula para formar o sincício.

• Pleomorfismo celular com predominância de células muito grandes.

• Aumento da relação núcleo/citoplasma.


• Frequentemente binucleado ou multinucleado

• Núcleo de cromatina frouxo e imaturo com presença de nucléolos nitidamente visíveis


bênçãos

• Intensa basofilia citoplasmática.

• Conteúdo de vacúolos em um dos pólos do citoplasma.

• Canibalismo de células neoplásicas: facilidade de também fagocitar outras células

neoplásico.
• Presença de mitose anormal.

b) Neoplasias hematológicas
As neoplasias hematológicas também podem infiltrar diferentes fluidos biológicos, por isso é importante considerar certas

características morfológicas das células atípicas (Figura 7) para saber diferenciá-las de células normais e de células derivadas de

outras neoplasias não hematológicas.

Atualmente existe uma tecnologia disponível, a citometria de fluxo, através da qual, por meio de certas combinações

com anticorpos monoclonais, é possível identificar a cepa

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de células proliferativas que se infiltram no fluido (B, T, plasmócitos atípicos, linfoma de grandes
células...). As amostras de fluidos biológicos com seu conteúdo celular constituem um material
muito valioso para a orientação diagnóstica inicial, bem como para seu posterior estudo
imunofenotípico.
Não é incomum que um paciente acometido por uma neoplasia linfóide ainda não diagnosticada
e com derrame pleural ou ascítico se dirija ao Serviço de Emergência de um Hospital. O exame
físico pode revelar a presença de linfadenopatia ou visceromegalia. Nestes casos, a contagem
da amostra mostra um alto conteúdo de células, então uma citocentrífuga e exame microscópico
são realizados.
Dos mesmos.

Figura 6: Ninho de células neoplásicas (neoplasia pulmonar) no líquido pleural (x 1000).

Figura 7: Célula correspondente a uma neoplasia ovariana observada no líquido ascítico. Observe o
grande tamanho e a presença de vacúolos de grande diâmetro, preferencialmente localizados em um dos pólos
do citoplasma (neoplasia secretora).

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Figura 8: Infiltração do líquido pleural pelo linfoma de Burkitt. Observe que a celularidade
que acompanha é composta de linfócitos de aparência madura.

OUTROS ACHADOS NO EXAME CITOLÓGICO DE LÍQUIDOS


BIOLÓGICO
• Diferentes tipos de cristais podem ser observados em fluidos biológicos com alguma
frequência. Cristais de urato monossódico podem ser vistos no líquido sinovial, em
forma de agulha e de cor amarela, quando examinados ao microscópio de luz
polarizada; ou cristais di-hidratados de pirofosfato de cálcio na forma de um paralelogramo
romboide ou retangular e de cor azul. Cristais de hematoidina também podem ser
observados em líquidos cuja extração ultrapassa três horas e com alto teor de hematita.

• Raramente é possível visualizar microorganismos e leveduras no líquido ascítico. Será


indicativo de punção da asa intestinal, pois parte de seu conteúdo pode passar para o
líquido

• Finalmente, também é possível observar em fluidos serosos a presença de


pigmento dentro dos macrófagos. Pode ser devido à infiltração de células de melanoma
ou outras causas, como pigmento biliar no líquido ascítico, secundário a complicações
de intervenções cirúrgicas no trato digestivo.

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BIBLIOGRAFIA

Documento elaborado pela Comissão de Magnitudes Biológicas relativo à Emergência Médica do


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FORMAÇÃO CONTÍNUA NO LABORATÓRIO CLÍNICO


COMITÊ DE EDUCAÇÃO

D. Balsells, B. Battikhi (Residente), R. Deulofeu, M. Gassó, N. Giménez, A. Merino,


A. Moreno, A. Peña (Residente), M. Rodríguez (Presidente), N. Rico, MC. Cidade.

ISSN 1887-6463 – junho de 2017 (recebido para publicação em março de 2017).

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