Aminoácidos:

estrutura, função e propriedades

físico-químicas

Anderson Pinheiro
 FundamentosBioquímica
químicos da Bioquímica
• A organização hierárquica das células;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas são as macromoléculas biológicas mais
abundantes;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas possuem tamanhos variados;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas são o produto final do metabolismo
informacional;

Transcrição

Tradução

Instrumentos moleculares
através dos quais a informação
genética é expressa!
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Bioquímica
Proteínas
• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;
 Proteínas

• As proteínas apresentam diversas funções biológicas;

 Aminoácidos

• As proteínas são polímeros de aminoácidos;

• Os aminoácidos possuem um grupo carboxila e um grupo

amino ligados a um mesmo átomo de carbono (C);
grupo amino grupo carboxila
 Aminoácidos

• Átomos da cadeia lateral nomeados a partir do C;

 Aminoácidos
• As proteínas são constituídas por um grupo de 20 aas mais
comuns;
 Aminoácidos
• As proteínas são constituídas por um grupo de 20 aas mais
comuns;
 Aminoácidos

• Os aminoácidos diferem uns dos outros de acordo com o seu

grupamento R;
• Classificados de acordo com as propriedades do grupamento
R: polaridade;
 Aminoácidos
• Classificados em 5 grupos: apolares alifáticos, aromáticos,
polares não-carregados, polares positivos e polares
negativos;
Apolares alifáticos
 Aminoácidos
• Classificados em 5 grupos: apolares alifáticos, aromáticos,
polares não-carregados, polares positivos e polares
negativos;
Apolares alifáticos

- Hidrofóbicos
 Aminoácidos
• Classificados em 5 grupos: apolares alifáticos, aromáticos,
polares não-carregados, polares positivos e polares
negativos;
Apolares alifáticos

- Menor aa

- Cadeia lateral H
 Aminoácidos
• Classificados em 5 grupos: apolares alifáticos, aromáticos,
polares não-carregados, polares positivos e polares
negativos;
Apolares alifáticos

- Contém S

- Grupo tioéter
 Aminoácidos
• Classificados em 5 grupos: apolares alifáticos, aromáticos,
polares não-carregados, polares positivos e polares
negativos;
Apolares alifáticos

- Cadeia lateral
cíclica

- Grupo imino
Aminoácidos

Aromáticos
Aminoácidos

Aromáticos

- Hidrofóbicos
Aminoácidos

Aromáticos

- Hidrofóbicos

- Phe mais hidrofóbica do

que Tyr e Trp

- Absorvem luz UV
 Aminoácidos
• Lei de Lambert-Beer;

Espectrofotometria

𝑰𝟎
𝒍𝒐𝒈 𝑰 = cl
 Aminoácidos

Polares não-carregados

• Contêm grupamentos funcionais que fazem ligações

hidrogênio com a água
 Aminoácidos

Polares não-carregados

• Contêm grupamentos funcionais que fazem ligações

hidrogênio com a água

- Grupo hidroxila
 Aminoácidos

Polares não-carregados

• Contêm grupamentos funcionais que fazem ligações

hidrogênio com a água
Dissulfeto - Grupo sulfidrila
Intermolecular

Dissulfeto
Intramolecular
 Aminoácidos

Polares não-carregados

• Contêm grupamentos funcionais que fazem ligações

hidrogênio com a água

- Grupo amida
 Aminoácidos

Polares positivos

• Grupamentos R carregados positivamente a pH 7,0;

 Aminoácidos

Polares positivos

• Grupamentos R carregados positivamente a pH 7,0;

- Grupo amino
 Aminoácidos

Polares positivos

• Grupamentos R carregados positivamente a pH 7,0;

- Grupo guanidino
 Aminoácidos

Polares positivos

• Grupamentos R carregados positivamente a pH 7,0;

- Grupo imidazol
 Aminoácidos

Polares negativos

• Grupamentos R carregados negativamente a pH 7,0;

• Grupos carboxílicos;
 Aminoácidos

• Em todos os aminoácidos comuns, com exceção da Gly, o C

está ligado a 4 substituintes diferentes;
• O C constitui um centro quiral;
• Os aminoácidos possuem 2 estereoisômeros;
 Aminoácidos

• Em todos os aminoácidos comuns, com exceção da Gly, o C

está ligado a 4 substituintes diferentes;
• O C constitui um centro quiral;
• Os aminoácidos possuem 2 estereoisômeros;

• Atividade ótica;
 Aminoácidos

• Nomenclatura baseada na configuração absoluta do centro

quiral;
• Isômeros D e L baseados na configuração do gliceraldeído;

• ATENÇÃO:

Nem todos os
L-aas possuem
atividade
levógena!
 Aminoácidos

• As proteínas são formadas exclusivamente por L-aas;

• D-aas são extremamente raros em proteínas!

 Aminoácidos

• As proteínas apresentam outros aas além dos 20 mais

comuns;
• Aas formados a partir da modificação de resíduos já
incorporados na cadeia polipeptídica

Colágeno

Miosina

Pró-trombina
 Aminoácidos

• As proteínas apresentam outros aas além dos 20 mais

comuns;
• Aas formados a partir da modificação de resíduos já
incorporados na cadeia polipeptídica;

Elastina
 Aminoácidos

• As proteínas apresentam outros aas além dos 20 mais

comuns;
• Aas introduzidos durante a síntese protéica;

Glutationa Redutase
 Aminoácidos

• Outros aas são encontrados nas céls porém não fazem parte
de proteínas;

Intermediários da
biossíntese de Arg e
do ciclo da uréia

Neurotransmissor

Taurina
 Aminoácidos

• Derivados de aas com atividade biológica;

Neurotransmissor
 Aminoácidos

• Derivados de aas com atividade biológica;

Neurotransmissor
 Aminoácidos– características estruturais
Apolares alifáticos Aromáticos

Polares não-carregados Positivos Negativos

 Aminoácidos– propriedades ácido-base

• Os aas existem em solução como um íon dipolar ou

zwitterion;
 Aminoácidos– propriedades ácido-base

• Os aas podem agir como um ácido (doador de H+s) ou base

(aceptor de H+s);

ÁCIDO – DOA H+s PARA O MEIO

BASE– CAPTA H+s DO MEIO

• Substâncias anfóteras;
 Aminoácidos– propriedades ácido-base

• -aas simples funcionam como ácidos dipróticos quando

completamente protonados;

Gly
Aminoácidos– curvas de titulação
Aminoácidos– curvas de titulação

• Gráfico com 2 estágios

referentes à desprotonação
de 2 grupos diferentes;

Ác. acético
Aminoácidos– curvas de titulação

• Gráfico com 2 estágios

referentes à desprotonação
de 2 grupos diferentes;

• pHs muito baixos:

Aminoácidos– curvas de titulação

• Gráfico com 2 estágios

referentes à desprotonação
de 2 grupos diferentes;

• pHs muito baixos;

• Ponto de inflexão do primeiro
estágio:

doadora aceptora
Aminoácidos– curvas de titulação

• Gráfico com 2 estágios

referentes à desprotonação
de 2 grupos diferentes;

• pHs muito baixos;

• Ponto de inflexão do primeiro
estágio;
• Ponto de inflexão: pH = pKa

Henderson-Hasselbach

pH = pKa + log [A-]/[HA]

Aminoácidos– curvas de titulação

• Gráfico com 2 estágios

referentes à desprotonação
de 2 grupos diferentes;

• pHs muito baixos;

• Ponto de inflexão do primeiro
estágio;
• Ponto de inflexão: pH = pKa
• Ponto médio (pH = 5,97):
Aminoácidos– curvas de titulação

• Gráfico com 2 estágios

referentes à desprotonação
de 2 grupos diferentes;

• pHs muito baixos;

• Ponto de inflexão do primeiro
estágio;
• Ponto de inflexão: pH = pKa
• Ponto médio (pH = 5,97):
• Segundo estágio: remoção
do H+ do grupo amino;
Aminoácidos– curvas de titulação

• Gráfico com 2 estágios

referentes à desprotonação
de 2 grupos diferentes;

• pHs muito baixos;

• Ponto de inflexão do primeiro
estágio;
• Ponto de inflexão: pH = pKa
• Ponto médio (pH = 5,97):
• Ponto de inflexão do
segundo estágio:
Aminoácidos– curvas de titulação

• Gráfico com 2 estágios

referentes à desprotonação
de 2 grupos diferentes;

• pHs muito baixos;

• Ponto de inflexão do primeiro
estágio;
• Ponto de inflexão: pH = pKa
• Ponto médio (pH = 5,97):
• Ponto de inflexão do
segundo estágio:
• Ponto de inflexão: pH = pKa
Aminoácidos– curvas de titulação

• Gráfico com 2 estágios

referentes à desprotonação
de 2 grupos diferentes;

• pHs muito baixos;

• Ponto de inflexão do primeiro
estágio;
• Ponto de inflexão: pH = pKa
• Ponto médio (pH = 5,97):
• Ponto de inflexão do
segundo estágio:
• Ponto de inflexão: pH = pKa
• pHs muito altos:
Aminoácidos– curvas de titulação

• Medida quantitativa do pKa

de cada grupo ionizante
Aminoácidos– curvas de titulação

• Medida quantitativa do pKa

de cada grupo ionizante

• Grupo carboxila da Gly é

100x mais ácido que do HAc
 Aminoácidos– curvas de titulação
• Grupo carboxila da Gly é 100x mais ácido que do HAc;
• Repulsão eletrostática do H+ liberado pelo grupo amino;
Aminoácidos– curvas de titulação

• Medida quantitativa do pKa

de cada grupo ionizante

• Grupo carboxila da Gly é

100x mais ácido que do HAc

• Gly possui duas regiões

tamponantes
Aminoácidos– curvas de titulação

• Medida quantitativa do pKa

de cada grupo ionizante

• Grupo carboxila da Gly é

100x mais ácido que do HAc

• Gly possui duas regiões

tamponantes
• Relação entre pH e carga
elétrica;
• Ponto isoelétrico (pI): pH no
qual a carga elétrica do aa é
zero!
Aminoácidos– curvas de titulação

• Medida quantitativa do pKa

de cada grupo ionizante

• Grupo carboxila da Gly é

100x mais ácido que do HAc

• Gly possui duas regiões

tamponantes
• Relação entre pH e carga
elétrica;
• Ponto isoelétrico (pI): pH no
qual a carga elétrica líquida
do aa é zero!

• pI = ½ (pK1 + pK2)
Aminoácidos– curvas de titulação

• pI = ½ (pK1 + pK2)

• pH > pI → Gly negativa

pH < pI → Gly positiva

Aminoácidos– curvas de titulação

• pI = ½ (pK1 + pK2)

• pH > pI → Gly negativa

pH < pI → Gly positiva

• Todos os aas com 1 grupo

-amino, -carboxila, R não-
inonizável;
Aminoácidos– curvas de titulação

• pI = ½ (pK1 + pK2)

• pH > pI → Gly negativa

pH < pI → Gly positiva

• Todos os aas com 1 grupo

-amino, -carboxila, R não-
inonizável;
• Aas que possuem R
ionizável? → curva de
titulação com 3 estágios;
 Aminoácidos ácidos

Polares negativos

• Grupamentos R carregados negativamente a pH 7,0;

• Grupos carboxílicos;
 Aminoácidos básicos

Polares positivos

• Grupamentos R carregados positivamente a pH 7,0;

 Aminoácidos básicos

Polares positivos

Amina 1a Guanidino Imidazol

Aas ácidos– curvas de titulação

• pI reflete a natureza
química do grupo R;
Aas ácidos– curvas de titulação

• pI reflete a natureza
química do grupo R;

• Glu pI = 3,22;

• Glu pI < Gly pI → dois

grupos carboxílicos

ponto isoelétrico
Aas ácidos– curvas de titulação

• pI reflete a natureza
química do grupo R;

• Glu pI = 3,22;

• Glu pI < Gly pI → dois

grupos caroxílicos

• pI = ½ (pK1 + pKR);

ponto isoelétrico
Aas básicos– curvas de titulação

• His pI = 7,59;

• pI = ½ (pKR + pK2);

ponto isoelétrico
Aas básicos– curvas de titulação

• His pI = 7,59;

• pI = ½ (pKR + pK2);

• Cálculo do pI →
média dos pKs
anterior e posterior
à forma isoelétrica
do aa;
Aas básicos– curvas de titulação

• His pI = 7,59;

• pI = ½ (pKR + pK2);

• Cálculo do pI →
média dos pKs
anterior e posterior
à forma isoelétrica
do aa;
• Único aa com pKa
próximo a 7,0;
Aas básicos– curvas de titulação

• His pI = 7,59;

• pI = ½ (pKR + pK2);

• Cálculo do pI →
média dos pKs
anterior e posterior
à forma isoelétrica
do aa;
• Único aa com pKa
próximo a 7,0;

• Tamponamento na
região de pH
fisiológico;
Proteínas– curvas de titulação

RNAseA

• Diversos grupamentos
ionizáveis;
• Estrutura 3D da
proteína;
• Função da
concentração de sal no
meio;
 Proteínas– curvas de titulação
• Ponto isoelétrico é o pH no qual a carga elétrica líquida da
proteína é igual a zero!

• No pI, a proteína se torna insolúvel e sofre precipitação;

pH < pI pH = pI pH > pI

+ + +
+ + −
+ − −
+ + + −

− + +
− −
+ − + − + −
− −

Precipitação
isoelétrica
 Proteínas– curvas de titulação

• Medida teórica do ponto isoelétrico

maqlgavvav assffcaslf savhkieegh igvyyrggal ltstsgpgfh lmlpfitsyk 61
svqttlqtde vknvpcgtsg gvmiyfdrie vvnflvpnav ydivknytad ydkalifnki 121
hhelnqfcsv htlqevyiel fdqidenlkl alqqdltsma pglviqavrv tkpnipeair 181
rnyelmesek tklliaaqkq kvvekeaete rkkalieaek vaqvaeityg qkvmeketek 241
kiseiedaaf larekakada ecytamkiae anklkltpey lqlmkykaia snskiyfgkd 301
ipnmfmdsag svskqfegla dklsfglede pletatken

• Medida experimental do pI: focalização isoelétrica;