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CISBEM
SUMÁRIO
1 INTRODUÇÃO.............................................................................................. 3
2 DESENVOLVIMENTO.................................................................................. 4
2.1 OBJETIVO GERAL....................................................................................... 4
2.2 METODOLOGIAS......................................................................................... 4
2.2.1 PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS..................................................... 5
2.3 RESULTADOS.............................................................................................. 12
3 CONCLUSÕES E RECOMENDAÇÕES........................................................13
ANEXOS........................................................................................................14
REFERÊNCIAS.............................................................................................16
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1 INTRODUÇÃO
Após o mundo parar devido à crise sanitária do novo covid-19, algumas pessoas se
deram conta de como é importante à higienização correta de alimentos e de
produtos que tem um contato mais direto com a saúde. Mas esse hábito de
higienização de alimentos é de extrema importância, isso devido a quantidade de
microorganismos que podem estar presentes em algo que podemos consumir. Dito
isso, neste ensaio será feito semeadura de duas substancias que podem ou não
conter algum tipo de microrganismo. Utilizado a técnica de múltiplos tubos, técnica
usada para estimativa de densidade de bactérias d grupo de coliformes por numero
mais provável (NMP). Essa técnica é utilizada na avaliação da qualidade
bacteriológica de amostras de água brutas ou tratadas destinadas ao consumo
humano, recreação ou irrigação, assim como na avaliação da eficiência de
processos de tratamento de águas e águas residuais domésticas ou industriais e
integridade dos sistemas de distribuição.
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2 DESENVOLVIMENTO
2.2 METODOLOGIAS
ANÁLISES DE COLIFORMES POR TUBOS MÚLTIPLOS (NMP),
SEMEADURA EM MEIOS SÓLIDOS
COLORAÇÃO DE GRAM EM ALIMENTOS
De acordo com o número de tubos positivos em cada uma das diluições e das fases
utilizadas, determina-se o número mais provável (NMP), tendo como base tabelas
estatísticas.
Acesse as tabelas de NMP e os procedimentos completos para análise de
coliformes, segundo o FDA, no link:
www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm109656.htm#tab1
Usando a Tabela, é possível estimar o número de organismos a partir de qualquer
combinação de resultados positivos e negativos com 95% de confiança dos dados.
Interpretação
Crescimento no Agar MacConkey – Gram Negativos
Fermentadores de Lactose – Colônia Rosa
Não Fermentadores de Lactose – Colônia Incolor ou Branca
Crescimento no Agar Manitol – Gram Positivas
Colônia pequeno e rodeadas de uma zona vermelha – estafilococos não-
patogênicos
Colônia maiores e rodeadas de uma zona amarela – Staphylococcus aureus
fermentadores do manitol
2.2.4.1 OBJETIVO
Nesta aula o aluno irá executar o método de coloração de Gram, em esfregaços já
previamente preparados e fixados pelo calor. Posteriormente, o aluno realizará a
visualização dos esfregaços corados no microscópio óptico empregando a objetiva
de imersão, deverão ser capazes de caracterizar a morfologia individual, a formação
de agrupamentos e diferenciação da coloração da célula bacteriana.
2.3 RESULTADOS
Foram obtidos os resultados das amostras A e B, onde a amostra A foi identificada
com a presença de Escherichia coli, bactéria gram negativa. Bactéria anaeróbica
(catalase negativa).
Já na amostra B, foi identificado Staphylococcus aureus. Bactéria gram positiva,
aeróbica (catalase positivo).
Na analise dos tubos, apenas o tubo A de de caldo BHI com 7,5% NACL com tampa
e estéril teve reação positiva. Os demais não apresentaram modificações.
3 CONCLUSÕES E RECOMENDAÇÕES
Após as semeaduras, é possível identificar qual a bactéria que está presente na
amostra, tanto amostra de alimentos embolorados como alimentos mal manuseados
ou mal processados.
Algumas placas de cultura não obtiveram proliferação, podendo ser devido a
contaminação ou forma de semeadura incorreta durante o ensaio.
As laminas feitas para coloração de Gram estava danificadas, o material já não
estava mais utilizável para analise após uma semana. O conteúdo estava
degradado. Então foram feitas novas laminas no mesmo dia para a identificação das
bactérias presentes na amostra A e B.
Para este tipo de teste deve-se seguir as regras de semeadura para que não ocorra
contaminação ou erro de produção levando ao desperdício de materiais.
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ANEXO
TÉCNICAS DE SEMEADURA
Semeadura em Placas de Petri:
O material a ser semeado deverá conter poucos microrganismos porque o inóculo
para o isolamento deve ser leve. Lembrar que cada colônia formada na superfície de
um meio sólido é originada de um ou alguns microrganismos. Quanto maior o
número, menor possibilidade de isolamento e maior probabilidade de crescimento
confluente. Quando o inóculo for obtido a partir de meio sólido (inóculo pesado), este
poderá ser diluído em salina estéril ou ser utilizada a técnica de esgotamento
adequada.
Estrias Múltiplas para Isolamento: Consiste em espalhar o material com o auxílio de
uma alça bacteriológica, fazendo estrias sucessivas até o esgotamento do material,
de modo a obter-se um perfeito isolamento das bactérias existentes na amostra.
Quando o material é muito denso, a alça deverá ser flambada. A semeadura poderá
ser realizada em um sentido ou em vários, de acordo com a pessoa que realizará a
técnica, lembrando-se sempre que o objetivo principal desta técnica de semeadura é
a obtenção do isolamento bacteriano.
REFERÊNCIAS
bsjoi.ufsc.br/files/2010/.../Modelo_de_relatorio_tecnico-cientifico.do